Lysozym-Lösung (50 mg/ml)

Thermo Scientific Lysozym ist ein Enzym, das Bakterienzellwände aufzubrechen vermag und so die Protein- oder Nukleinsäureextraktion deutlich verbessert.

Merkmale von Lysozym, tiefgefrorener Glycerinstammlösung:

• Enzym zur Lyse der Bakterienzellwand; verbessert die Aufreinigung von Proteinen aus Einschlusskörperchen
• Kompatibel mit Thermo Scientific Pierce Zelllysereagenzien
• Klar und farblos, enthält keine unlöslichen Substanzen
•pH-Wert: 4,7 ±0,2
• ≥50 Einheiten/ml bei 5 µg/ml

Lysozym ist ein Enzym, das Bakterienzellwände aufzubrechen vermag und so die Extraktion von Proteinen bzw. Nukleinsäuren deutlich verbessert. Lysozyme (Muramidasen) sind eine antimikrobiell wirkende Enzymfamilie, die sich durch die Fähigkeit zur Auflösung der Bakterienzellwand auszeichnen. Dabei fungiert das Enzym als Katalysator für die Hydrolyse der beta-1,4-beta-Bindungen zwischen N-Acetylmuraminsäure und N-acetyl-D-glucosamin-Resten in Peptidoglykanen und zwischen den N-acetyl-D-glucosamin-Resten in Chitodextrinen. Lysozym aus Hühnereiweiß zeigt zwar die effektivste Lyse-Wirkung bei grampositiven Bakterien, kann aber auch zur Lyse von gramnegativen Bakterien wie Salmonella und Shigella eingesetzt werden. Die Lyse von E. coli wird insbesondere durch Zugabe von Lysozym und Nukleasen wie DNase I

verbessert. Beschreibung und Eigenschaften von Lysozym:
Lysozym tritt natürlich in pflanzlichen und tierischen Geweben sowie in Sekreten wie Tränen, Speichel und Schleim auf. Es ist besonders im Eiweiß reichlich vorhanden, das die Primärquelle für die kommerzielle Versorgung ist. Aus Hühnereiweiß gewonnenes Lysozym (Lysozym C) war das erste Enzym, dessen 2 Ångström-Kristallstruktur aufgeschlüsselt und extensiv untersucht wurde. Lysozym findet breite Verwendung bei der Extraktion von bakteriellen Proteinen. Bei der Reinigung von Inclusion Bodies wird Lysozym zum Verdau von Zellresten und der Freisetzung der Inclusion Bodies verwendet. Während der Affinitätsreinigung mittels Fusions-markierten Proteinen wird das Enzym mit anderen Proteinen bei der Bildung der Inclusion Bodies problemlos vom rekombinanten Zielprotein entfernt.

• Enzymatische Funktion: Katalysiert die Hydrolyse der 1,4-β-Bindungen zwischen N-Acetylmuraminsäure und N-Acetyl-D-Glucosaminresten in Peptidoglycanen und zwischen N-Acetyl-D-Glucosaminresten in Chitodextrinen
• Molekulargewicht: 14.388 kDa
• Extinktionskoeffizient: ∼ 26,4 bei 280 nm
• Isoelektrischer Punkt: pH-Wert 11,0
• Einheitendefinition: 1 Einheit ist die benötigte Enzymmenge zum Katalysieren einer Verringerung des Absorptionsvermögens bei 450 nm um 0,001/min bei 25 °C Temperatur, einem pH-Wert von 6,24 und unter Verwendung einer 1 cm-Küvette, die die Lyse einer Suspension von ca. 0,25 mg/ml Micrococcus luteus enthält.

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