Thermo Scientific RNase A, DNase- und Protease-frei ist eine Endoribonuklease, die speziell einzelsträngige RNA bei C- und U-Rückständen abbaut.

Spaltet die Phosphodiesterbindung zwischen der 5'-Ribose eines Nukleotids und der Phosphatgruppe, die an die 3'-Ribose eines angrenzenden Pyrimidin-Nukleotids gebunden ist. Das daraus resultierende 2'-, 3'-zyklische Phosphat wird mit dem entsprechenden 3'-Nukleosid-Phosphat hydrolysiert.

Highlights

• RNase A ist frei von DNase-Aktivität. Vor der Verwendung ist keine Erwärmung nötig.

Anwendungen

• Plasmid- und genomische DNA-Präparation
• Entfernung von RNA aus rekombinanten Proteinpräparaten
• Ribonuklease-Schutzassays. Verwendung in Verbindung mit RNase T1
• Zuordnung von Einzelbasen-Mutationen in DNA oder RNA

Hinweise

Die empfohlene Konzentration von RNase A ist je nach Anwendung 1 bis 100 µg/ml. Das Enzym ist unter einer Vielzahl von Reaktionsbedingungen aktiv. Bei niedrigen Salzkonzentrationen (0 bis 100 mM NaCl) spaltet RNase A Einzel- oder Doppelstrang-RNA sowie den RNA-Strang in RNA-DNA-Hybriden. Bei NaCl-Konzentrationen von 0,3 M oder höher spaltet RNase A jedoch spezifisch Einzelstrang-RNA.