Alexa Fluor™ 647 NHS-Ester (Succinimidylester)
Alexa Fluor™ 647 NHS-Ester (Succinimidylester)
Alexa Fluor™ 647 NHS-Ester (Succinimidylester)
Alexa Fluor™ 647 NHS-Ester (Succinimidylester)
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 647 NHS-Ester (Succinimidylester)

Alexa Fluor™ 647 ist ein heller und lichtbeständiger fernroter Farbstoff mit einer hervorragend für den 633 nm-Laser geeigneten Anregung. DerWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
A375733 x 100 μg
A200061 mg
A201065 mg
A3756625 mg
Katalognummer A37573
Preis (EUR)
273,00
Each
Menge:
3 x 100 μg
Preis (EUR)
273,00
Each
Alexa Fluor™ 647 ist ein heller und lichtbeständiger fernroter Farbstoff mit einer hervorragend für den 633 nm-Laser geeigneten Anregung. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 647 ist wasserlöslich und pH-unempfindlich im Bereich von pH 4 bis pH 10 und wird für eine stabile Signalerzeugung in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet. Die Fluoreszenz dieses langwelligen Alexa Fluor™ Farbstoffs ist für das menschliche Auge unsichtbar, wird jedoch von den meisten Bildgebungssystemen leicht erkannt. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 647 konjugiert mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Markierungssubstanzen und Amplifikationssubstraten, die für die Markierung und den Nachweis von Zellen optimiert wurden, an. Erfahren Sie mehr.

Der NHS-Ester (oder Succinimidylester) von Alexa Fluor™ 647 ist das beliebteste Hilfsmittel für die Konjugierung dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. NHS-Ester können zur Markierung der primären Amine (R-NH2) von Proteinen, Amin-modifizierten Oligonukleotiden und weiteren Amin-haltigen Molekülen verwendet werden. Das entstehende Konjugat mit Alexa Fluor™ weist eine hellere Fluoreszenz und höhere Fotostabilität als Konjugate mit anderen Fluorophoren mit ähnlichem Spektrum auf.

Ausführliche Informationen zu diesem Alexa Fluor™ NHS-Ester:

Fluorophor-Markierung: Alexa Fluor™ 647 Farbstoff
Reaktive Gruppe: NHS-Ester
Reaktivität: Primäre Amine auf Proteinen und Liganden, aminmodifizierte Oligonukleotide
Anregungs-/Emissionsmaxima (Ex/Em) des Konjugats: 651/672 nm
Extinktionskoeffizient: 270.000 cm-1M-1
Farbstoffe mit ähnlichem Spektrum: CY5™
Molekulargewicht: ∼1250

Typische Konjugationsreaktion
Amin-reaktive Farbstoffe können mit praktisch jedem Protein oder Peptid konjugiert werden (das bereitgestellte Protokoll ist für IgG-Antikörper optimiert). Sie können die Reaktion auf beliebige Proteinmengen skalieren, optimale Ergebnisse erzielen Sie jedoch bei einer Proteinkonzentration von mindestens 2 mg/ml. Wir empfehlen Versuche mit drei verschiedenen Markierungsgraden, für die drei unterschiedliche molare Verhältnisse von reaktivem Reagenz zu Protein verwendet werden.

Der Alexa Fluor™ NHS-Ester ist in der Regel in hochwertigem wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) oder Dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345) aufgelöst. Die Reaktion erfolgt in 0,1 – 0,2 M-Natriumbicarbonat-Puffer, pH 8,3, bei Raumtemperatur für 1 Stunde. Da der pKa-Wert des Amino-Terminus niedriger ist als der der epsilon-Aminogruppe des Lysins, erreichen Sie möglicherweise eine stärker selektive Markierung des Amino-Terminus mit einem Puffer, der näher am neutralen pH-Wert liegt.

Konjugat-Aufreinigung
Markierte Antikörper werden in der Regel von freiem Alexa Fluor™ Farbstoff durch Einsatz einer Gel-Filtrationssäule wie Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 oder Ähnlichem getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Aufreinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 – 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 – 50 μg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 – 100 μg (A33088)

Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine breite Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits, passend zu Ihrem Ausgangsmaterial und Ihrer Experimentanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™ Handbuch.


’’’Wenn Sie in unserem Online-Katalog das Gesuchte nicht finden, erstellen wir gern für Sie ein Antikörper- oder Proteinkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für die Qualität unserer Arbeit. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Nur für Forschungszwecke.Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Emission672 nm
Anregung651 nm
ProdukttypFarbstoff
Menge3 x 100 μg
VersandbedingungRaumtemperatur
ProduktlinieAlexa Fluor
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
3 Röhrchen
Nach Erhalt trocken bei -20 °°C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?

Yes. The important thing is to use a buffered solution with a pH between 8.0 and 8.5. Do not use Tris buffer, which has amine groups. Most other buffers will work fine in that pH range. This is also true for other amine-reactive dyes, such as succinimidyl (NHS) esters or TFP esters.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?

This is not recommended. Any trace amounts of water in the DMSO can promote spontaneous hydrolysis over time. Even if using anhydrous DMSO, DMSO is hygroscopic; it readily absorbs moisture from the atmosphere over time. A better alternative is to dissolve the reactive dye in a volatile solvent, make smaller aliquots and then evaporate off the solvent using a vacuum pump. The smaller aliquots of solid reactive dye should then be stored frozen, desiccated and protected from light. Contact Technical Support by sending an email to techsupport@thermofisher.com for the recommended volatile solvent.

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Zitierungen und Referenzen (15)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Ultrahigh-resolution imaging reveals formation of neuronal SNARE/Munc18 complexes in situ.
Authors:Pertsinidis A, Mukherjee K, Sharma M, Pang ZP, Park SR, Zhang Y, Brunger AT, Südhof TC, Chu S,
Journal:
PubMed ID:23821748
'Membrane fusion is mediated by complexes formed by SNAP-receptor (SNARE) and Secretory 1 (Sec1)/mammalian uncoordinated-18 (Munc18)-like (SM) proteins, but it is unclear when and how these complexes assemble. Here we describe an improved two-color fluorescence nanoscopy technique that can achieve effective resolutions of up to 7.5-nm full width at half ... More
COPI buds 60-nm lipid droplets from reconstituted water-phospholipid-triacylglyceride interfaces, suggesting a tension clamp function.
Authors:Thiam AR, Antonny B, Wang J, Delacotte J, Wilfling F, Walther TC, Beck R, Rothman JE, Pincet F,
Journal:
PubMed ID:23901109
'Intracellular trafficking between organelles is achieved by coat protein complexes, coat protomers, that bud vesicles from bilayer membranes. Lipid droplets are protected by a monolayer and thus seem unsuitable targets for coatomers. Unexpectedly, coat protein complex I (COPI) is required for lipid droplet targeting of some proteins, suggesting a possible ... More
Arf1/COPI machinery acts directly on lipid droplets and enables their connection to the ER for protein targeting.
Authors:Wilfling F, Thiam AR, Olarte MJ, Wang J, Beck R, Gould TJ, Allgeyer ES, Pincet F, Bewersdorf J, Farese RV, Walther TC,
Journal:
PubMed ID:24497546
Lipid droplets (LDs) are ubiquitous organelles that store neutral lipids, such as triacylglycerol (TG), as reservoirs of metabolic energy and membrane precursors. The Arf1/COPI protein machinery, known for its role in vesicle trafficking, regulates LD morphology, targeting of specific proteins to LDs and lipolysis through unclear mechanisms. Recent evidence shows ... More
Targeted therapy of spontaneous murine pancreatic tumors by polymeric micelles prolongs survival and prevents peritoneal metastasis.
Authors:Cabral H, Murakami M, Hojo H, Terada Y, Kano MR, Chung UI, Nishiyama N, Kataoka K,
Journal:
PubMed ID:23801758
Nanoscaled drug-loaded carriers are of particular interest for efficient tumor therapy as numerous studies have shown improved targeting and efficacy. Nevertheless, most of these studies have been performed against allograft and xenograft tumor models, which have altered microenvironment features affecting the accumulation and penetration of nanocarriers. Conversely, the evaluation of ... More
ATP-independent diffusion of double-stranded RNA binding proteins.
Authors:Koh HR, Kidwell MA, Ragunathan K, Doudna JA, Myong S,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:23251028
The proteins harboring double-stranded RNA binding domains (dsRBDs) play diverse functional roles such as RNA localization, splicing, editing, export, and translation, yet mechanistic basis and functional significance of dsRBDs remain unclear. To unravel this enigma, we investigated transactivation response RNA binding protein (TRBP) consisting of three dsRBDs, which functions in ... More