Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)
Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)
Invitrogen™

Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)

Markierte Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die häufig in mikroskopischen Studien zur Überwachung der Zellteilung, zum Verfolgen der Bewegung von lebendenWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
D7162
auch als D-7162 bezeichnet
5 mg
Katalognummer D7162
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Preis (EUR)
748,00
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Markierte Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die häufig in mikroskopischen Studien zur Überwachung der Zellteilung, zum Verfolgen der Bewegung von lebenden Zellen und zur Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen Matrix verwendet werden. Markiertes Dextran wird häufig per Mikroinjektion in die Zellen eingebracht.

Benötigen Sie ein anderes Emissionsspektrum oder ein längeres Tracking? Hier finden Sie unsere übrigen Tracking-Produkte für Säugetier-Zellkulturen.

Dextran-Spezifikationen:

Markierung (Anregung/Emission): Tetramethylrhodamin & Biotin (555/580)
Größe: 3.000 MW
Ladung: Anionisch
Fixierbar: Mit Lysin fixierbar

Hohe Fertigungsstandards für Molecular Probes™ Dextrans
Wir bieten über 50 fluoreszierende und biotinylierte Dextran-Konjugate in mehreren Molekulargewichtsbereichen an. Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die sich durch ein mittleres bis hohes Molekulargewicht, eine gute Wasserlöslichkeit und geringe Toxizität auszeichnen. Zusätzlich weisen sie im Allgemeinen eine niedrige Immunogenität auf. Dextrane sind biologisch inert aufgrund ihrer ungewöhnlichen Poly-(α-D-1,6-Glucose)-Bindungen, die eine Spaltung durch die meisten endogenen zellulären Glykosidasen verhindern.

In den meisten Fällen sind die fluoreszierenden™ In den meisten Fällen leuchten fluoreszierende Molecular Probes Dextrane viel heller und haben eine höhere negative Ladung als Dextrane anderer Lieferanten. Darüber hinaus verwenden wir strikte Verfahren zur Entfernung von so viel unkonjugiertem Farbstoff wie praktisch möglich und testen unsere Dextran-Konjugate anschließend mittels Dünnschichtchromatographie, um sicherzustellen, dass keine Kontaminanten mit niedrigem Molekulargewicht vorhanden sind.

Eine breite Auswahl an Substituenten und Molekulargewichten
Molecular Probes™ Dextrane sind mit Biotin oder einer Vielzahl von Fluorophoren konjugiert, darunter sieben unserer Alexa Fluor™ Farbstoffe (Molecular Probes Dextran-Konjugate – Tabelle 14.4), und in folgenden nominalen Molekulargewichten (MW) erhältlich: 3.000; 10.000; 40.000; 70.000; 500.000 und 2.000.000 Dalton.

Dextran Nettoladung und Fixierbarkeit
Wir verwenden die Succinimidyl-Kopplung unserer Farbstoffe an das Dextran-Molekül. Dies führt in den meisten Fällen zu einem neutralen oder anionischen Dextran. Die bei der Herstellung der Rhodamin Green™ und Alexa Fluor 488 Dextrane verwendete Reaktion ergibt ein neutrales, anionisches oder kationisches Endprodukt. Die Alexa Fluor, Cascade Blue, Lucifer Yellow, Fluorescein und Oregon Green Dextrane sind an sich anionisch, während die meisten Dextrane, die mit den zwitterionischen Farbstoffen Rhodamin B, Tetramethylrhodamin und Texas Red™ markiert werden, im Wesentlichen neutral sind. Um mehr hoch anionische Dextrane zu produzieren, haben wir ein geschütztes Verfahren entwickelt, um an den Dextranträger negativ geladene Gruppen hinzuzufügen; diese Produkte werden als “polyanionische” Dextrane bezeichnet.

Bei einigen Anwendungen muss die Dextran-Markierungssubstanz vor der Analyse mit Formaldehyd oder Glutaraldehyd behandelt werden. Für diese Anwendungen bieten wir “Lysin-fixierbare” Versionen der meisten unserer Dextran-Konjugate mit Fluorophoren oder Biotin. Diese Dextrane besitzen kovalent gebundene Lysin-Reste, die die Bindung der Dextran-Tracer an umgebende Biomoleküle durch eine Aldehyd-vermittelte Fixierung mit umliegenden Biomolekülen und hierdurch den nachfolgenden Nachweis durch immunhistochemische und ultrastrukturelle Verfahren ermöglicht. Wir haben auch gezeigt, dass alle unsere 10.000 MW Alexa Fluor Dextran-Konjugate mit aldehydbasierten Fixiermitteln fixierbar sind.

Hauptanwendungen für markierte Dextrane
In der Fachliteratur wird eine Vielzahl von Anwendungsfällen für markierte Dextrane beschrieben. Zu den häufigsten Anwendungen gehören:

Neuronales Tracing (anterograd und retrograd) in lebenden Zellen
Zelllinienverfolgung in lebenden Zellen
Neuroanatomisches Tracing
Untersuchung interzellulärer Kommunikationswege (z. B von Gap Junctions, während der Wundheilung und bei der embryonalen Entwicklung)
Untersuchung der vaskulären Permeabilität und der Integrität der Blut–Hirn-Schranke
Verfolgung von Endozytose
Überwachung der Azidifikation (einige Dextran–Farbstoffkonjugate sind pH-empfindlich)
Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen Matrix

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Marker oder FarbstoffKlassische Farbstoffe
ProdukttypDextran
Menge5 mg
VersandbedingungRaumtemperatur
Excitation/Emission555/580 nm.
ProduktlinieInvitrogen
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Bei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

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I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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Zitierungen und Referenzen (13)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Retrograde transport of sodium selenite and intracellular injection of micro-ruby: a combined method to describe the morphology of zinc-rich neurones.
Authors:Miró-Bernié N, Sancho-Bielsa FJ, López-García C, Pérez-Clausell J
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:12906949
'Zinc is found in synaptic vesicles in a large number of glutamatergic systems. Its involvement in neurotransmission and neurological disorders has been suggested. There are methods for tracing these circuits, but they do not fill the dendritic tree. In this study, extracellular selenite injections in vivo were combined with intracellular ... More
Fireworks in the primate retina: in vitro photodynamics reveals diverse LGN-projecting ganglion cell types.
Authors:Dacey DM, Peterson BB, Robinson FR, Gamlin PD,
Journal:Neuron
PubMed ID:12526769
Diverse cell types and parallel pathways are characteristic of the vertebrate nervous system, yet it remains a challenge to define the basic components of most neural structures. We describe a process termed retrograde photodynamics that allowed us to rapidly make the link between morphology, physiology, and connectivity for ganglion cells ... More
Zfp312 is required for subcortical axonal projections and dendritic morphology of deep-layer pyramidal neurons of the cerebral cortex.
Authors:Chen JG, Rasin MR, Kwan KY, Sestan N
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16314561
Pyramidal neurons of the cerebral cortex display marked layer- and subtype-specific differences in their axonal projections and dendritic morphologies. Here we show that transcription factor Zfp312 is selectively expressed by layer V and VI subcortical projection pyramidal neurons and their progenitor cells. Knocking down Zfp312 with small interfering RNAs dramatically ... More
Blocking Opioid Receptors in a Songbird Cortical Region Modulates the Acoustic Features and Levels of Female-Directed Singing.
Authors:
Journal:Front Neurosci
PubMed ID:33071736
Transcriptomics and neuroanatomy of the clonal raider ant implicate an expanded clade of odorant receptors in chemical communication.
Authors:
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:27911792