PichiaPink™ Secreted Protein Kit

Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit ist ein neues rekombinantes Proteinexpressionssystem, das auf der Hefe Pichia pastoris basiert. Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit bietet Ihnen eine bequeme und kostengünstige Bioproduktion von Schüttelkolben bis zur 1000 Liter-Produktion Ihres rekombinanten Proteins. Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit wird mit unseren neuen Pichia-Stämmen, den pPINK-HC- und pPINK-LC-Vektoren und den Sekretsignalsequenzen für die Produktion Ihres Proteins geliefert.
•   Beginnen Sie mit der sezernierten Proteinproduktion in Pichia pastoris.
•   Screenen Sie Ihre Pichia-Transformanten in kürzester Zeit mittels Auxotrophie und Farbauswahl.
•   Reduzieren Sie den Proteinabbau mit Proteasedefizienten Pichia pastoris-Stämmen.

Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit wird mit folgenden Komponenten geliefert:
•   PichiaPink™ Secreted Protein Vector Kit (Kat.- Nr. A11153)
•   PichiaPink™ Expressionsstamm-Set (Kat. Nr. A11154)
•   PichiaPink™ Medien-Kit (Kat. Nr. A11156)

Eine neue Art, Pichia-Transformanten zu screenen
Das PichiaPink™ sezernierte Secreted Protein Expression Kit verwendet Adenin-Auxotrophie zur Auswahl von Pichia-Transformanten. Die PichiaPink™ Stämme haben den ade2-Genotyp und erfordern eine Komplementierung mit dem ADE2-Gen, um ohne Adenin wachsen zu können. Auch die Verwendung eines auxotrophen Markers erleichtert die Aufrechterhaltung von Transformanten. Es sind keine Antibiotika erforderlich, um Ihre Transformanten zu erhalten.

Außerdem können Sie Pichia-Transformanten nach Farben screenen. Die nicht transformierten PichiaPink™-Stämme erscheinen als rosafarbene Kolonien, während transformierte PichiaPink™-Stämme als weiße Kolonien erscheinen (Abb. 1).

Sezernieren Sie Ihre Proteine mit dem pPINKα-HC-Vektor
Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit wird mit dem pPINKα-HC-Vektor geliefert. Der pPINKα-HC-Vektor verfügt über eine integrierte Signalsequenz mit α-Verknüpfungsfaktor und ermöglicht die Sekretion Ihres Proteins in das Medium. Die Absonderung Ihres Proteins in die Medien erleichtert die Ernte und Reinigung Ihres Proteins. Der pPINKα-HC-Vektor ist um das ADE2-Gen herum aufgebaut, um die ade2-defizienten Pichia-Stämme zu ergänzen. Dieser Vektor verwendet den Methanol-induzierten AOX1-Promotor, um Ihr Protein zu exprimieren. Darüber hinaus ist der pPINKα-HC-Vektor so konzipiert, dass er bei hoher Kopienzahl in Ihre Pichia-Transformanten integriert werden kann.

Das PichiaPink™ Secreted Protein Vector Kit (Kat.- Nr. A11153) kann separat bestellt werden, um das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit nachzufüllen.

Halten Sie Ihre Proteine Intact
Das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit wird mit dem PichiaPink™ Expression Strain Set geliefert. Dieses Set enthält die 4 Pichia pastoris-Stämme für die Verwendung mit dem PichiaPink™ Yeast Expression System. Alle 4 Stämme verfügen über den ade2-Genotyp. Außerdem enthalten 3 Stämme Knockouts in 2 Protease-Genen. Protease-defizitäre Stämme reduzieren den Bedarf an Proteasehemmern beim Zellwachstum und verbessern die Ausbeute Ihres Proteins. Testen Sie einen einzelnen Protease-Knockout oder den Doppel-Protease-Knockout, um den für Sie am besten geeigneten zu finden.

Sie können das PichiaPink™ Expression Strain Set (Kat Nr. A11154) separat bestellen, um das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit nachzufüllen.

Medienbeutel für den Einstieg
Das PichiaPink™ Media Kit ist ein Satz praktischer vorgepackter Medienbeutel für die Verwendung mit dem PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit. Das PichiaPink™ Medien-Kit enthält Medien zum Kultivieren von PichiaPink™ Stämmen aus gefrorenen Beständen zu gebrauchsfertigen Kulturen zwecks Transformation und Auswahl. Sie können das PichiaPink™ Media Kit (Kat.- Nr. A11156) separat bestellen, um das PichiaPink™ Secreted Protein Expression Kit nachzufüllen.

Warum sollte man sich für das PichiaPink™ Yeast Expression System entscheiden?
Das PichiaPink™ Yeast Expression System basiert auf der Hefe Pichia pastoris. Vorteile der Pichia pastoris sind schnelles Wachstum, gut bekannter genetischer Hintergrund, einfache Medienformulierung und einfache Handhabung. Seit über 30 Jahren wird Pichia pastoris von Laboren weltweit zur Erzeugung von Hunderten verschiedener Proteine aus vielen Spezies, einschließlich der humanen (Ref. 1, 2), verwendet. Das PichiaPink™ Hefe-Expressionssystem ermöglicht eine komfortable und kostengünstige Proteinproduktion in jedem Maßstab.

Informationen zum Erwerb einer kommerziellen Nutzungslizenz für das PichiaPink™ Hefe-Expressionssysteme erhalten Sie unter outlicensing@lifetech.com.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Tieren oder Menschen bestimmt.

Verwandte Links
• Erfahren Sie mehr über das PichiaPink™ Hefe-Expressionssystem.
• Erfahren Sie mehr über unsere anderen Proteinexpressionssysteme.

Literatur

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]
2. Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug;13(4):329-32. [PubMed]