RIPA-Lyse- und Extraktionspuffer
Thermo Scientific™

RIPA-Lyse- und Extraktionspuffer

Thermo Scientific RIPA Lysis and Extraction Buffer ist eine hochwertige, gebrauchsfertige Formulierung eines häufig verwendeten Zelllysereagenzes für Säugertierzellkulturen mit vollständigenWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
89901250 ml
89900100 ml
Katalognummer 89901
Preis (EUR)
255,65
온라인 행사
284,00
Ersparnis 28,35 (10%)
250 mL
Menge:
250 ml
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Thermo Scientific RIPA Lysis and Extraction Buffer ist eine hochwertige, gebrauchsfertige Formulierung eines häufig verwendeten Zelllysereagenzes für Säugertierzellkulturen mit vollständigen Angaben zur Zusammensetzung.

Merkmale von RIPA-Puffer:

Praktisch – Gebrauchsfertige Lösung; keine Notwendigkeit, Komponenten selbst zusammenzustellen und vorzubereiten
Flexibel – Kompatibel mit vielen Anwendungen, einschließlich Reporter-Assays, Proteinassays, Immunassays und Proteinaufreinigung
Vielseitig – Ermöglicht die Extraktion von Zytoplasma-, Membran- und Kernproteinen
Offengelegte Formulierung – Enthält keine herstellereigenen Komponenten für die vollständige Kontrolle und Kenntnis möglicher Kompatibilitätsprobleme

Dieser RIPA-Puffer lysiert und extrahiert effektiv Proteine aus kultivierten Säugetierzellen, einschließlich plattierter Zellen und pelletierter Suspensionszellen. Das beliebte Reagenz gestattet die Extraktion von Membran-, Zellkern- und Zytoplasmaproteinen und ist mit vielen Verfahren, darunter Reporter-Assays, dem Thermo Scientific BCA Protein Assay, Immunassays und Proteinaufreinigung, kompatibel. Inhibitoren wie Thermo Scientific Halt Protease Inhibitor Cocktail (Art.-Nr. 78430) und Halt Phosphatase Inhibitor Cocktail (Art.-Nr. 78420) sind ebenfalls mit dieser RIPA-Pufferformulierung kompatibel und können vor der Verwendung hinzugefügt werden, um Proteolyse zu verhindern und die Proteinphosphorylierung aufrechtzuerhalten.

RIPA-Puffer leitet seinen Namen von der ursprünglichen Anwendung ab, für die es entwickelt wurde: dem Radio-Immunpräzipitations-Assay. Die isotopische Assay-Methode wird in modernen Labors zwar nur noch selten ausgeführt, doch das Akronym für die Lysepuffer-Formulierung hat sich erhalten. Das RIPA-Zelllysereagenz besitzt eine hohe Wirksamkeit für die Extraktion von Proteinen aus zahlreichen Zelltypen, da es drei nicht ionische und zwei ionische Detergenzien enthält. Ein Nachteil dieser Detergenzformulierung ist ihre relative Inkompatibilität mit bestimmten nachgeschalteten Anwendungen im Vergleich zu anderen Lysereagenzien.

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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Der Name des RIPA-Puffers bezieht sich auf den Radioimmunpräzipitations-Assay, d. h. die Anwendung, für die er ursprünglich entwickelt wurde. Die isotopische Assay-Methode wird in modernen Labors zwar nur noch selten ausgeführt, doch das Akronym für die Lysepuffer-Formulierung hat sich erhalten. Das RIPA-Zelllysereagenz besitzt eine hohe Wirksamkeit für die Extraktion von Proteinen aus zahlreichen Zelltypen, da es drei nicht ionische und zwei ionische Detergenzien enthält. Als Nachteil dieser Formulierung ist zu berücksichtigen, dass es im Vergleich zu anderen Lysereagenzien eine gewisse Inkompatibilität mit bestimmten nachfolgenden Anwendungen aufweist.

Allgemeine Literaturangaben:

  1. Berman, H.A. et al. (1985). Biochemistry 24, 7140-7147.
  2. Cai, X. et al. (1994). J. Virol. 68(11), 7609-7613.
  3. Cao, F. et al. (2005). J Virol. 79(16), 10164-70.
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  6. Necessary, P.C. et al. (1984). J. Biol. Chem. 259, 6942-6946.
  7. Pfrepper, K.I., Flugel R.M. (2005). Methods in Mol. Biol. 304, 435-44.
  8. Rouse, J.C., Vath, J.E. (1996). Anal. Biochem. 238, 83-92
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  10. Sibley, D.R. et al. (1986). Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 83, 9408-9412.
  11. Zhang, J. et al. (1995). J. Biol. Chem. 270(12), 6589-6594.
Specifications
FormatFlüssig
Menge250 ml
Volumen (metrisch)250 ml
ProdukttypExtraktionspuffer
Unit Size250 mL
Inhalt und Lagerung
Nach Erhalt bei 4 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What are the standard lysis buffers used with mammalian cells for detection of protein expression by immunoprecipitation (IP) or Western blot analysis?

The most commonly used buffer is RIPA Buffer with SDS. We offer RIPA Buffer (Cat. Nos. 89900 and 89901). We also offer the Pierce IP Lysis buffer (Cat. Nos. 87787 and 87788) as well as M-PER (Cat. Nos. 78501, 78503, and 78505).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Lysis and Fractionation Support Center.

Does RIPA Lysis and Extraction Buffer (Cat. No. 89900, 89901) contain protease or phosphatase inhibitors?

RIPA Lysis and Extraction Buffer (Cat. No. 89900, 89901) does not contain protease or phosphatase inhibitors. If desired, you may add protease and/or phosphatase inhibitors, such as Halt Protease Inhibitor Cocktail (Cat. No. 78410) and Halt Phosphatase Inhibitor Cocktail (Cat. No. 78420) to the RIPA Lysis and Extraction Buffer to prevent proteolysis and maintain phosphorylation status of proteins. We recommend adding protease and phosphatase inhibitors immediately before use.

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Why is it not recommended that I use RIPA buffer for protein A280 measurements with my NanoDrop spectrophotometer?

RIPA buffer produces a particularly strong absorbance signal at the 280 nm wavelength. As a result, it will either over estimate or under estimate protein concentrations and interfere with the protein purity ratio.
Protein samples in RIPA buffer should be quantified via the Pierce Protein 660 or BCA colorimetric assays using a full spectrum NanoDrop model.

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Why is there low phosphorylation of the proteins when I use the RIPA Lysis and Extraction Buffer?

Low phosphorylation is usually due to phosphatase activity. We recommend adding a Halt Phosphatase Inhibitor Cocktail to the buffer before use.
Alternatively, the protein is not phosphorylated or phosphorylated at a low level.

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What if proteolysis occurs when I use RIPA Lysis and Extraction Buffer?

Proteolysis indicates that no protease inhibitors were added. We recommend adding a Halt Protease Inhibitor Cocktail to the RIPA Lysis and Extraction Buffer before use.

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Zitierungen und Referenzen (7)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Not just fat: investigating the proteome of cetacean blubber tissue.
Authors:Kershaw JL,Botting CH,Brownlow A,Hall AJ
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PubMed ID:29479430
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