Alexa Fluor™ 488 Tyramide SuperBoost™ Kit, streptavidin

Die SuperBoost™ Tyramid-Signalamplifikation ist die empfindlichste Methode zum Nachweis von schwach konzentrierten Zielmolekülen in der multiplexfähigen Fluoreszenz-Immunozytochemie (ICC), Immunhistochemie (IHC) und In-situ-Hybridisierung (ISH). SuperBoost Kits kombinieren die Helligkeit von AlexaFluor™ Farbstoffen mit der überlegenen Signalverstärkung einer poly-HRP-vermittelten Tyramid-Markierungsreaktion, um die Empfindlichkeit gegenüber Standardmethoden um das 10- bis 200-Fache zu erhöhen. SuperBoost Kits sorgen für eine klare Sichtbarkeit entscheidender Bereiche, die von Standard-Bildgebungsverfahren nicht enthüllt werden, und verbessern die Ergebnisse.

SuperBoost Kits sind einfach zu verwenden und einfach an die Standard-ICC-, IHC- oder FISH-Versuchsprotokolle anzupassen, wobei jede Zelle oder jeder Gewebetyp geeignet ist. Zellen, die mit einem Super Boost-Set gekennzeichnet sind, können mit jedem Mikroskop abgebildet werden, wodurch hochauflösende Multiplex-Bilder erzeugt werden. Dieses spezielle Set enthält AlexaFluor 488 Tyramid (496/524 ex/em), das mit einem standardmäßigen Green/FITC/GFP-Filterwürfel erkannt wird. Dieses Kit enthält auch HRP-konjugiertes Streptavidin.

Zu den Merkmalen der SuperBoost Kits zählen:
• Sehr hohe Empfindlichkeit für den Nachweis von niedrig konzentrierten oder schwer nachweisbaren Zielmolekülen durch Fluoreszenz-Bildgebung
Einfaches Protokoll und Nachweis mit Standardfiltern
• Geeignet für hochauflösende Multiplex-Bilder, Co-Markierung mit DAPI, Sekundärantikörpern und anderen SuperBoost Kits
• Erfordert 10 bis 100 Mal weniger Primärantikörper als Standard-ICC/IHC/ISH-Experimente

SuperBoost Kits basieren auf dem Tyramid-Signalamplifikationssystem, das die katalytische Aktivität der Meerrettich-Peroxidase (HRP) verwendet, um eine High-Density-Markierung eines Zielproteins oder einer Nukleinsäuresequenz in situ zu erzeugen. Ein typisches ICC/IHC/ISH-Experiment mit einem SuperBoost-Set erfordert 10–100 Mal weniger primären Antikörper als Standard-ICC/IHC/ISH-Experimente. SuperBoost Sets bieten eine überlegene spezifische Signalintensität gegenüber dem Hintergrund, sodass das Protokoll einfach optimiert werden kann, um spezifische Signale in Proben nachzuweisen, bei denen eine hohe endogene Autofluoreszenz beobachtet wird.

Vorteile der SuperBoost Kits

Verbessertes Signal mit Alexa Fluor Tyramiden: SuperBoost-Sets verwenden Alexa Fluor Tyramide, die mit HRP reagieren und hellen und lichtstabilen Alexa Fluor Farbstoff auf umgebenden Proteinen und anderen ähnlichen Molekülen ablagern. SuperBoost Kits sind die einzigen Kits, die die Helligkeit der Alexa Fluor Farbstoffe mit der Verbesserung der Tyramid-Signalverstärkung kombinieren, um ein überlegenes Signal zu erzeugen.

Reaktions-Stopplösung: Wie bei jedem enzymbasierten Markierungssystem kann es zu einer Überentwicklung des Signals kommen. SuperBoost-Sets enthalten eine HRP-Stopplösung, um die HRP-Reaktion anzuhalten. HRP-Stopplösung kann verwendet werden, um ein maximales Signal zu erhalten, ohne das Hintergrundsignal zu erhöhen. Bilder, die mit optimierten HRP-Reaktionszeiten erstellt werden, sind genauso scharf wie Bilder, die mit Standard-ICC/IHC/ISH-Methoden erzeugt werden, die Empfindlichkeit ist jedoch 10-200-mal höher.

Reduktion von Hintergrund: SuperBoost-Sets beinhalten Blocker zur Eliminierung oder Reduktion von endogener Peroxidase und fluoreszierenden Hintergrundsignalen. Diese Blocker tragen dazu bei, dass nur bestimmte Signale verstärkt werden, während nicht-spezifische und Hintergrundsignale überprüft werden.