Silencer™ Select GAPDH siRNA
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Invitrogen™

Silencer™ Select GAPDH siRNA

Die In-vivo-fähige Ambion™ Silencer™ Select Positivkontroll-siRNA für GAPDH ist umfassend validiert und eignet sich optimal als Kontrolle für viele AspekteWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
4404024250 nmol
Katalognummer 4404024
Preis (EUR)
2.451,95
Online Exclusive
2.755,00
Ersparnis 303,05 (11%)
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Menge:
250 nmol
Preis (EUR)
2.451,95
Online Exclusive
2.755,00
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Die In-vivo-fähige Ambion™ Silencer™ Select Positivkontroll-siRNA für GAPDH ist umfassend validiert und eignet sich optimal als Kontrolle für viele Aspekte eines siRNA-Experiments. Die Kontrolle ist für die Verwendung bei Tieren vorschriftsmäßig hochgereinigt. 250 nmol im Lieferumfang enthalten.

• Hochwertige hochgereinigte und gebrauchsfertige siRNA
• Funktionell getestet in mehreren gängigen Zelllinien
• Enthält Modifikationen von Silencer™ Select zur Erhöhung der Spezifität
• Zur Verwendung mit Human-, Maus- und Ratten-Zellen

Was sind Silencer™ Select siRNAs?
Durch Einbindung der neuesten Fortschritte in den Bereichen siRNA-Design, Algorithmen zur Vorhersage von Off-Target-Effekten und chemische Modifikationen erzeugen Silencer™ Select siRNAs siRNAs mit beispielloser Effizienz, Wirksamkeit und Spezifität. Die Folge sind weniger fehlgeschlagene Experimente durch schlechtes Gen-Silencing und sauberere und einheitlichere phänotypische Daten.

Silencer™ Select Positivkontroll-siRNA für GAPDH:
Die Silencer™ Select Positivkontroll-siRNA für GAPDH ist umfassend validiert und eignet sich optimal als “Test”-siRNA für Anfänger im Bereich der siRNA-Experimente, da sie für die Arbeit in mehreren Zelllinien validiert ist. Da sie auf GAPDH mRNA (eine allgemeine interne Kontrolle) zielt, stehen viele Assays zur Messung ihrer Effekte zur Verfügung, darunter Echtzeit-RT-PCR sowie das Ambion™ KDalert™ GAPDH Assay-Kit.

Qualitätskontrolle:
Silencer™ Select siRNAs werden in einem hochmodernen Werk unter höchsten Qualitätsstandards hergestellt. Zur strengen Qualitätskontrolle gehören die MALDI-TOF-Massenspektrometrie und analytische HPLC zur Reinheitskontrolle. Jede siRNA wird auch mittels Gel-Elektrophorese analysiert, um eine ordnungsgemäße Bindung der Stränge zu bestätigen. Darüber hinaus durchlaufen für In-vivo-Verfahren geeignete siRNAs zur Entfernung von überschüssigem Salz zusätzlich eine Reinigung mit semipermeabler Membran. Danach werden sterile Filtrations- und Endotoxintests durchgeführt. Bei einer Konzentration von 50 μM in entionisiertem Wasser enthält für In-vivo-Verfahren geeignete siRNA: unter 0,6 mM Na+, unter 2,0 mM K+ und unter 0,1 mM Mg2+. Silencer™ Select siRNA-Kontrollen weisen spezifische chemische Modifikationen auf; sie sind auf die Verwendung mit Silencer™ Select siRNAs ausgelegt. Bei der Verwendung anderer siRNA-Produkte wie BLOCK-iT™ siRNAs, Ambion™ Silencer™ siRNAs oder STEALTH RNAi™ siRNAs, sollten die für diese siRNAs entwickelten Kontroll-siRNAs verwendet werden, um zuverlässigere experimentelle Ergebnisse zu erhalten.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Marker oder FarbstoffUnkonjugiert
ProduktlinieSilencer Select, Ambion
ProdukttypsiRNA
ReinheitHPLC
Menge250 nmol
VersandbedingungRaumtemperatur
RegelungsartGen-Knockdown-Positivkontrolle
RNAi TypesiRNA
TargetGAPDH
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Die siRNA wird in einem einzelnen Röhrchen getrocknet geliefert und sollte bei –20 °C gelagert werden.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What are the benefits of using a vector to deliver RNAi?

Vector technologies allow you to:

Achieve transient or stable target knockdown
Perform RNAi in any cell type, even hard-to-transfect, primary, and non-dividing cells
Regulate gene inhibition with inducible siRNA expression
Select for a pure population of cells stably expressing an siRNA sequence
Control gene expression in vivo with tissue-specific promoters

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNAi Support Center.

Why are my cells dying after transfection?

We would suggest running a transfection reagent control only to determine if your cells are sensitive to the transfection reagent. Additionally, you can try using different cell densities and siRNA concentrations to diminish any toxic effects from the transfection itself.

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I transfected my siRNA and the mRNA levels are down, but the protein is not. Why is that?

In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down. Additionally, a longer time course may be needed to see an effect on protein compared to mRNA.

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I am not getting my target knockdown. What could be the cause of this?

Please see the following possibilities and suggestions:

- How many siRNA did you test? Is there any knockdown? If there is no knockdown (<10%) in any of the siRNA, then the assay is likely the problem. Try using a different qRT-PCR assay to assess knockdown.
- What was the positioning of the qRT-PCR assay target site relative to the cut site for the siRNA? If greater than 3,000 bases away, the problem could be alternative splice transcripts.
- What are the Cts for the experiment? They should be below 35 in a 40-cycle qRT-PCR experiment.
- Did you confirm the siRNA got into the cell? We recommend using a validated positive control siRNA to check the transfection efficiency.

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I am not getting any knockdown with my siRNA. What do you suggest I try?

Please see the following possibilities and suggestions:

- Were the mRNA levels checked? The most reliable method is real-time PCR. In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables, such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down.
- How is the RNA being isolated? Has the quality of the isolated RNA been checked? Ensure that the RNA has not been degraded.
- Was a positive control used? This can help to determine whether the reagents are working and whether the siRNA was delivered correctly to the cell. Run your experiment in parallel with the positive control siRNA.
- Was a transfection control used? What is the percentage of transfected cells?
- Was a time course used? Generally, gene silencing can be assessed as early as 24 hours posttransfection. However, the duration and level of knockdown are dependent on cell type and concentration of siRNA.
- Was optimization of transfection conditions performed? You can try using different cell densities and siRNA concentrations.
- Which concentration of siRNA did you use? We recommend testing multiple concentrations between 5 nM and 100 nM.

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