TaqMan™ Array Human Stem Cell Pluripotency

Das Assay-Panel in dieser Platte wurde in Zusammenarbeit mit der International Stem Cell Initiative (2007 Nature Biotechnology) ausgewählt. 25:803-816). Die Assays zielen auf Gene ab, die als Marker für die Charakterisierung der menschlichen embryonalen Stammzellidentität validiert werden und zur Beurteilung der Variationen zwischen embryonalen Stammzellisolaten dienen. Die Gene werden anhand der folgenden Kriterien einbezogen:

• Expression in humanen embryonalen Karzinomzellen, primordialen Keimzellen oder humanen embryonalen Stammzellen
• Bekannte Rolle bei der Erhaltung der Pluripotenz in humanen embryonalen Stammzellen;
• wurden in mikroarraybasierten Experimenten als korreliert mit dem Stammzellzustand erkannt. Um Zellen zu identifizieren, die den pluripotenten Zustand verlassen haben, haben wir auch Gene einbezogen, deren Expression charakteristisch für spezifische Differenzierungslinien im Embryo nach der Implantation und im reifen Gewebe ist.

Gensignaturplatten sind 96-Well-Platten, die mit den am besten geeigneten TaqMan™ Genexpressions-Assays für einen bestimmten biologischen Prozess, eine bestimmte Bahn oder einen bestimmten Krankheitszustand vorkonfiguriert sind. Jede Platte enthält vordefinierte Assays und endogene Kontrollen, die in den Wells abgetrocknet und für eine genaue Beurteilung der gesamten Gensignatur in einem einfachen Experiment geeignet sind.

• Günstig; Mindestbestellmenge von drei Platten; ideal für kleine, mittlere oder große Projekte
• Schnelle Lieferung; auf Ihrem Tisch in Tagen
• Praktisch; Trocken-PCR-Primer und TaqMan™ Sondensets werden in einer 96-Well-Platte geliefert; Fügen Sie einfach Mastermix und Ihre Probe hinzu
• Gleiche TaqMan™Assay-Qualität, neues Format

TaqMan™ Array-Platten enthalten die gleichen hochwertigen TaqMan™ Genexpressions-Assays (PCR-Primer und TaqMan™ Sondensets), die seit Jahren in einem praktischen, getrockneten 96-Well-Format kommerziell erhältlich sind. In umfangreichen Tests konnte kein Leistungsunterschied zwischen im herkömmlichen Flüssigformat gelieferten TaqMan™Assays und in eine TaqMan™ Array-Platte eingetrockneten Assays festgestellt werden. Abbildung 1 zeigt die Ergebnisse eines Experiments, bei dem der lineare Bereich der beiden Formate verglichen wurde und kein Leistungsunterschied festgestellt werden konnte.

Fügen Sie einfach Mastermix und Ihre Probe hinzu und beginnen Sie mit dem Cycling
Ideal für Projekte wie die Validierung von Mikroarray- und RNAi-Daten und Pathway-Studien. Die Platten enthalten genau die richtige Menge an TaqMan™Assay in jedem Well: ausreichend für eine 20 μl-Reaktion. Die Mindestbestellmenge beträgt nur drei Gensignatur-Platten, was es für viele Labore erschwinglich macht und wodurch weniger einzeln gekaufte TaqMan™Assays ungenutzt weggeworfen werden. Sparen Sie viel Zeit beim Vorbereiten Ihrer Experimente. Fügen Sie einfach Mastermix und Probe hinzu, und beginnen Sie mit dem Cycling.

Abbildung 2 ist ein Beispiel-Platten-Layout mit Gen-Symbolen und Assay-IDs

Die Plattenkarte gewährleistet eine korrekte Datenkennzeichnung und einfache Neubestellung
Jede Packung TaqMan™ Array-Platten wird mit einer CD geliefert, die die Plattenkonfigurationskarte (siehe Abbildung 2) zusammen mit den Details jedes TaqMan™Assays enthält. Diese Informationen werden in das Echtzeit-PCR-Gerät importiert, um eine ordnungsgemäße Kennzeichnung der experimentellen Daten zu ermöglichen und einen einfachen Zugriff auf Assay-ID-Nummern für eine einfache Neuanordnung zu ermöglichen.

Einfache Handhabung
Jede TaqMan™ Array-Platten-Well enthält ein einzelner TaqMan™ Assay für eine 20 μl-Reaktion. Die Platten können bei Raumtemperatur oder 4 °C gelagert werden. Wenn Sie bereit sind, Ihre Assays auszuführen, fügen Sie einfach den PCR-Mastermix und Ihre cDNA-Probe hinzu, verschließen Sie die Platte, und beginnen Sie mit dem Cycling auf einem Echtzeit-PCR-Gerät.

Kompatibilität
TaqMan™ Array-Platten wurden für die Verwendung mit TaqMan™ Genexpression-Mastermix optimiert, sind aber auch mit TaqMan™ Universal-PCR-Mastermix kompatibel. Für Studien mit kultivierten Zellen sind TaqMan™ Array-Platten auch mit dem TaqMan™ Genexpression Cell-to-CT™ Kit kompatibel (und dafür empfohlen). TaqMan™ Array-Platten müssen auf einem Echtzeit-PCR-Gerät mit 96-Well Plattenkapazität laufen. Die Platten wurden für die Verwendung mit Applied Biosystems™ 7000, 7300, 7500 und 7900HT Fast Real-Time-PCR-Systemen validiert, wobei 96-Well-Standardblöcke, standardmäßige PCR-Zyklusbedingungen und 20 μl-Reaktion verwenden.