Jump-In™ CHO-K1 Kit
Jump-In™ CHO-K1 Kit

Jump-In™ CHO-K1 Kit

Das Jump-In™ CHO-K1-Kit ermöglicht die gezielte Integration von genetischem Material in einen bestimmten, vorgefertigten R4-Standort in der Jump-In™ CHO-K1-Zelllinie, umWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A141481 Kit
Katalognummer A14148
Preis (EUR)
11.310,00
Each
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Menge:
1 Kit
Preis (EUR)
11.310,00
Each
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Das Jump-In™ CHO-K1-Kit ermöglicht die gezielte Integration von genetischem Material in einen bestimmten, vorgefertigten R4-Standort in der Jump-In™ CHO-K1-Zelllinie, um eine isogene stabile Zelllinie mit weniger Aufwand und in kürzerer Zeit als bei herkömmlichen Methoden der Zelltechnik zu erstellen.

Die hohe Retargeting-Effizienz, die durch die R4-Stellen in der CHO-K1-Zelllinie ermöglicht wird, erlaubt die Verwendung des isogenen Pools für zusätzliche Experimente, ohne dass eine klonale Auswahl durchgeführt werden muss. Alternativ ermöglicht die hohe Retargeting-Effizienz die einfache Auswahl eines positiven, stabilen Klons, der Ihr Gene von Interesse exprimiert.

Mit dem Jump-In™ CHO-K1-Kit haben Sie folgende Optionen:

• Zur schnellen und effizienten Entwicklung stabiler, isogener Zellpools in etwa der Hälfte der Zeit im Vergleich zu herkömmlichen Methoden der Zelltechnik
• Verwendung der isogenen Expression eines definierten, genomischen Locus als ideale Lösung für die vergleichende Analyse von Genfamilien, Isoformen oder Orthologen
• Parallele Erzeugung mehrerer Zelllinien mit dem vereinfachten Arbeitsablauf
• Einfacher Zugriff auf die Technologie ohne komplizierte Lizenzen oder Einschränkungen bei der Interpretation

Zeitersparnis durch die schnelle und effiziente Herstellung von Zelllinien
Mit dem Jump-In™ CHO-K1-Kit können funktionelle Zell-Pools in nur 2 Wochen ohne aufwändige Klonisolierung und -analyse erstellt werden. Das optimierte Protokoll erleichtert die gleichzeitige Herstellung mehrerer Zelllinien. Selbst klonale Zelllinien können durch den hohen Anteil positiver Klone mit weniger Zeit- und Arbeitsaufwand erzeugt werden. Darüber hinaus bietet Ihnen die Jump-In™ Technologie die Freiheit, eine unbegrenzte Anzahl von Zelllinien ohne restriktive Lizenzierungsanforderungen zu erzeugen.

Erweitern Sie Ihre experimentellen Möglichkeiten
Das Jump-In™ CHO-K1-Kit ist die ideale Lösung für Zellen und Assays, bei denen transiente Engineering-Technologien problematisch sind. Das Kit bietet außerdem eine bequeme Möglichkeit, Target-Panels von Genfamilien, Isoformen oder Orthologen zu erstellen. Die Codierung von Genen für große Proteine oder Proteine mit mehreren Einheiten stellt kein Problem dar, da die Gateway™ Zielvektoren große Inserts akzeptieren.

Das Kit enthält:
• pJTI™ R4 Dest CMV pA-Vektor (100 µg)
• pJTI™ R4 Int-Vektor (100 µg)
• Jump-In™ CHO-K1-Zellen (2 Fläschchen mit je 1 ml)

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ZelllinieJump-In™ CHO-K1
ExpressionssystemSäugetiere
FormatKit
HauptbedienfelderEntwicklung stabiler Zelllinien, gezielte Integration
ProdukttypCHO-K1 Kit
PromoterCMV
Menge1 Kit
Selektionsmittel (eukaryotisch)Hygromycin
SystemtypJump-In™
ProduktlinieJump-In
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Das Kit enthält:
Jump-In™ CHO-K1-Zellen
pJTI™ R4 Int (Integrase-Vektor)
pJTI™ R4 DEST CMV pA (Zielvektor)

Lagern Sie die Zellen direkt nach Erhalt in flüssigem Stickstoff und die Vektoren bei -20 °C. Zellen, die bei -80 °C gelagert werden, können schnell an Lebensfähigkeit verlieren.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am planning to generate a Jump-In platform cell line. Do you recommend mapping the site of integration and checking against the database to pick a clone where integration has occurred in a "good" hot spot?

We would recommend engineering an expression marker/reporter in the plasmid used to create the platform line, and then screening the platform line for expression of this marker to identify a high-expressing locus. Otherwise, the process can get quite labor-intensive, as multiple lines would have to be screened after retargeting.

Does the pJTI PhiC31 Int vector contain a nuclear localization signal (NLS), and would adding an NLS increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites?

The pJTI Phic31 Int vector does not contain an NLS. Adding an NLS could increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites, but there are no data to support it. There is one paper describing the use of an NLS on a PhiC31 integrase vector, but the authors didn't measure integration into pseudo attP sites.

In the Jump-In system, how much DNA or what controls do I need to include in order to get one integration event?

The amount of DNA to be used to obtain single copies should be determined by control experiments done in the absence of integrase. The same amount of DNA that yields less than 5 colonies in the absence of integrase should be used in the presence of integrase. Typically, the integrase expression plasmid makes up most of the amount of DNA used for transfection.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

When should I use the Jump-In Fast system versus the Jump-InTI system?

We recommend using the Jump-In Fast system if you need stable mammalian expression and want to quickly generate well-expressing clones. You can have well-expressing clones with one or more integrations at the PhiC31 pseudo-att P sites. A Southern blot is necessary to confirm the number of integrated events. Use the Jump-InTI system if you need isogenic expression, where every cloned gene would be expressed from the same locus in the same background, with no chromosomal position effects.

What is the difference between the Jump-In and Flp-In systems?

The Jump-In system is PhiC31-integrase mediated and is a stable, targeted, and irreversible mammalian expression system. It consists of the Jump-In Fast system that involves a single integration step and the Jump-InTI (targeted integration) system that needs two integration steps, both of which are targeted and irreversible. In contrast, the Flp-In system is a stable, targeted mammalian expression system that is reversible. The first integration is random (integration of pFRT/lacZeo), and the second integration (integration of the Flp-In expression vector) is targeted but reversible.