Das MEGAscript™ T7 Kit ist ein In-vitro-Transkriptions-Kit für hohe Ausbeuten. Die hohe Ausbeute wird durch Modifikation der typischen Transkriptionsreaktionsbedingungen erzielt, so dass sehr hohe Nukleotidkonzentrationen effizient angewendet werden können. Das T7-Enzymgemisch und der 10X Reaktionspuffer sind speziell für jede Charge und RNA-Polymerase kalibriert.

Verwendung von des MEGAscript™ T7 Kits
Das MEGAscript™ T7 Kit enthält In-vitro-Transkriptionsreaktionskomponenten ein Kontroll-Template. Jedes Kit ergibt insgesamt 3–5 mg RNA (ca. 100 µg RNA oder mehr pro Reaktion) aus dem Kontroll-Template, das im Lieferumfang enthalten ist. Dies entspricht 400–650 Mol RNA für jedes Template-Mol. Kleinere Templates ergeben in der Regel eine geringere Masse und eine größere Produkt-Mol-Ausbeute. Neuartige Transkriptionsreaktionsbedingungen und eine patentierte, ertragreiche Technologie ermöglichen die Synthese der 10 – 50-fachen Menge an RNA, die durch konventionelle Transkriptionsreaktionen erzeugt wird.

Anwendungen
Das MEGAscript™ T7 Kit ist für die Synthese großer Mengen nicht markierter RNA oder RNA mit geringer spezifischer Aktivität für eine Vielzahl von Anwendungen vorgesehen, einschließlich In-vitro-Translation, Antisense/Mikroinjektionsstudien und Isolierung von RNA-bindenden Proteinen. Bei groß angelegten Transkriptionsreaktionen ist die Konzentration von allen 4 Nukleotiden hoch, deutlich über dem K_m für das Enzym. Das MEGAscript™ T7 Kit ergibt typischerweise mehr als 10 Mal mehr RNA als herkömmliche In-vitro-Transkriptionsreaktionen. Das Kit wird nicht für die Synthese von Sonden mit hoher spezifischer Aktivität empfohlen.

Zubehör
MessageAmp™ aRNA Amplifikationskits nutzen die MEGAscript™-Technologie und wurden speziell für die Amplifikation von cRNA vor der Array-Analyse entwickelt. Für die Entfernung von freien Nukleotiden, Pufferkomponenten und Enzymen aus In-vitro-Transkriptionsprodukten empfehlen wir das MEGAclear™ Kit (Katalognummer AM1908) und das MEGAclear™-96 Kit (Katalognummer AM1909).