5'			C  D	A	C ↓D	G	T	G		3'
3'			G	T	G ↑	C  D	A	C  D		5'

Das Thermo Scientific Restriktionsenzym Eco72I (PmlI) erkennt CAC^GTG-Stellen und schneidet am besten bei 37°C im Tango-Puffer. Unter Reaktionsbedingungen für Restriktionsenzym finden Sie eine Tabelle mit Angaben zu Enzymaktivität, Bedingungen für doppelte Verdauung und Hitzeinaktivierung für diese und andere Restriktionsenzyme. Hinweis: Auch als FastDigest Enzym für schnelle DNA-Verdauung erhältlich. Isoschizomere: AcvI, BbrPI, PmaCI, PmlI, PspCI

Herkömmliche Thermo Scientific Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Zur Gewährleistung gleich bleibender Leistungsfähigkeit enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Präparaten enthalten sein können.

Eigenschaften

• überragende Qualität — strenge Qualitätskontrolle und branchenführender Fertigungsprozess
• praktisches, farbcodiertes Fünf-Puffer-System
• mit universellem Tango Puffer für Doppelverdauungen
• BSA in Reaktionspuffern vorgemischt
• große Auswahl an Restriktionsendonuklease-Spezifikationen

Anwendungen

• molekulare Klonierung
• Kartierung von Restriktionsstellen
• Genotypisierung
• Southern Blotting
• Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus (RFLP)
• SNP

Hinweis: Eco57I benötigt für seine Aktivität nur Mg2+, wird aber von S-Adenosylmethionin angeregt. 0,01 mM S-Adenosylmethionin führt zu einer mehr als 100-fachen Zunahme der Eco57I-Aktivität. Dennoch ist die vollständige Spaltung einiger Substrate mit Eco57I schwierig zu erreichen. Die Eco57I-Konzentration wird durch das maximale Spaltungsniveau bestimmt, das erreicht wird, wenn keine Veränderung des Fragmentierungsmusters mit einer weiteren Enzymsteigerung beobachtet wird. Eine geringe Salzkonzentration, eine hohe Glycerin-Konzentration (> 5 %), ein pH-Wert von > 8,0 oder ein hoher Enzymüberschuss können zu Star-Aktivität führen. Nach dem Verdau kann Eco57I an die gespaltene DNA gebunden bleiben. Dies kann eine DNA-Bandenverlagerung während der Elektrophorese zur Folge haben. Verwenden Sie zur Vermeidung atypischer DNA-Bandenmuster die 6X DNA Ladepuffer und SDS-Lösung für die Probenvorbereitung, oder erhitzen Sie vor der Elektrophorese die verdaute DNA in Gegenwart von SDS. Angaben zur Methylierungssensitivität finden Sie in den Produktspezifikationen.