Pierce™ Ubiquitin Enrichment Kit

Das Thermo Scientific Pierce Ubiquitin-Anreicherungskit vereinfacht die Isolierung von Polyubiquitin-Protein-Konjugaten aus Zellkulturen und Gewebeproben.

Merkmale des Ubiquitin-Anreicherungskits:

• Schnell—weniger als 45 Minuten Arbeitsaufwand für die Bindung und Rückgewinnung von ubiquitinierten Proteinen
• Vollständig—enthält alle Reagenzien, die für die Anreicherung ubiquitin-modifizierter Proteine aus kultivierten Zellen und Gewebeproben benötigt werden
• Flexibel—Die Probeninkubationszeit von 2 Stunden bis über Nacht ermöglicht die Durchführung des Assays in mehreren Stunden oder in weniger als 30 Minuten nach der Inkubation über Nacht
• Robust—Kompatibel mit allen Thermo Scientific Pierce Zelllyseprodukten und Standard-RIPA-Formulierungen
• Mehrfachprobenformat—Einfache Verarbeitung von bis zu 15 Proben gleichzeitig

Die aus dem Pierce Ubiquitin-Anreicherungskit gewonnenen Fraktionen können anschließend analysiert werden, um die Menge der vorhandenen allgemeinen Ubiquitin-Konjugate zu bestimmen oder um ein spezifisches Protein von Interesse durch Western Blotting zu identifizieren. Das Assay-Protokoll ist schnell und einfach. Es ermöglicht die Isolation von polyubiquitinierten Proteinen sowie die Fraktionierung von monoubiquitinierten Spezies im Harz-Eluat. Das Assay-Protokoll ist schnell und unkompliziert und ermöglicht die Isolierung von polyubiquitinierten Proteinen und die Fraktionierung von monubiquitinierten Spezies im Harzdurchfluss. Das Ubiquitin-Anreicherungskit übertrifft ähnliche Harze anderer Hersteller und bietet eine saubere und spezifische Proteinvorbereitung im Vergleich zu einem Kontrollharz.

Der Ubiquitin-Proteasom-Weg ist der wichtigste nicht lysosomale Weg der Steuerung der Proteinproteolyse. Dieser Weg spielt eine entscheidende Rolle in zahlreichen Zellprozessen, einschließlich DNA-Reparatur, transkriptionale Regulierung, Signaltransduktion, Zellstoffwechsel und Morphogenese. Der Ubiquitinationsprozess setzt ein, wenn ein Ubiquitin, ein aus 76 Aminosäuren bestehendes 8 kDa Polypeptid über das C-terminale Glycin des Ubiquitin-Moleküls an die Zellproteine angehängt wird. Nach einem initialen Monoubiquitinations-Vorgang kann sich ein Ubiquitin-Polymer bilden. Polyubiquitinierte Proteine werden von dem 26S Proteasom erkannt, das die Degradation des ubiquinierten Proteins und die Wiederverwendung von Ubiquitin katalysiert. Differenzen bei der Gesamtubiquination oder der Ubiquinierung eines bestimmten Proteins sind bei zahlreichen pathologischen Bedingungen zu beobachten, einschließlich maligner, bestimmter genetischer und neurodegenerativer Erkrankungen.¹