Pierce™ Thiophilic Adsorption Kit

Das Thermo Scientific Pierce thiophile Adsorbens ist ein proteinfreies Immunosorbens-Harz für die sanfte bevorzugte Bindung und Aufreinigung von Immunglobulinen aus verschiedenen Quellen, einschließlich von Maus, Ratte, Kaninchen, Ziege und Mensch. Dieses Pierce thiophile Adsorptionskit ist ein Aufreinigungskit mit Säulen, die mit dem Harz und gebrauchsfertigen Puffern vorgepackt sind.

Merkmale von thiophilem Adsorbens:

• Hohe Kapazität – bindet und reinigt sanft ca. 20 mg polyklonale Antikörper pro Milliliter Adsorptionsharz
• Breite Antikörperspezifität – für die meisten Immunglobulin-Klassen und -Isotypen geeignet, die von vielen verschiedenen Tierarten, einschließlich Huhn-IgY, stammen
• Einfach und schnell – schnelle Fraktionierung und Aufreinigung der Immunglobulin-Komponente aus Serum- oder Aszitesproben ohne anschließende Dialyse oder Entsalzungsschritte
• Sanft – die Bindungsbedingung ist nicht denaturierend und der Elutionspuffer liefert konzentriertes, salzfreies Immunglobulin bei nahezu neutralem pH-Wert; bietet eine hervorragende Rückgewinnung funktioneller Antikörper

Pierce Thiophilic Adsorbens besteht aus 6 %iger gekörnter Agarose, die eine einfache Sulfon-Thioether-Modifikation besitzt. Auf diese Weise entsteht ein Affinitätsmaterial mit hoher Bindungskapazität und breiter Spezifität für viele Arten von Immunoglobulinen bei Inkubation in 0,5 M Kaliumsulfat. Die thiophile Adsorption kann als säulenbasierte Variation der Ammoniumsulfatfällung betrachtet werden, mit der Immunglobuline aus Serum-Rohproben schnell aufgereinigt werden können. Anders als die Antikörperfraktionierung mit Ammoniumsulfatfällung führt die Aufreinigung mit thiophilem Adsorbens jedoch zu konzentrierten, nahezu Salz-freien und hochreinen Immunglobulinen bei fast neutralem pH-Wert. Aus diesem Grund entfällt mit dieser einfachen Einschrittmethode die zusätzliche Aufbereitung der Proben zur Lagerung oder für nachfolgende Konjugationsreaktionen. Die milden Bindungs- und Elutionsbedingungen sorgen für eine hohe Proteinausbeute mit ausgezeichnetem Erhalt der Antikörperaktivität.

Die thiophile Adsorption basiert auf der Fähigkeit einiger Proteine, insbesondere Immunglobuline, sich an einen immobilisierten Liganden zu binden, der eine Sulfongruppe in unmittelbarer Nähe zu einem Thioether enthält. Salze, die mit Wassermolekülen wie Kalium und Ammoniumsulfat interagieren, fördern diese Bindung, indem sie das Protein in die Nähe des Liganden treiben.

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