5'

G

G

C

C

N

N

N

N ↓

N

G

G

C

C

3'

3'

C

C

G

G

N ↑

N

N

N

N

C

C

G

G

5'

Das Thermo Scientific Restriktionsenzym SfiI erkennt GGCCNNNN^NGGCC-Stellen und schneidet am besten bei 50°C im G-Puffer. Unter Reaktionsbedingungen für Restriktionsenzym finden Sie eine Tabelle mit Angaben zu Enzymaktivität, Bedingungen für doppelte Verdauung und Hitzeinaktivierung für diese und andere Restriktionsenzyme. Hinweis: Auch als FastDigest Enzym für schnelle DNA-Verdauung erhältlich.

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen von Thermo Scientific sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Zur Gewährleistung gleichbleibender Leistungsfähigkeit enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Präparaten enthalten sein können.

Eigenschaften

• überragende Qualität — strenge Qualitätskontrolle und branchenführender Fertigungsprozess
• praktisches, farbcodiertes Fünf-Puffer-System
• mit universellem Tango Puffer für Doppelverdauungen
• BSA in Reaktionspuffern vorgemischt
• große Auswahl an Restriktionsendonuklease-Spezifikationen

Anwendungen

• molekulare Klonierung
• Kartierung von Restriktionsstellen
• Genotypisierung
• Southern Blotting
• Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus (RFLP)
• SNP

Hinweis: Analysiert unter Verwendung von pUC19 DNA mit Einsatz, der zwei SfiI-Stellen aus Adenovirus-2 DNA enthält. Inkubation bei 37°C ergibt 10 % Aktivität. SfiI-Spaltung wird durch überlappende dcm-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam/dcm-negativen Stamm wie z. B. GM2163. Zur Spaltung von SfiI sind mindestens zwei Kopien seiner Erkennungssequenz erforderlich. Die beiden Stellen können entweder auf dem gleichen DNA-Molekül oder auf verschiedenen DNA-Molekülen sein. (L. M. Wertzell et al., J. Mol. Biol., 248, 581-595, 1995.) Deshalb kann auch ein Oligonukleotid, das eine SfiI-Erkennungsstelle beherbergt, ergänzt werden. Angaben zur Methylierungssensitivität finden Sie in den Produktspezifikationen.