Essential 8™ Adaptation Kit

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Essential 8™ Adaptation Kit

Das Essential 8™ Adaptationskit enthält Essential 8™ Medium und rekombinantes humanes Laminin 521 (rhLaminin-521) für ein optimales Überleben während desWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
A25935	1 Kit

Katalognummer A25935

Preis (EUR)

451,00

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Menge:

1 Kit

Preis (EUR)

451,00

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Das Essential 8™ Adaptationskit enthält Essential 8™ Medium und rekombinantes humanes Laminin 521 (rhLaminin-521) für ein optimales Überleben während des Übergangs von Feeder-abhängiger zur Feeder-freien Kultur. rhLaminin-521 fördert nachweislich das zelluläre Überleben unter belastenden Bedingungen in Abwesenheit von niedermolekularen Inhibitoren. Darüber hinaus hat sich gezeigt, dass rhLaminin-521 das PSC-Wachstum für >20 Passagen ohne Anzeichen karyotypischer Anomalien unterstützt und die Fähigkeit von PSCs zur Differenzierung in alle drei Keimbahnlinien aufrechterhalten. rhLaminin-521 kann auch separat erworben werden.

Das Essential 8 Adaptation Kit ist:
• Robust–Überführung von Zellen zwischen Feeder-abhängigen und Feeder-freien Kultursystemen mit minimalem Aufwand
• Physiologisch relevant–Zellexpansion mit minimaler Differenzierung
• Skalierbar–Passage von Stammzelllinien als Einzelzellen ohne Beeinträchtigung der genetischen Stabilität

Problemloser Übergang
Bei Verwendung mit Essential 8 Medium sorgt rhLaminin-521 für eine robuste Kulturmatrix, die eine pluripotente Stammzellanhaftung und -expansion beim Übergang aus Feeder-abhängigen Kultursystemen unterstützt.

Zuverlässige Expansion
rhLaminin-521 wird in Blastozysten exprimiert und bietet daher eine Umgebung, die die menschliche Stammzellnische imitiert.

Einfach skalierbar
rhLaminin-521 fördert den sicheren Erhalt pluripotenter Stammzellen als einzelne Zellen, wenn keine ROCK-Inhibitoren vorhanden sind.

Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.

Specifications

ZelltypPluripotente Stammzellen

ProduktlinieEssential 8

ProdukttypStammzellen-Adaptationskit

Menge1 Kit

VersandbedingungSupplement und Matrix – Trockeneis, Basal – Umgebungstemperatur

KlassifikationXeno-Free

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

• 100 µg rhLaminin-521, bei -10 bis -30 °C lichtgeschützt lagern
• 500 ml Basalmedium, bei 2 bis 8 °C lichtgeschützt lagern
• 10 ml Supplement, bei -5 bis -20 °C lichtgeschützt lagern

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I use the Poly-D-Lysine matrix with other coatings?

iPSC-derived neurons have been cultured successfully on Poly-D-Lysine with a secondary coating of mouse and human laminin.

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I am interested in using StemFlex Medium in somatic cell reprogramming. What protocol should I follow for blood cells?

We have evaluated the use of Cytotune-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit (Cat. No. A16517) for somatic cell reprogramming of CD34+ blood cells. For CD34+ cells, follow the instructions provided in the Cytotune 2.0 reprogramming manual for feeder-free reprogramming (pgs. 39-44). On Day 3, you can utilize rhVTN-N (Cat. No. A14700), Geltrex (Cat. No. A1413302), or rhLaminin-521 (Cat. No. A29248 or A29249). From Day 8 onward, rather than feeding daily with Essential 8 Medium, reprogrammed CD34+ cells should be fed every-other-day with StemFlex Medium.

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I am interested in using StemFlex Medium in somatic cell reprogramming. What protocol should I follow for human fibroblasts?

We have evaluated the use of Cytotune-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit (Cat. No. A16517) for somatic cell reprogramming of both neonatal and adult human dermal fibroblasts. For fibroblasts, follow the instructions provided in the Cytotune 2.0 reprogramming manual for feeder-free reprogramming (pgs. 16-20). On Day 7, you may use rhVTN-N (Cat. No. A14700), Geltrex matrix (Cat. No. A1413302), or rhLaminin-521 (Cat. No. A29248 or A29249). From Day 8 onward, rather than feeding daily with Essential 8 Medium, we recommend that you feed reprogrammed fibroblasts every-other-day with StemFlex Medium.

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Can I use Geltrex matrix instead of rhLaminin-521 for clonal expansion workflows where cells are seeded at 1-5 cells per well of a 96-well plate?

We have not yet evaluated the Geltrex matrix system for clonal expansion in the presence of StemFlex Medium. However, rhLaminin-521 does provide optimal survival of cells following single-cell passaging and thus this matrix is recommended for such critical applications.

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What protocol is recommended for delivery of Cas9 protein:guide RNA complex to my PSCs cultured in StemFlex Medium?

We recommend use of the Neon Electroporation device for electroporation of PSCs with Cas9 protein:guide RNA complex following the protocol guidance in the following demonstrated protocol (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/PG1584-PJT1313-COL31227-Demonstrated-Protocol-Performing-CRISPR-Cas9-FHR.pdf); see the section entitled “Knockout by electroporation of RNP using the Neon Transfection System.” We have seen that the Neon electroporation protocols 7 and 14 provide optimal indel formation while maintaining cell survival. However, the electroporation conditions may need to be optimized for your pluripotent cell line.

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