Das TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct Kit ist ein vollständiges Zelllysat-System, das für die Genexpressionsanalyse direkt aus kultivierten Zellen ohne RNA-Aufreinigung entwickelt wurde. TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct Zelllysereagenzien werden mit dem Fast Advanced Enzymgemisch für reverse Transkription mit höchster Empfindlichkeit, 2x RT-Puffer und erstklassigem TaqMan Fast Advanced Mastermix bereitgestellt. Das TaqMan Fast Advanced Cells-to-Ct Kit bietet die erforderliche Empfindlichkeit im schnellsten, verfügbaren Arbeitsablauf: Erhalten Sie die Ergebnisse Ihrer Genexpressionsanalyse von einer gesamten Zellplatte in ca. 80 Minuten.

• Umfassend – der optimierte Arbeitsablauf umfasst Zelllysereagenzien zur gDNA-Entfernung, das neue Fast Advanced RT-Enzymgemisch, Puffer und den neuen TaqMan Fast Advanced Mastermix
• Schnell – Probenvorbereitung bei Raumtemperatur in 7 Minuten, einschließlich DNase-Behandlung
• Einfach – Lyse der Proben in einem Röhrchen oder direkt in Kulturplatten
• Robust – Genexpressionsanalysen mit 10 – 100.000 Zellen pro Probe; Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA
• Effizient – enthält genügend Reagenzien für 500 Echtzeit-PCR-Ergebnisse von 100 Ausgangsproben

Einzigartige Methode ohne Isolierung von RNA aus kultivierten Zellen
Die Cells-to-Ct Methode bietet ein einzigartiges Lysereagenz, das die Zellen lysiert und die RNA schützt. Die DNA-Entfernung erfolgt zeitgleich im 5-minütigen Lyseschritt, um Zeit zu sparen und die Anwenderfreundlichkeit zu verbessern. Die Lyse wird dann durch Zugabe einer “Stopplösung” gestoppt, die irreversibel an die Lysereagenzien bindet.

Das TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit enthält Reagenzien für die reverse Transkription (RT) für die cDNA-Synthese und den TaqMan Fast Advanced Mastermix für die Echtzeit-PCR-Analyse. TaqMan Primer-/Sondensätze sind separat erhältlich.

Einfache, 7-minütige Probenvorbereitung
Das TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit ist für 10 – 100.000 kultivierte Zellen/Probe konzipiert. Die Zellen werden in PBS gewaschen und fünf Minuten lang bei Raumtemperatur in Lösung lysiert; die DNase-Behandlung kann gleichzeitig erfolgen. Die Lyse wird bei Raumtemperatur durch 2-minütige Inkubation mit Stopplösung beendet. Die Lysate sind nun für die reverse Transkription oder Lagerung bei -20 °C über einen kurzen Zeitraum oder bei -80 °C über einen längeren Zeitraum bereit.

Maximale Nachweisempfindlichkeit
Im Gegensatz zu einigen Kits von Mitbewerber-Produkten, die die Lysatmenge in der RT-Reaktion auf 10 % begrenzen, kann das TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit 45 % des gesamten RT-Reaktionsvolumens als Zelllysat aufnehmen. Außerdem kann die cDNA bis zu 45 % des Real-Time PCR-Reaktionsvolumens ausmachen. Das große Lysatvolumen in der optimierten RT-Reaktion zusammen mit dem großen cDNA-Volumen in der nachfolgenden Echtzeit-PCR mittels TaqMan Fast Advanced Mastermix sorgen für maximale Empfindlichkeit. Der Mastermix amplifiziert Targets präzise und genau und ermöglicht so den Nachweis kleiner Target-Mengen, wie z. B. Transkripte, die in niedrigen Konzentrationen exprimiert werden.

Weniger Probenverlust und Transferfehler
Da Proben direkt in Kultur-Wells (96- oder 384-Wells) verarbeitet werden können, werden Arbeitsaufwand, Probenverluste oder Transferfehler minimiert, während die schnelle Verarbeitung hoher Durchsätze vereinfacht wird. Im Gegensatz zu altmodischen RNA-Isolierungsprotokollen mit mehreren Schritten sind weder Erwärmung, Waschen noch Zentrifugation erforderlich. Das Kit verkürzt einen mühsamen Prozess von ansonsten 30 bis 60 Minuten auf nur 7 Minuten.

Kompatibel mit TaqMan Genexpressions-Assays auf höchstem Niveau
Der Arbeitsablauf des TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kits ermöglicht eine unübertroffene Bewertung der Genexpression mit einem der > 700.000 TaqMan Genexpressions-Assays. Dieses Kit wurde ausgiebig mit einer breiten Auswahl an TaqMan Genexpressions-Assays auf seine Spezifität getestet.

Bewährte Leistung, bewährte Kombination
Alle Komponenten des TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kits wurden für eine konsistente und zuverlässige Leistung optimiert. Kein Rätselraten mehr bei der Zusammenstellung separater Probenvorbereitungs-, RT- und real-time PCR-Kits. Zudem wurde das TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit mit TaqMan Genexpressionsassays validiert, um die Qualitätssicherung zu verbessern und Ihnen die Empfindlichkeit zu bieten, die Sie für den schnellsten „Sample-to-Answer“-Arbeitsablauf benötigen.