Dextran, Tetramethylrhodamine, 10,000 MW, Lysine Fixable (fluoro-Ruby)
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Dextran, Tetramethylrhodamine, 10,000 MW, Lysine Fixable (fluoro-Ruby)

Markierte Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die häufig in mikroskopischen Studien zur Überwachung der Zellteilung, zum Verfolgen der Bewegung von lebendenWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
D181725 mg
Katalognummer D1817
Preis (EUR)
560,00
Each
Menge:
25 mg
Preis (EUR)
560,00
Each
Markierte Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die häufig in mikroskopischen Studien zur Überwachung der Zellteilung, zum Verfolgen der Bewegung von lebenden Zellen und zur Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen Matrix verwendet werden. Markiertes Dextran wird häufig per Mikroinjektion in die Zellen eingebracht.

Benötigen Sie ein anderes Emissionsspektrum oder ein längeres Tracking? Hier finden Sie unsere übrigen Tracking-Produkte für Säugetier-Zellkulturen.

Dextran-Spezifikationen:

Markierung (Anregung/Emission): Tetramethylrhodamin (555/580)
Größe: 10.000 MW
Ladung: Anionisch
Fixierbar: Mit Lysin fixierbar

Hohe Fertigungsstandards für Molecular Probes™ Dextrans
Wir bieten über 50 fluoreszierende und biotinylierte Dextran-Konjugate in mehreren Molekulargewichtsbereichen an. Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die sich durch ein mittleres bis hohes Molekulargewicht, eine gute Wasserlöslichkeit und geringe Toxizität auszeichnen. Zusätzlich weisen sie im Allgemeinen eine niedrige Immunogenität auf. Dextrane sind biologisch inert aufgrund ihrer ungewöhnlichen Poly-(α-D-1,6-Glucose)-Bindungen, die eine Spaltung durch die meisten endogenen zellulären Glykosidasen verhindern.

In den meisten Fällen sind die fluoreszierenden™ In den meisten Fällen leuchten fluoreszierende Molecular Probes Dextrane viel heller und haben eine höhere negative Ladung als Dextrane anderer Lieferanten. Darüber hinaus verwenden wir strikte Verfahren zur Entfernung von so viel unkonjugiertem Farbstoff wie praktisch möglich und testen unsere Dextran-Konjugate anschließend mittels Dünnschichtchromatographie, um sicherzustellen, dass keine Kontaminanten mit niedrigem Molekulargewicht vorhanden sind.

Eine breite Auswahl an Substituenten und Molekulargewichten
Molecular Probes™ Dextrane sind mit Biotin oder einer Vielzahl von Fluorophoren konjugiert, darunter sieben unserer Alexa Fluor™ Farbstoffe (Molecular Probes Dextran-Konjugate – Tabelle 14.4), und in folgenden nominalen Molekulargewichten (MW) erhältlich: 3.000; 10.000; 40.000; 70.000; 500.000 und 2.000.000 Dalton.

Dextran Nettoladung und Fixierbarkeit
Wir verwenden die Succinimidyl-Kopplung unserer Farbstoffe an das Dextran-Molekül. Dies führt in den meisten Fällen zu einem neutralen oder anionischen Dextran. Die bei der Herstellung der Rhodamin Green™ und Alexa Fluor 488 Dextrane verwendete Reaktion ergibt ein neutrales, anionisches oder kationisches Endprodukt. Die Alexa Fluor, Cascade Blue, Lucifer Yellow, Fluorescein und Oregon Green Dextrane sind an sich anionisch, während die meisten Dextrane, die mit den zwitterionischen Farbstoffen Rhodamin B, Tetramethylrhodamin und Texas Red™ markiert werden, im Wesentlichen neutral sind. Um mehr hoch anionische Dextrane zu produzieren, haben wir ein geschütztes Verfahren entwickelt, um an den Dextranträger negativ geladene Gruppen hinzuzufügen; diese Produkte werden als “polyanionische” Dextrane bezeichnet.

Bei einigen Anwendungen muss die Dextran-Markierungssubstanz vor der Analyse mit Formaldehyd oder Glutaraldehyd behandelt werden. Für diese Anwendungen bieten wir “Lysin-fixierbare” Versionen der meisten unserer Dextran-Konjugate mit Fluorophoren oder Biotin. Diese Dextrane besitzen kovalent gebundene Lysin-Reste, die die Bindung der Dextran-Tracer an umgebende Biomoleküle durch eine Aldehyd-vermittelte Fixierung mit umliegenden Biomolekülen und hierdurch den nachfolgenden Nachweis durch immunhistochemische und ultrastrukturelle Verfahren ermöglicht. Wir haben auch gezeigt, dass alle unsere 10.000 MW Alexa Fluor Dextran-Konjugate mit aldehydbasierten Fixiermitteln fixierbar sind.

Hauptanwendungen für markierte Dextrane
In der Fachliteratur wird eine Vielzahl von Anwendungsfällen für markierte Dextrane beschrieben. Zu den häufigsten Anwendungen gehören:

Neuronales Tracing (anterograd und retrograd) in lebenden Zellen
Zelllinienverfolgung in lebenden Zellen
Neuroanatomisches Tracing
Untersuchung interzellulärer Kommunikationswege (z. B von Gap Junctions, während der Wundheilung und bei der embryonalen Entwicklung)
Untersuchung der vaskulären Permeabilität und der Integrität der Blut–Hirn-Schranke
Verfolgung von Endozytose
Überwachung der Azidifikation (einige Dextran–Farbstoffkonjugate sind pH-empfindlich)
Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen Matrix

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Marker oder FarbstoffKlassische Farbstoffe
ProdukttypDextran
Menge25 mg
VersandbedingungRaumtemperatur
Excitation/Emission555/580 nm
ProduktlinieInvitrogen
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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Is there a way to label individual neurons without microinjecting?

The solid and crystalline forms of DiI and other related dyes (Cat. Nos. D282, D3911, D7757, and D12731) are sometimes placed in contact with a specific neuron where it will travel down the cell by lateral diffusion via the membrane. Alternatively, our NeuroTrace Tissue Labeling Paste can be scooped onto a needle and placed onto particular neurons.

Please see the information below for a comparison of our neuronal cell labeling methods:
Product:Method of labeling: Labeling intensity: Features
Neuron-specific antibodies: Primary antibodies directed to proteins expressed in neuronal cells: Proportional to the amount of protein expressed: Provides the only neuronal specific labeling method
Lipophilic neuronal ytracers: Hydrophobic dyes are incorporated into lipids in the cell: This labeling method provides the most intense labeling becuase of the abundant amount of lipids: Allows tracing of neurons throughout the sample
Membrane potential indicators: Dyes are loaded into live cells in aqueous buffers: Depends on either changes in structures due to the electrical field they are in, or dye influx due to depolarization: Changes in membrane potential play a central role in physiological processes, including nerve-impulse propagation, muscle contraction, and cell signaling

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What products do you have for neuronal tracing?

Please check out this web page (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing.html) for details.

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Zitierungen und Referenzen (114)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Topographical organization in the nucleus accumbens of afferents from the basolateral amygdala and efferents to the lateral hypothalamus.
Authors:Kirouac GJ, Ganguly PK
Journal:Neuroscience
PubMed ID:7675191
The basolateral region of the amygdala and the lateral hypothalamic area are involved in cardiovascular regulation. The aim of the present investigation was to determine if the terminal field of afferent projections from the basolateral nucleus of the amygdala to the nucleus accumbens overlap with the origin of the efferent ... More
Improved retrograde axonal transport and subsequent visualization of tetramethylrhodamine (TMR) -dextran amine by means of an acidic injection vehicle and antibodies against TMR.
Authors:Kaneko T, Saeki K, Lee T, Mizuno N
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:8740593
'We studied the ability of various dextran amines (DA) to retrogradely label cortical neurons to the full extent of their dendritic configurations. Corticothalamic neurons were labeled by pressure injection of DA into the ventrobasal thalamic nuclei of the rat brain. Of fluorescein-, Texas Red-, Cascade Blue- and tetramethylrhodamine (TMR)-DAs of ... More
Time-lapse analysis and mathematical characterization elucidate novel mechanisms underlying muscle morphogenesis.
Authors:Snow CJ, Goody M, Kelly MW, Oster EC, Jones R, Khalil A, Henry CA,
Journal:PLoS Genet
PubMed ID:18833302
'Skeletal muscle morphogenesis transforms short muscle precursor cells into long, multinucleate myotubes that anchor to tendons via the myotendinous junction (MTJ). In vertebrates, a great deal is known about muscle specification as well as how somitic cells, as a cohort, generate the early myotome. However, the cellular mechanisms that generate ... More
Impaired trafficking of connexins in androgen-independent human prostate cancer cell lines and its mitigation by alpha-catenin.
Authors:Govindarajan R, Zhao S, Song XH, Guo RJ, Wheelock M, Johnson KR, Mehta PP
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12205082
'Gap junctions, composed of connexins, provide a pathway of direct intercellular communication for the diffusion of small molecules between cells. Evidence suggests that connexins act as tumor suppressors. We showed previously that expression of connexin-43 and connexin-32 in an indolent prostate cancer cell line, LNCaP, resulted in gap junction formation ... More
Retrograde transport of sodium selenite and intracellular injection of micro-ruby: a combined method to describe the morphology of zinc-rich neurones.
Authors:Miró-Bernié N, Sancho-Bielsa FJ, López-García C, Pérez-Clausell J
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:12906949
'Zinc is found in synaptic vesicles in a large number of glutamatergic systems. Its involvement in neurotransmission and neurological disorders has been suggested. There are methods for tracing these circuits, but they do not fill the dendritic tree. In this study, extracellular selenite injections in vivo were combined with intracellular ... More