AmpFLSTR™ NGM SElect™ PCR Amplification Kit

Das NGM Select Kit ist ein äußerst robustes, Multiplex-Kit zur einfachen Amplifikation für STR-Analysen (Short Tandem Repeat). Es wurde für Labors zur menschlichen Identifikation entwickelt, die das erweiterte europäische Standard-Set von Loci mit dem hochpolymorphen SE33-Locus verwenden möchten. Das NGM Select Kit vereint die neuesten Fortschritte bei der Primersynthese, der Pufferverstärkung und der Optimierung von thermischen Zyklen. Dadurch kann das Kit eine hohe Empfindlichkeit bei einer verbesserten STR-Leistung für forensische Fallarbeit und Datenbankproben in einem einfachen Arbeitsablauf liefern.

Hauptmerkmale des NGM Select Kits:

• Herausragende Datenqualität und Diskriminierungsfunktionen unterstützen den internationalen Datenaustausch
• Ermöglicht eine deutlich verbesserte Leistung bei inhibierten und degradierten Proben
• Ermöglicht eine höhere Empfindlichkeit
• Maximiert die Übereinstimmung mit bereits typisierten Proben
• Ermöglicht eine zuverlässige Interpretation, Fördert einen optimierten Arbeitsablauf und optimiert den Implementierungsprozess

Datenqualität für den Austausch geeignet
Das NGM Select Kit wurde entwickelt, um ein leistungsstarkes Maß an Diskriminierung und Datenqualität zu bieten, das Initiativen zur grenzüberschreitenden Datenfreigabe unterstützt. Das Kit erfüllt die Anforderungen des Europäischen Netzes forensischer Wissenschaftsinstitute (ENFSI) und der Europäischen DNA-Profilierungsgruppe (EDNAP) und umfasst das erweiterte Europäische Standardset Loci (ESSL).

Das NGM Select Kit verstärkt gleichzeitig die gleichen 16 Loci, die im NGM Kit enthalten sind (D3S1358, vWA, D16S539, D2S1338, D8S1179, D21S11, D18S51, D19S433, TH01, FGA, Amelogenin, D10S1248, D22S1045, D2S441, D1S1656, D12S391) mit dem hochpolymorphen SE33-Locus im PET-Farbstoffkanal (rot) (Abbildung 1).

Konfiguriert für den Erfolg
Mit unserer Expertise in den Technologien 5-Farbstoff und Mobilitätsmodifikator werden 17 Loci in einer einzigen Amplifikation untergebracht, wobei der optimale Abstand gewahrt bleibt (Abbildung 2). Dies ermöglicht eine eindeutige Allelbestimmung. Alle Amplikone fallen unter 450 Basenpaare (bp), um die Leistung in zahlreichen forensischen Proben zu maximieren. Die meisten Loci sind auf weniger als 200 bp konzentriert, was die Rückgewinnung einer größeren Anzahl von Allelen aus schwierigen degradierten Proben ermöglicht.

Starke Diskriminierung
Die Kombination von Loci im NGM Select Kit ergibt die höchste Diskriminierungsleistung jedes AmpFLSTR-Kits (Tabelle 1). Dies trägt dazu bei, zufällige Übereinstimmungen beim Vergleich großer Datensätze (z. B. für den grenzüberschreitenden Datenaustausch) zu minimieren. Das NGM Select Kit eignet sich auch für andere Anwendungen, die eine höhere Diskriminierung erfordern. Hierzu gehören unter Anderem:
• Komplexe Kinesisanalyse
• Erkennung von Unfallopfern
• Ermittlungen bei vermissten Personen

Erlaubt eine erheblich verbesserte Leistung bei inhibierten und degradierten Proben
Bringt die neusten Fortschritte in der PCR-Amplifikationstechnologie, die mit dem NGM-Kit eingeführt wurde, ein, sodass das NGM Select Kit die Wiederherstellung von Daten aus schwer inhibierten und degradierten Proben ermöglicht. Das NGM Select Kit kann beispielsweise vollständige Profile auch aus Proben extrahieren, die hohe Konzentrationen von PCR-Inhibitoren wie Huminsäure enthalten (Abbildung 3).

Leistung mit höherer Empfindlichkeit
Das NGM Select Kit profitiert von den gleichen Empfindlichkeitsverbesserungen wie das NGM Kit, was zu einer überlegenen Allele-Wiederherstellung bei niedrigeren Eingangssignalpegeln führt (Abbildung 4). Dies kann auch die Erkennung eines geringfügigeren Beitrags in einer Mischprobe verbessern. Das standardmäßige 1 ng-DNA-Eingabeprotokoll mit 29 Zyklen ermöglicht eine maximale Profilbalance. Auch ein validiertes Protokoll mit 30 Zyklen ist verfügbar. Die höhere Zyklusnummer führt zu einer entsprechenden Signalerhöhung, wodurch die Möglichkeit der Allele-Detektion von niedrigeren Input-DNA-Mengen erhöht wird. Die Verwendung von 30 Zyklen führt bei einem Input von 1 ng auch zu Offscale-Daten (Abbildung 4). Daher müssen Labore, die dieses Protokoll übernehmen möchten, die für ihren Arbeitsablauf geeignete optimale Input-DNA durch interne Validierungsstudien bestimmen.

Maximierung der Konkordanz
Das NGM Select Kit enthält identische Primer-Sequenzen für die STR-Core-Loci wie die Kits SGM Plus, Identifiler und SEfiler Plus, und bietet dadurch folgende Vorteile:
• Maximale Übereinstimmung mit vorhandenen Datensätzen für vereinfachte Verlaufsvergleiche
• Minimale Anforderungen für Wiederholungsanalysen zur Korrektur nicht übereinstimmender Ereignisse
•Geringerer Schulungs- und Implementierungsbedarf durch Aufrechterhaltung einer ausreichenden Konfigurationsähnlichkeit zu vorherigen Kits.

Die Primer für den SE33-Locus wurden aus denen des SEfiler Plus Kits neu entwickelt, um das Amplikon innerhalb des Multiplex zu verschieben. Die neuen Primer-Sequenzen wurden jedoch gründlich optimiert und getestet, um die Übereinstimmung mit dem SEfiler Plus Kit so weit wie möglich zu erhalten.

Erleichtert die sichere Interpretation von Daten
Das NGM Select Kit profitiert von Verbesserungen bei Primer-Syntheseverfahren, die zu deutlich saubereren Basislinien führen als frühere AmpFLSTR-Kits (Abbildung 5). Das Ausbleiben von Farbstoffartefakten, selbst bei 30 Zyklen, vereinfacht dem Analytiker besonders bei Proben niedriger Konzentration die Dateninterpretation. Die zuverlässige Dateninterpretation wird durch weitere Verbesserungen der Profilqualität weiter optimiert. Hierzu zählen:
• Verbesserte Empfindlichkeit und Robustheit
• Maximierte Heterozygote und Intracolor Balance
• Optimale Farbstoffsatznutzung

Diese Funktionen erleichtern auch die rationelle Verarbeitung von Proben aus einer Quelle durch eine Expert System Software wie GeneMapper ID-X.

Einfach zu implementieren, einfach zu bedienen
Jeder Aspekt des NGM Select Kits wurde für eine einfache Implementierung und Verwendung entwickelt. Dies ist eine Komplettlösung, die qualitativ hochwertige Ergebnisse sowohl für Datenbank- als auch Fallproben liefert und so den forensischen DNA-Arbeitsablauf optimiert und gleichzeitig die Betriebskosten senkt.

Der Kit-Workflow ähnelt sehr anderen AmpFLSTR-Kits, sodass forensische Labore die Validierung und Implementierung optimieren können. Das Enzym ist nun jedoch im Mastergemisch enthalten, was die Reaktionsvorbereitung vereinfacht. Die Zykluszeiten wurden um etwa eine Stunde verkürzt, so dass Labore schneller qualitativ hochwertigere Ergebnisse erzielen können. Zur Kompatibilität mit manuellen und automatisierten Systemen sind zwei Packungsgrößen erhältlich, das Standard-Kit für 200 Reaktionen und ein größeres für 1000 Reaktionen. Das größere Paket enthält größere Flaschen, um die Verwendung auf Plattformen für die Handhabung von Flüssigkeiten zu erleichtern.

Hinweis: Nur für Forensik oder Vaterschaft.

Wichtiger Hinweis

Der Kauf dieses Produkts vermittelt dem Käufer die nicht übertragbare Lizenz zur Nutzung der erworbenen Menge des Produkts nur für forensische oder Vaterschaftstests, die vom Käufer durchgeführt werden. Diese Lizenz gewährt einer Entscheidung eines US-Gerichts zufolge keine Lizenz zur Nutzung dieses Produkts für folgende Zwecke: Nachweis oder Analyse von Chimärismus, Klassifizierung von Backenzahnpräparaten, Zelllinienauthentifizierung, Bestimmung des fetalen Geschlechts, Krebsanalyse, Genforschung, nicht Fall-bezogene forensische Anwendungen (wie z. B. die allgemeine Forschung im Bereich Forensik oder die Ausbildung von Personen, die nicht in einem forensischen Labor tätig sind), Identifizierung oder Bestimmung mütterlicher Zellkontamination sowie Probennachverfolgung. Um weitere Rechte zu erwerben, wenden Sie sich an Promega Corp., 2800 Woods Hollow Road Madison, WI 53711 USA.

Für Lizenzierungsbestimmungen und eingeschränkte Nutzungsbeschränkungen besuchen Sie thermofisher.com/HIDlicensing.