Alexa Fluor™ 680 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Alexa Fluor™ 680 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 680 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Alexa Fluor™ 680 ist ein heller und photostabiler Nahinfrarot-Farbstoff, der dem Farbstoff Cy5.5 bezüglich seines Spektrums ähnlich ist. Der FarbstoffWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A200081 mg
A375743 x 100 μg
A201085 mg
A3756725 mg
Katalognummer A20008
Preis (EUR)
557,65
온라인 행사
744,00
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Menge:
1 mg
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Alexa Fluor™ 680 ist ein heller und photostabiler Nahinfrarot-Farbstoff, der dem Farbstoff Cy5.5 bezüglich seines Spektrums ähnlich ist. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 680, der für eine stabile Signalerzeugung in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet wird, ist wasserlöslich und im Bereich der pH-Werte 4 bis 10 pH-unempfindlich. Die Fluoreszenz dieses langwelligen Alexa Fluor™ Farbstoffs ist für das menschliche Auge unsichtbar, wird jedoch von den meisten Bildgebungssystemen leicht erkannt. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 680 konjugiert mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Markierungssubstanzen und Amplifikationssubstraten, die für die Markierung und den Nachweis von Zellen optimiert wurden, an. Erfahren Sie mehr.

Der NHS-Ester (oder Succinimidylester) von Alexa Fluor™ 680 ist das beliebteste Hilfsmittel für die Konjugierung dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. NHS-Ester können zur Markierung der primären Amine (R-NH2) von Proteinen, Amin-modifizierten Oligonukleotiden und weiteren Amin-haltigen Molekülen verwendet werden. Das entstehende Konjugat mit Alexa Fluor™ weist eine hellere Fluoreszenz und höhere Fotostabilität als Konjugate mit anderen Fluorophoren mit ähnlichem Spektrum auf.

Ausführliche Informationen zu diesem Alexa Fluor™ NHS-Ester:

Fluorophor-Markierung: Alexa Fluor™ 680 Farbstoff
Reaktive Gruppe: NHS-Ester
Reaktivität: Primäre Amine auf Proteinen und Liganden, aminmodifizierte Oligonukleotide
Anregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 684/707 nm
Extinktionskoeffizient: 183.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: Cy5.5

Typische Konjugationsreaktion
Amin-reaktive Farbstoffe können mit praktisch jedem Protein oder Peptid konjugiert werden (das bereitgestellte Protokoll ist für IgG-Antikörper optimiert). Sie können die Reaktion auf beliebige Proteinmengen skalieren, optimale Ergebnisse erzielen Sie jedoch bei einer Proteinkonzentration von mindestens 2 mg/ml. Wir empfehlen Versuche mit drei verschiedenen Markierungsgraden, für die drei unterschiedliche molare Verhältnisse von reaktivem Reagenz zu Protein verwendet werden.

Der Alexa Fluor™ NHS-Ester ist in der Regel in hochwertigem wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) oder Dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345) aufgelöst. Die Reaktion erfolgt in 0,1 – 0,2 M-Natriumbicarbonat-Puffer, pH 8,3, bei Raumtemperatur für 1 Stunde. Da der pKa-Wert des Amino-Terminus niedriger ist als der der epsilon-Aminogruppe des Lysins, erreichen Sie möglicherweise eine stärker selektive Markierung des Amino-Terminus mit einem Puffer, der näher am neutralen pH-Wert liegt.

Konjugat-Aufreinigung
Markierte Antikörper werden in der Regel von freiem Alexa Fluor™ Farbstoff durch Einsatz einer Gel-Filtrationssäule wie Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 oder Ähnlichem getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 µg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 µg (A33088)

Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.


’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Chemische ReaktivitätAmin
Emission707 nm
Anregung684 nm
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor™ 680
ProdukttypFarbstoff
Menge1 mg
Reaktiver TeilAktiv-Ester, Succinimidylester
VersandbedingungRaumtemperatur
MarkertypAlexa Fluor Farbstoffe
ProduktlinieAlexa Fluor
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?

Yes. The important thing is to use a buffered solution with a pH between 8.0 and 8.5. Do not use Tris buffer, which has amine groups. Most other buffers will work fine in that pH range. This is also true for other amine-reactive dyes, such as succinimidyl (NHS) esters or TFP esters.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?

This is not recommended. Any trace amounts of water in the DMSO can promote spontaneous hydrolysis over time. Even if using anhydrous DMSO, DMSO is hygroscopic; it readily absorbs moisture from the atmosphere over time. A better alternative is to dissolve the reactive dye in a volatile solvent, make smaller aliquots and then evaporate off the solvent using a vacuum pump. The smaller aliquots of solid reactive dye should then be stored frozen, desiccated and protected from light. Contact Technical Support by sending an email to techsupport@thermofisher.com for the recommended volatile solvent.

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Zitierungen und Referenzen (17)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
A high-throughput, cell-based screening method for siRNA and small molecule inhibitors of mTORC1 signaling using the In Cell Western technique.
Authors:Hoffman GR, Moerke NJ, Hsia M, Shamu CE, Blenis J,
Journal:Assay Drug Dev Technol
PubMed ID:20085456
'The mTORC1 pathway is a central regulator of cell growth, and defective mTORC1 regulation plays a causative role in a variety of human diseases, including cancer, tumor syndromes such as the tuberous sclerosis complex (TSC) and lymphangioleiomyomatosis (LAM), and metabolic diseases such as diabetes and obesity. Given the importance of ... More
Tyramide signal amplification for analysis of kinase activity by intracellular flow cytometry.
Authors:Clutter MR, Heffner GC, Krutzik PO, Sachen KL, Nolan GP,
Journal:Cytometry A
PubMed ID:20824632
'Intracellular flow cytometry permits quantitation of diverse molecular targets at the single-cell level. However, limitations in detection sensitivity inherently restrict the method, sometimes resulting in the inability to measure proteins of very low abundance or to differentiate cells expressing subtly different protein concentrations. To improve these measurements, an enzymatic amplification ... More
Mps3p is a novel component of the yeast spindle pole body that interacts with the yeast centrin homologue Cdc31p.
Authors:Jaspersen SL, Giddings TH, Winey M
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:12486115
'Accurate duplication of the Saccharomyces cerevisiae spindle pole body (SPB) is required for formation of a bipolar mitotic spindle. We identified mutants in SPB assembly by screening a temperature-sensitive collection of yeast for defects in SPB incorporation of a fluorescently marked integral SPB component, Spc42p. One SPB assembly mutant contained ... More
Labeling of immune cells for in vivo imaging using magnetofluorescent nanoparticles.
Authors:Pittet MJ, Swirski FK, Reynolds F, Josephson L, Weissleder R
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:17406214
'Observation of immune and stem cells in their native microenvironments requires the development of imaging agents to allow their in vivo tracking. We describe here the synthesis of magnetofluorescent nanoparticles for cell labeling in vitro and for multimodality imaging of administered cells in vivo. MION-47, a prototype monocrystalline iron oxide ... More
Quantitative comparison of long-wavelength Alexa Fluor dyes to Cy dyes: fluorescence of the dyes and their bioconjugates.
Authors:Berlier JE, Rothe A, Buller G, Bradford J, Gray DR, Filanoski BJ, Telford WG, Yue S, Liu J, Cheung CY, Chang W, Hirsch JD, Beechem JM, Haugland RP, Haugland RP
Journal:J Histochem Cytochem
PubMed ID:14623938
'Amine-reactive N-hydroxysuccinimidyl esters of Alexa Fluor fluorescent dyes with principal absorption maxima at about 555 nm, 633 nm, 647 nm, 660 nm, 680 nm, 700 nm, and 750 nm were conjugated to antibodies and other selected proteins. These conjugates were compared with spectrally similar protein conjugates of the Cy3, Cy5, ... More