GeneArt Gibson Assembly HiFi Mastermix ermöglicht das Zusammensetzen und die Klonierung von DNA mithilfe einer Technik, mit der sich mehrere überlappende DNA-Fragmente in einer einzigen isothermalen Reaktion über eine Dauer von 15–60 Minuten nathlos miteinander verbinden lassen. DNA-Fragmente unterschiedlicher Länge werden einheitlich mit komplementären Überlappungen zwischen Fragmenten zusammengesetzt. Die inhärente Flexibilität dieses Ansatzes eignet sich für kleine und große DNA-Konstrukte und umfasst sowohl einzelne als auch mehrere Einsätze. Die resultierenden Produkte können für eine Vielzahl von Downstream-Prozessen verwendet werden, einschließlich Transformation, PCR- und Rollkreis-Amplifikation (RCA). Der GeneArt Gibson Assembly HiFi Mastermix umfasst einen Mastermix, eine Positivkontrolle sowie Wasser und eignet sich für die Verwendung Ihrer eigenen kompetenten Zellen.

Merkmale des GeneArt Gibson Assembly HiFi Mastermix sind u. a.:
• Einfach— nahtlos bis zu sechs DNA-Fragmente in einer einzigen Reaktion assemblieren und klonen
• Effizient — hohe Wiedergabetreue sorgt für mehr korrekte Klone als andere Methoden
• Flexibel— die Designrichtlinien ermöglichen die Montage in jeden Vektor Ihrer Wahl
• Praktisch — erhältlich als Master Mix Kits und Klonierungskits komplett mit chemischen oder elektrokompetenten Zellen
• Vertrauenswürdig — über 4000 Erwähnungen in der wissenschaftlicher Literatur, die großen Erfolg hervorheben

Nahtlose Zusammenstellung mehrerer Fragmente
GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsklonierung ist ein einfacher, einstufiger Prozess, bei dem bis zu sechs Fragmente in einem proprietären enzymatischen Mix kombiniert werden, um DNA-Fragmente mit gemeinsam genutzter Endhomologie zusammenzubauen, ohne dass zusätzliche Sequenzen oder Narben zurückgelassen werden (nahtlos). Nach einer 15–60-minütigen Inkubation wird ein Teil der Assemblierungsreaktion in chemisch kompetente oder elektrokompetente Zellen umgewandelt, wodurch Klone entstehen, die am nächsten Tag zur Analyse bereit sind. Die erforderliche 20- bis 40-Basenpaar-Endhomologie ist für die Synthese in das De-novo-Fragment integriert oder kann einfach durch PCR-Amplifikation mit kundenspezifischen DNA-Oligos entwickelt werden. Diese spezielle Enzymmischung erzeugt ein nahtloses und kovalent gebundenes DNA-Konstrukt, das eine hohe Effizienz bietet.

Robuste Methode für maximale Effizienz
Aufgrund des kovalent gebundenen Endprodukts ermöglicht die GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsmethode die Verwendung von chemisch kompetenten Zellen oder elektrokompetenten Zellen für höchste Transformationseffizienz und verbessert so den Erfolg bei der Suche nach dem richtigen Klon, insbesondere für anspruchsvollere Konstrukte. Restriktionsenzyme, Ligationen oder Rekombinationsstellen sind nicht erforderlich und die Methode bietet ein perfekt nahtloses Konstrukt ohne ungewollte Extrabasen.

Bietet große Vielseitigkeit
Die GeneArt Gibson HiFi Assemblierungsmethode bietet Vielseitigkeit, kann viele Techniken durch die schnelle Kombination, Hinzufügung, Löschung oder den Austausch von DNA-Segmenten optimieren und macht das Subklonen überflüssig, was Zeit und Aufwand im Klonierungsablauf spart.

Praktische Formate
Die GeneArt Gibson HiFi Assemblierungskits sind in verschiedenen Formaten erhältlich, darunter:
• GeneArt Gibson Assembly HiFi Klonierungskit, chemisch kompetente Zellen (mit One Shot TOP10 chemisch kompetenten Zellen)
• GeneArt Gibson Assembly HiFi Klonierungskit, elektrokompetente Zellen (mit ElectroMAX DH10B elektrokompetenten Zellen)
• GeneArt Gibson Assembly HiFi Mastermix-Kits (Klonierungskit ohne Zellen) (diese Seite)