Freedom™ DG44 Kit
Freedom™ DG44 Kit
Gibco™

Freedom™ DG44 Kit

Das Gibco™ Freedom™ DG44 Kit ist ein anwenderfreundliches, für einen Komplettzyklus einsetzbares Produkt für das Klonieren und Exprimieren rekombinanter ProteineWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A13737011 Kit
Katalognummer A1373701
Preis (EUR)
17.060,00
Each
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Menge:
1 Kit
Preis (EUR)
17.060,00
Each
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Das Gibco™ Freedom™ DG44 Kit ist ein anwenderfreundliches, für einen Komplettzyklus einsetzbares Produkt für das Klonieren und Exprimieren rekombinanter Proteine in Zwerghamster-Eizellen mit Dihydrofolatreduktase-Mangel (DHFR).Das Gibco™ Freedom™ DG44 Kit enthält Komponenten für Transfektion, Expression, Klonerstellung und die Auswahl stabiler Zelllinien in einem praktischen Paket.Das Gibco™ Freedom™ DG44 Kit bietet außerdem eine bewährte Wirtszellen-Produktlinie mit vereinfachten kommerziellen Lizenzierungsoptionen.

•Flexible kommerzielle Lizenzierung ohne Lizenzgebühren
• Bewährte Wirtszellen, die in zugelassenen Produkten und zahlreichen Proteinen zum Einsatz kommen
• Komplettes Verfahren, mit dem Sie Ihr Gen von Interesse gewöhnlich innerhalb von weniger als 6 Monaten von der Transfektion bis zum Führungsklon bringen können
• Praktische Verpackung für einfache Bestellung und Lagerung

Besonders einfache, flexible kommerzielle Lizenzierung ohne Lizenzgebühren
Mehrere Unternehmen bieten Entwicklungsdienstleistungen und Produkte für stabile CHO-Zelllinien (Chinese Hamster Ovary) an für die bei der Entwicklung des therapeutischen Proteins Jahresgebühren anfallen.Darüber hinaus können Lizenzgebühren für den Verkauf Ihres therapeutischen Proteins nach der Kommerzialisierung erforderlich sein.Gibco™ Freedom™ Kits bieten Ihnen die Tools, mit denen Sie oder Ihr CRO-Anbieter Ihre stabile Zelllinie zum Preis des Kits selbst entwickeln können.Ferner steht Ihnen eine flexible Lizenzstruktur zur Verfügung, wenn Sie sich auf die kommerzielle Nutzung zubewegen, ohne Anfall von Lizenzgebühren. Die einfache Struktur erfordert lediglich eine einmalige Zahlung (Abb. 1).Weitere Informationen zur Lizenzierung erhalten Sie per E-Mail unter outlicensing@lifetech.com.

Wirtszellen-Hintergrund mit bewährten Ergebnissen
DG44-Zellen werden seit Jahrzehnten von Wissenschaftlern für die Expression von IgG und zahlreichen Blutproteinen genutzt.Die Proteinexpressionslevel können je nach Proteinklasse erheblich variieren, jedoch wurden mit diesen DG44-Elternzellen Konzentration im Bereich von einigen Gramm pro Liter IgG-Expression nachgewiesen.Auf diese Weise können Sie sicher gehen, dass Sie bei Verwendung von DG44-Zellen die erwarteten Proteinkonzentrationen erhalten.

Vollständiger, schneller und effizienter Arbeitsablauf
Der vollständige, bewährte und voll integrierte Arbeitsablauf mit dem Gibco™ Freedom™ DG44 Kit’ ermöglicht den Übergang von der Transfektion zu einem Führungsklon in der Regel in weniger als 6 Monaten bei reduziertem Arbeitsaufwand und somit geringerem Personalbedarf (VZÄ) (Abb. 2).Wir haben eine einzelne MTX-Amplifikation (Methotrexat) im Protokoll implementiert, die bei uns eine bis zu 120-fache Titer-Verbesserung in unter 6 Wochen erzielte (Abb. 3).Der gesamte Arbeitsablauf erfolgt in einem Medium, das frei von tierischen Bestandteilen (AOF, „Animal Origin Free“) ist.Das Kit bietet auch folgende Vorteile:

•Klonieren von einem oder zwei Genen, die interessierende Proteine codieren
• Hocheffiziente Transfektion von DNA zu DG44-Zellen (cGMP-banked)
• Flash-Laufwerk mit elektronischer Bedienungsanleitung im Lieferumfang enthalten

Zugang zum Gibco™ Freedom™ Kit Support
Wenn Sie neben der Bedienungsanleitung zusätzliche Unterstützung benötigen, wenden Sie sich an Ihren zuständigen Account Manager, um einen Beratungstermin mit einem Process Science Manager zu vereinbaren.Darüber hinaus kann sich einer unserer Support-Wissenschaftler mit Ihnen in Verbindung setzen, um sicherzustellen, dass Ihre Erfahrungen mit dem Kit so erfolgreich wie möglich sind.Weitere Unterstützung erhalten Sie per E-Mail an unser Support-Team unter GibcoServices@thermofisher.com.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ProduktlinieFreedom
Menge1 Kit
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
CD DG44 Medium: 2 bis 8 °C (vor Licht schützen)
CD OptiCHO™ Medium: 2 bis 8 °C (vor Licht schützen)
OptiPRO™ SFM: 2 bis 8 °C, vor Licht schützen
FreeStyle™ MAX Reagenz: 2°C bis 8°C, Pluronic
™: F68 15 bis 30 °C

DG44 (CHO) cGMP Banked Suspension DHFR (Dihydrofolat-Reduktase) Negative Zellen: Flüssigstickstoff
One Shot™ TOP10 Chemisch kompetente E. coli: –80 °C
pcDNA 3.3 TOPO™ TA Vektor-Kit: –5 bis –20 °
CpOptiVEC™ TOPO™ TA Vektor-Kit: –5  bis –20 °
Gentamicin™: –5 °C bis –20 °C

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

In the Freedom DG44 kit, does it matter which protein subunit is inserted into the pcDNA3.3-TOPO TA versus the pOptiVEC-TOPO TA vectors?

We recommend cloning each protein subunit into each of the vectors to determine which vector combination gives the highest protein yield in transient transfection before making the stable cell line.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

In the Freedom DG44 kit, since MTX amplification would only work for the protein subunit expressed by the pOptiVEC TOPO-TA vector, how can I ensure that the protein subunit expressed by pcDNA3.3-TOPO TA is also being amplified?

Even though the exact mechanism for MTX amplification is not well understood, the thinking is that both vectors tend to integrate in the same genomic locus and hence would get amplified at the same time.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

In the Freedom DG44 kit, the pOptiVEC-TOPO TA vector contains a DHFR auxotrophic selection marker so that one can avoid using antibiotic selection during protein production. However, this is not possible with the pcDNA3.3-TOPO TA vector as it contains a neomycin selection marker. Is it okay to have G418 present during protein production?

Using G418 should not pose a problem for low-scale protein production for initial studies. However, we do not recommend adding G418 during large-scale protein production (i.e., in a bioreactor).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

Can MTX be used at concentrations higher than 4 µM to increase protein yield using the OptiCHO Express Kit?

There are a couple of concerns associated with high MTX concentrations. One is the stability of the cell line generated using high MTX concentrations. The other is that it may be amplifying the DFHR gene without amplifying the gene of interest along with it stoichiometrically. We recommend the more conservative approach of 4 µM MTX for amplification.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

How can I learn more about commercial licensing of Freedom kits, ExpiCHO-S Cells (cGMP banked), CHO-S Cells (cGMP banked), and CHO DG44 Cells (cGMP banked)?

To inquire about a Commercial Production or Service License, please email: outlicensing@thermofisher.com.

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