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Invitrogen™
Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 594 Protein Synthesis Assay Kit
Das Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit bietet eine schnelle, empfindliche und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Proteinsynthese mittelsWeitere Informationen
| Katalognummer | Menge |
|---|---|
| C10457 | 1 Kit |
Katalognummer C10457
Preis (EUR)
772,65
온라인 행사
920,00Ersparnis 147,35 (16%)
Each
Menge:
1 Kit
Preis (EUR)
772,65
온라인 행사
920,00Ersparnis 147,35 (16%)
Each
Das Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit bietet eine schnelle, empfindliche und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Proteinsynthese mittels Fluoreszenzmikroskopie oder High-Content-Bildgebung. In diesem Assay wird O-Propargyl-Puromycin (OPP) effizient in neu übersetzte Proteine in Methionin-haltigen Komplettmedien integriert und mit einem leuchtenden, photostabilen Alexa Fluor™ fluoreszierenden Farbstoff in einer schnellen, hochspezifischen und schonenden Klick-Reaktion markiert.
Zu den Merkmalen dieses Kits zählen:
• Kein Medienwechsel erfordert – Funktioniert in Methionin-haltigen Komplettmedien; kein Entfernen von Zellmedien notwendig
• Multiplex-fähig – Mit der Click-iT™ Plus Technologie werden das Signal vom GFP und die Bindung fluoreszenzkonjugierter Phalloidine beibehalten
• Nicht radioaktiv – Alternative zu herkömmlichen 35S-Methionin-Methoden
• Funktioniert in vivo – Veröffentlichte Ergebnisse zeigen In-vivo-Verwendung zum Nachweis der Translation von Proteinen
Das Kit enthält O-Propargyl-Puromycin (OPP), ein Alkyn-Analogon von Puromycin (auch separat erhältlich), sowie Alexa Fluor™ 594 Picolylazid und alle erforderlichen Reagenzien für die Klick-Reaktion. Das OPP wird kultivierten Zellen zugeführt und während der aktiven Proteinsynthese in Proteine integriert. Die Zugabe von Alexa Fluor™ 594 Picolylazid und den Klick-Reaktionsreagenzien führt zu einer chemoselektiven Ligation oder „Klick“-Reaktion zwischen dem Picolylazid-Farbstoff und dem OPP-Alkyn. Die modifizierten Proteine werden durch eine bildbasierte Analyse nachgewiesen.
Die Klick-Reaktion nutzt bioorthogonale (biologisch einzigartige) Anteile, die proliferierende Zellen fluoreszierend markieren und geringe Hintergründe sowie eine hohe Detektionsempfindlichkeit erzeugen. Aufgrund der schonenden Reaktionsbedingungen eignen sich Click-iT™ Plus Assays zur Erkennung von Proteintranslationsereignissen bei gleichzeitiger Erhaltung der Zellmorphologie, der Bindung von fluoreszierend-markiertem Phalloidin und des Fluoreszenzsignal von GFP.
Im Gegensatz zu 35S-Methionin, das in herkömmlichen Methoden verwendet wird, handelt es sich bei OPP um kein Aminosäure-Analogon. Daher kann es direkt zu Zellen in Komplettmedien hinzugefügt oder zur Bestimmung der Proteinsynthese in vivo verwendet werden.
Das Kit enthält alle Komponenten, die zur Kennzeichnung und Detektion des integrierten OPP in neu übersetzten Proteinen in Proben adhärenter Zellen erforderlich sind. Das Kit enthält ausreichend Reagenzien für die Markierung von 25 Deckgläsern von 18 mm × 18 mm Größe bei Verwendung von 1 ml Reaktionspuffer pro Test.
Zu den Merkmalen dieses Kits zählen:
• Kein Medienwechsel erfordert – Funktioniert in Methionin-haltigen Komplettmedien; kein Entfernen von Zellmedien notwendig
• Multiplex-fähig – Mit der Click-iT™ Plus Technologie werden das Signal vom GFP und die Bindung fluoreszenzkonjugierter Phalloidine beibehalten
• Nicht radioaktiv – Alternative zu herkömmlichen 35S-Methionin-Methoden
• Funktioniert in vivo – Veröffentlichte Ergebnisse zeigen In-vivo-Verwendung zum Nachweis der Translation von Proteinen
Das Kit enthält O-Propargyl-Puromycin (OPP), ein Alkyn-Analogon von Puromycin (auch separat erhältlich), sowie Alexa Fluor™ 594 Picolylazid und alle erforderlichen Reagenzien für die Klick-Reaktion. Das OPP wird kultivierten Zellen zugeführt und während der aktiven Proteinsynthese in Proteine integriert. Die Zugabe von Alexa Fluor™ 594 Picolylazid und den Klick-Reaktionsreagenzien führt zu einer chemoselektiven Ligation oder „Klick“-Reaktion zwischen dem Picolylazid-Farbstoff und dem OPP-Alkyn. Die modifizierten Proteine werden durch eine bildbasierte Analyse nachgewiesen.
Die Klick-Reaktion nutzt bioorthogonale (biologisch einzigartige) Anteile, die proliferierende Zellen fluoreszierend markieren und geringe Hintergründe sowie eine hohe Detektionsempfindlichkeit erzeugen. Aufgrund der schonenden Reaktionsbedingungen eignen sich Click-iT™ Plus Assays zur Erkennung von Proteintranslationsereignissen bei gleichzeitiger Erhaltung der Zellmorphologie, der Bindung von fluoreszierend-markiertem Phalloidin und des Fluoreszenzsignal von GFP.
Im Gegensatz zu 35S-Methionin, das in herkömmlichen Methoden verwendet wird, handelt es sich bei OPP um kein Aminosäure-Analogon. Daher kann es direkt zu Zellen in Komplettmedien hinzugefügt oder zur Bestimmung der Proteinsynthese in vivo verwendet werden.
Das Kit enthält alle Komponenten, die zur Kennzeichnung und Detektion des integrierten OPP in neu übersetzten Proteinen in Proben adhärenter Zellen erforderlich sind. Das Kit enthält ausreichend Reagenzien für die Markierung von 25 Deckgläsern von 18 mm × 18 mm Größe bei Verwendung von 1 ml Reaktionspuffer pro Test.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
Zur Verwendung mit (Anwendung)Nachweis der Proteinsynthese mittels Fluoreszenzmikroskopie oder High-Content-Bildgebung
Umweltfreundliche EigenschaftenWeniger gefährlich
ProduktlinieClick-iT
ProdukttypClick-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 594 Proteinsynthese-Assay-Kit
Menge1 Kit
ReagenztypKennzeichnungsreagenz für naszide Proteine
Marker oder FarbstoffAlexa Fluor 594
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Dieses Kit enthält: Click-iT™ OPP-Reagenz, Alexa Fluor™ Picolylazid-Farbstoff, Click-iT™ OPP-Reaktionspuffer, Kupferschutzmittel, Click-iT™ Reaktionspuffer-Additiv, Click-iT™ Puffer zur Reaktionssteigerung und NuclearMask™ blauer Farbstoff. Bei 2 bis 8 °C lagern. Trocken und vor Licht geschützt lagern.
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?
Zitierungen und Referenzen (8)
Zitierungen und Referenzen
Abstract
Transcriptome analysis of a CHO cell line expressing a recombinant therapeutic protein treated with inducers of protein expression.
Journal:
PubMed ID:26325199
'The search for specific productivity (qP) determinants in Chinese hamster ovary (CHO) cells has been the focus of the biopharmaceutical cell line engineering efforts aimed at creating '
Suppression of the GTPase-activating protein RGS10 increases Rheb-GTP and mTOR signaling in ovarian cancer cells.
Journal:
PubMed ID:26319900
The regulator of G protein signaling 10 (RGS10) protein is a GTPase activating protein that accelerates the hydrolysis of GTP and therefore canonically inactivates G proteins, ultimately terminating signaling. Rheb is a small GTPase protein that shuttles between its GDP- and GTP-bound forms to activate mTOR. Since RGS10 suppression augments
Nucleolar Enrichment of Brain Proteins with Critical Roles in Human Neurodevelopment.
Journal:Mol Cell Proteomics
PubMed ID:27053602
'To study nucleolar involvement in brain development, the nuclear and nucleolar proteomes from the rat cerebral cortex at postnatal day 7 were analyzed using LC-MS/iTRAQ methodology. Data of the analysis are available via ProteomeXchange with identifier PXD002188. Among 504 candidate nucleolar proteins, the overrepresented gene ontology terms included such cellular
The VHL short variant involves in protein quality control.
Journal:Gene
PubMed ID:27196060
'The von Hippel-Lindau (VHL) is the most important and frequently mutated gene in human clear cell renal cell carcinoma (ccRCC). In contrast to its long counterpart, the internal translational variant of VHL protein (VHLs) is evolutionarily conserved. Herein we present evidence that VHLs associates with ribosome complex via interaction with
Requirement of Neuronal Ribosome Synthesis for Growth and Maintenance of the Dendritic Tree.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:26757818
'The nucleolus serves as a principal site of ribosome biogenesis but is also implicated in various non-ribosomal functions, including negative regulation of the pro-apoptotic transcription factor p53. Although disruption of the nucleolus may trigger the p53-dependent neuronal death, neurotoxic consequences of a selective impairment of ribosome production are unclear. Here,