Search
Zitierungen und Referenzen (15)
Invitrogen™
Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Protein Synthesis Assay Kit
Das Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit bietet eine schnelle, empfindliche, ungiftige und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Synthese vonWeitere Informationen
| Katalognummer | Menge |
|---|---|
| C10429 | 25 Deckgläser oder zwei 96-Well-Platten |
Katalognummer C10429
Preis (EUR)
836,00
Each
Menge:
25 Deckgläser oder zwei 96-Well-Platten
Preis (EUR)
836,00
Each
Das Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit bietet eine schnelle, empfindliche, ungiftige und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Synthese von neu entstandenen Proteinen mittels Fluoreszenzmikroskopie, High-Content-Bildgebung oder Durchflusszytometrie. Im Kit enthalten sind L-Homopropargylglycin (HPG), ein Aminosäure-Analog zu Methionin, das einen Alkin-Anteil enthält, und Alexa Fluor™ 594 Azid. Das HPG wird kultivierten Zellen zugeführt und während der aktiven Proteinsynthese in Proteine integriert. Die Zugabe des Alexa Fluor™ 594 Azids führt zu einer chemoselektiven Ligation oder “Click-Reaktion zwischen dem grün fluoreszierenden Azid und dem Alkin, wodurch die modifizierten Proteine durch eine bildbasierte Analyse nachgewiesen werden können.
• Nicht radioaktive Alternative—eine Alternative zum herkömmlichen 35S-Methionin
• Visualisierung von Massenproteindynamik—die fluoreszierende Kennzeichnung von Proteinen ermöglicht die Bestimmung ihrer Lokalisierung, einschließlich Aggregation
• Spezifizität—selektive, spezifische Reaktion zwischen Markern und Nachweis-Tags
• Stabilität —das Produkt enthält eine irreversible, kovalente Bindung
• Multiplex-fähig—Verwendung in Verbindung mit Click™-iT AHA (Azidaminosäure und Alkinfarbstoff) zum Nachweis räumlicher und zeitlicher Abweichungen
• Anwendbar für biologische Proben—einfacher Nachweis, hohe Empfindlichkeit und niedriger Hintergrund, unabhängig von der Komplexität
Das Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit wurde erfolgreich in HeLa-, A549- und U-2-OS-Zellen mit einer Vielzahl von Reagenzien getestet, die die Proteinsynthese hemmen, einschließlich Cycloheximid und Anisomycin. Die Anwendbarkeit dieser Sonden zur Überwachung der Proteindegradation wurde auch mit Inhibitoren des Proteasoms (MG132 und Bortezomib) und Autophagie-Blockern (Chloroquin) in HeLa-Zellen nachgewiesen.
Aufgrund der Unterschiede in der Click-iT™ Chemie zwischen dem Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit und Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488 HCS-Kit können diese Kits in Verbindung mit der räumlichen oder zeitlichen Bestimmung von Unterschieden in der Synthese neu entstandener Proteine verwendet werden.
• Nicht radioaktive Alternative—eine Alternative zum herkömmlichen 35S-Methionin
• Visualisierung von Massenproteindynamik—die fluoreszierende Kennzeichnung von Proteinen ermöglicht die Bestimmung ihrer Lokalisierung, einschließlich Aggregation
• Spezifizität—selektive, spezifische Reaktion zwischen Markern und Nachweis-Tags
• Stabilität —das Produkt enthält eine irreversible, kovalente Bindung
• Multiplex-fähig—Verwendung in Verbindung mit Click™-iT AHA (Azidaminosäure und Alkinfarbstoff) zum Nachweis räumlicher und zeitlicher Abweichungen
• Anwendbar für biologische Proben—einfacher Nachweis, hohe Empfindlichkeit und niedriger Hintergrund, unabhängig von der Komplexität
Das Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit wurde erfolgreich in HeLa-, A549- und U-2-OS-Zellen mit einer Vielzahl von Reagenzien getestet, die die Proteinsynthese hemmen, einschließlich Cycloheximid und Anisomycin. Die Anwendbarkeit dieser Sonden zur Überwachung der Proteindegradation wurde auch mit Inhibitoren des Proteasoms (MG132 und Bortezomib) und Autophagie-Blockern (Chloroquin) in HeLa-Zellen nachgewiesen.
Aufgrund der Unterschiede in der Click-iT™ Chemie zwischen dem Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit und Click-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488 HCS-Kit können diese Kits in Verbindung mit der räumlichen oder zeitlichen Bestimmung von Unterschieden in der Synthese neu entstandener Proteine verwendet werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeRot-Orange
NachweisverfahrenFluoreszenz
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluoreszenzmikroskop, Fluoreszenz-Imager
FormatFlüssig
MarkertypAlexa Fluor Farbstoffe
ProduktlinieAlexa Fluor, Click-iT
ProdukttypProteinsynthese-Assay-Kit
Menge25 Deckgläser oder zwei 96-Well-Platten
Labeling TargetProteine
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor 594
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
- Bei 2 ° bis 6 °C lagern
- PRODUKT NICHT EINFRIEREN
- Material vor langfristiger Lichteinwirkung schützen; darf kurzzeitig Licht ausgesetzt sein DMSO erforderlich.
Zitierungen und Referenzen (15)
Zitierungen und Referenzen
Abstract
Selective identification of newly synthesized proteins in mammalian cells using bioorthogonal noncanonical amino acid tagging (BONCAT).
Journal:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
PubMed ID:16769897
In both normal and pathological states, cells respond rapidly to environmental cues by synthesizing new proteins. The selective identification of a newly synthesized proteome has been hindered by the basic fact that all proteins, new and old, share the same pool of amino acids and thus are chemically indistinguishable. We
In situ visualization and dynamics of newly synthesized proteins in rat hippocampal neurons.
Journal:Nature neuroscience
PubMed ID:20543841
Protein translation has been implicated in different forms of synaptic plasticity, but direct in situ visualization of new proteins is limited to one or two proteins at a time. Here we describe a metabolic labeling approach based on incorporation of noncanonical amino acids into proteins followed by chemoselective fluorescence tagging
Two-color labeling of temporally defined protein populations in mammalian cells.
Journal:Bioorganic & medicinal chemistry letters
PubMed ID:18774715
The proteome undergoes complex changes in response to disease, drug treatment, and normal cellular signaling processes. Characterization of such changes requires methods for time-resolved protein identification and imaging. Here, we describe the application of two reactive methionine (Met) analogues, azidohomoalanine (Aha) and homopropargylglycine (Hpg), to label two protein populations in
Fluorescence visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells.
Journal:Angewandte Chemie (International ed. in English)
PubMed ID:17036290
Noncanonical amino acid tagging enables the selective fluorescent visualization of newly synthesized proteins in mammalian cells (see the picture). Susceptibility to tagging is determined by the spatial and temporal character of the protein synthesis, thus providing a complement to methods which identify relevant members of the proteome.
Spatial coupling of mTOR and autophagy augments secretory phenotypes.
Journal:Science (New York, N.Y.)
PubMed ID:21512002
Protein synthesis and autophagic degradation are regulated in an opposite manner by mammalian target of rapamycin (mTOR), whereas under certain conditions it would be beneficial if they occurred in unison to handle rapid protein turnover. We observed a distinct cellular compartment at the trans side of the Golgi apparatus, the