Endonuclease IV, E.coli (2 U/μL)

Thermo Scientific Endonuclease IV (Endo IV) erkennt apurinische bzw. apyrimidinische (AP) Stellen in dsDNA, spaltet die Phosphodiester-Bindung 5' zur Läsion auf und bildet dabei eine Hydroxyl-Gruppe am 3-Terminus (siehe Abbildung 1 in Unterstützungsdaten). Das Enzym kann auch als 3'-Diesterase fungieren, die 3'-Phosphoglycolat oder 3'-Phosphat von den beschädigten Enden der dsDNA freisetzt. Endo IV weist auch eine 3‘→5'-Exonuklease-Aktivität auf. Sie reagiert auf Substraten sensitiv auf Ionenstärke, Metallionen, EDTA und reduzierende Bedingungen. Substrate mit 3'-zurückgesetzten Enden sind bevorzugte Substrate für die 3'→5'-Exonukleaseaktivität.

Das Enzym ist für Mg²⁺ nicht erforderlich und bei Vorhandensein von EDTA in moderaten Konzentrationen vollständig aktiv.

Anwendungen

• Untersuchungen von DNA-Schäden und -Reparatur
• Elektrophorese einzelner Zellen (Kometen-Assay)
• Antitumor-Arzneimittelforschung
• DNA-Strukturforschung
• SNP-Analyse