Pierce™ Streptavidin Plus UltraLink™ Resin

Die Thermo Scientific™ Pierce™ High Capacity Streptavidin Chromatography Cartridges sind praktische, gebrauchsfertige Produkte zur Trennung von biotinylierten Molekülen von nicht biotinylierten Molekülen und zur Reinigung von Antigenen mit biotinylierten Antikörpern. Die Chromatographiekassetten enthalten ein gekörntes Harz aus immobilisiertem, rekombinantem Streptavidin-Protein, das biotinylierte Proteine bei mehr als 10 mg/ml Beads bindet. Dies entspricht einer 2- bis 3-mal höheren Biotin-Bindungskapazität als bei Produkten anderer Lieferanten und ist ideal, wenn eine hohe Wiedergewinnungsrate erforderlich ist.

Diese Kassetten ermöglichen schnelle, einfache und reproduzierbare chromatographische Trennungen und sind mit den wichtigsten automatisierten Flüssigkeitschromatographiesystemen oder der manuellen Spritzenverarbeitung kompatibel (allgemeine Eigenschaften der Kassette siehe Tabelle 1). Die Kartuschen werden ohne zusätzliche Anschlüsse direkt an ÄKTA™ oder FPLC-Systeme angeschlossen. Das im Lieferumfang enthaltene Zubehörpaket passt die Kartuschen für die Verwendung mit Luer-Lok™-Spritzenanschlüssen oder 1/16 Zoll-Schläuchen an. Diese Kassetten können zur Affinitätsreinigung mehrfach regeneriert werden.

Merkmale der Streptavidin-Agarose mit hoher Kapazität:
• Streptavidin – Gereinigtes, rekombinantes Streptavidin-Protein (53 kDa, nahezu neutraler pI); tetrameres Protein mit vier Biotin-bindenden Stellen pro Molekül
• Agarose-Harz – Träger sind vernetzte, 6%ige Agarosebeads (CL-6B), das beliebteste Harz für Proteinreinigungsmethoden
• Inert und stabil – Streptavidin wird durch ladungsfreie, laugungsbeständige kovalente Bindungen immobilisiert, was zu einer geringen unspezifischen Bindung führt und mehrere Anwendungen ohne Ertragsverlust ermöglicht
• Hohe Kapazität – Diese Beads haben eine dichte Ladung von immobilisiertem Streptavidin und bieten eine Bindungskapazität von mehr als 10 mg biotinylierter BSA pro ml Harz
• Zwei Formate – Erhältlich in verschiedenen Flaschengrößen von Harzschlamm und als gepackte 1 ml- und 5 ml-Chromatographiekassetten

Eigenschaften von vernetzten, 6%igen Agarosebeads (CL-6B):
• Unterstützung der pH-Stabilität: 2 bis 14 (kurzfristig); 3 bis 13 (langfristig)
• Durchschnittliche Partikelgröße: 45 bis 165 Mikrometer
• Ausschlussgrenze: 10.000 bis 4.000.000 Dalton
• Maximale empfohlene Durchflussrate: 4 ml/Minute (1 ml-Säule), 5 ml/min (5 ml-Säule)
• Maximale lineare Geschwindigkeit: 30 cm pro Stunde
• Maximaler Druck: 0,3 MPa, 43,5 psi oder 3 bar

Pierce Streptavidin-Chromatographiekassetten mit hoher Kapazität bestehen aus gereinigtem, rekombinantem Streptavidin, das kovalent bei hoher Dichte auf qualitativ hochwertige, vernetzte, 6%ige Agarosebeads immobilisiert ist. Mit diesem Streptavidin-Harz können biotinylierte Antikörper, Proteine, Peptide, Nukleinsäuren und andere Moleküle oder Interaktionskomplexe erfasst, immunpräzipitiert, entfernt oder aus Proben gereinigt werden.

Streptavidin ist ein tetrameres Protein, das ähnlich wie Avidin vier Biotin-bindende Stellen enthält. Das native Protein aus Streptomyces avidinii ist Kohlenhydrat-frei, hat einen sauren pI von 5,5 und eine Masse von 75 kDa. Das rekombinante Protein, das zur Herstellung von Pierce Streptavidin-Harzen verwendet wird, hat einen nahezu neutralen isoelektrischen Punkt und eine Masse von 53 kDa. Streptavidin bindet aufgrund des Fehlens von Kohlenhydraten generell weniger unspezifisch als Avidin (aus Hühnereiweiß).

Weitere Information siehe: Chromatographiekassetten für Entsalzung und Affinitätsreinigung