Alexa Fluor™ 594 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
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Alexa Fluor™ 594 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Alexa Fluor™ 594 ist ein heller, roter Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 594 ist wasserlöslich und pH-unempfindlich im Bereich vonWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A201045 mg
A375723 x 100 μg
A200041 mg
A3756525 mg
Katalognummer A20104
Preis (EUR)
2.384,65
온라인 행사
3.180,00
Ersparnis 795,35 (25%)
Each
Menge:
5 mg
Preis (EUR)
2.384,65
온라인 행사
3.180,00
Ersparnis 795,35 (25%)
Each
Alexa Fluor™ 594 ist ein heller, roter Farbstoff. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 594 ist wasserlöslich und pH-unempfindlich im Bereich von pH 4 bis pH 10 und wird für eine stabile Signalerzeugung in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 594 konjugiert mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Markierungssubstanzen und Amplifikationssubstraten, die für die Markierung und den Nachweis von Zellen optimiert wurden, an. Erfahren Sie mehr.

Der NHS-Ester (oder Succinimidylester) von Alexa Fluor™ 594 ist das beliebteste Hilfsmittel für die Konjugierung dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. NHS-Ester können zur Markierung der primären Amine (R-NH2) von Proteinen, Amin-modifizierten Oligonukleotiden und weiteren Amin-haltigen Molekülen verwendet werden. Das entstehende Konjugat mit Alexa Fluor™ weist eine hellere Fluoreszenz und höhere Fotostabilität als Konjugate mit anderen Fluorophoren mit ähnlichem Spektrum auf.

Ausführliche Informationen zu diesem Alexa Fluor™ NHS-Ester:

Fluorophor-Markierung: Alexa Fluor™ 594 Farbstoff
Reaktive Gruppe: NHS-Ester
Reaktivität: Primäre Amine auf Proteinen und Liganden, aminmodifizierte Oligonukleotide
Anregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 590/617 nm
Extinktionskoeffizient: 92.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: Texas Red™, Bodipy-TR
Molekulargewicht: 819,8

Typische Konjugationsreaktion
Amin-reaktive Farbstoffe können mit praktisch jedem Protein oder Peptid konjugiert werden (das bereitgestellte Protokoll ist für IgG-Antikörper optimiert). Sie können die Reaktion auf beliebige Proteinmengen skalieren, optimale Ergebnisse erzielen Sie jedoch bei einer Proteinkonzentration von mindestens 2 mg/ml. Wir empfehlen Versuche mit drei verschiedenen Markierungsgraden, für die drei unterschiedliche molare Verhältnisse von reaktivem Reagenz zu Protein verwendet werden.

Der Alexa Fluor™ NHS-Ester ist in der Regel in hochwertigem wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) oder Dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345) aufgelöst. Die Reaktion erfolgt in 0,1 – 0,2 M-Natriumbicarbonat-Puffer, pH 8,3, bei Raumtemperatur für 1 Stunde. Da der pKa-Wert des Amino-Terminus niedriger ist als der der epsilon-Aminogruppe des Lysins, erreichen Sie möglicherweise eine stärker selektive Markierung des Amino-Terminus mit einem Puffer, der näher am neutralen pH-Wert liegt.

Konjugat-Aufreinigung
Markierte Antikörper werden in der Regel von freiem Alexa Fluor™ Farbstoff durch Einsatz einer Gel-Filtrationssäule wie Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 oder Ähnlichem getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 µg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 µg (A33088)

Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.


’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Chemische ReaktivitätAmin
Emission617 nm
Anregung590 nm
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor™ 594
ProdukttypFarbstoff
Menge5 mg
Reaktiver TeilAktiv-Ester, Succinimidylester
VersandbedingungRaumtemperatur
MarkertypAlexa Fluor Farbstoffe
ProduktlinieAlexa Fluor
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?

Yes. The important thing is to use a buffered solution with a pH between 8.0 and 8.5. Do not use Tris buffer, which has amine groups. Most other buffers will work fine in that pH range. This is also true for other amine-reactive dyes, such as succinimidyl (NHS) esters or TFP esters.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?

This is not recommended. Any trace amounts of water in the DMSO can promote spontaneous hydrolysis over time. Even if using anhydrous DMSO, DMSO is hygroscopic; it readily absorbs moisture from the atmosphere over time. A better alternative is to dissolve the reactive dye in a volatile solvent, make smaller aliquots and then evaporate off the solvent using a vacuum pump. The smaller aliquots of solid reactive dye should then be stored frozen, desiccated and protected from light. Contact Technical Support by sending an email to techsupport@thermofisher.com for the recommended volatile solvent.

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Zitierungen und Referenzen (54)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
PKC-induced intracellular trafficking of Ca(V)2 precedes its rapid recruitment to the plasma membrane.
Authors:Zhang Y, Helm JS, Senatore A, Spafford JD, Kaczmarek LK, Jonas EA,
Journal:J Neurosci
PubMed ID:18322103
'Activation of protein kinase C (PKC) potentiates secretion in Aplysia peptidergic neurons, in part by inducing new sites for peptide release at growth cone terminals. The mechanisms by which ion channels are trafficked to such sites are, however, not well understood. We now show that PKC activation rapidly recruits new ... More
Development of a novel FRET immunosensor technique.
Authors:Lichlyter DJ, Grant SA, Soykan O
Journal:Biosens Bioelectron
PubMed ID:14611757
'We report on a novel technique to develop an optical immunosensor based on fluorescence resonance energy transfer (FRET). IgG antibodies were labeled with acceptor fluorophores while one of three carrier molecules (protein A, protein G, or F(ab'')2 fragment) was labeled with donor fluorophores. The carrier molecule was incubated with the ... More
A lipid receptor sorts polyomavirus from the endolysosome to the endoplasmic reticulum to cause infection.
Authors:Qian M, Cai D, Verhey KJ, Tsai B,
Journal:PLoS Pathog
PubMed ID:19503604
'The mechanisms by which receptors guide intracellular virus transport are poorly characterized. The murine polyomavirus (Py) binds to the lipid receptor ganglioside GD1a and traffics to the endoplasmic reticulum (ER) where it enters the cytosol and then the nucleus to initiate infection. How Py reaches the ER is unclear. We ... More
Sensitive fluorescence polarization technique for rapid screening of alpha-synuclein oligomerization/fibrillization inhibitors.
Authors:Luk KC, Hyde EG, Trojanowski JQ, Lee VM,
Journal:Biochemistry
PubMed ID:17927212
'Parkinson''s disease (PD) is characterized by the accumulation of fibrillar alpha-synuclein (alpha-Syn) inclusions known as Lewy bodies (LBs) and Lewy neurites. Mutations in the alpha-Syn gene or extra copies thereof cause familial PD or dementia with LBs (DLB) in rare kindreds, but abnormal accumulations of wildtype alpha-Syn also are implicated ... More
Persistent cAMP-signals triggered by internalized G-protein-coupled receptors.
Authors:Calebiro D, Nikolaev VO, Gagliani MC, de Filippis T, Dees C, Tacchetti C, Persani L, Lohse MJ,
Journal:PLoS Biol
PubMed ID:19688034
'G-protein-coupled receptors (GPCRs) are generally thought to signal to second messengers like cyclic AMP (cAMP) from the cell surface and to become internalized upon repeated or prolonged stimulation. Once internalized, they are supposed to stop signaling to second messengers but may trigger nonclassical signals such as mitogen-activated protein kinase (MAPK) ... More