Fluoreszenz-Proteinmarkierungskits

• Fluoreszierend bis zu 1 mg Protein pro Reaktion (drei Reaktionen pro Kit)
• Etikett 0,5 bis 3 mg pro Reaktion mit DSB-X Biotin Protein Labeling Kit (fünf Reaktionen pro Kit)
• Markierte Proteine, die in 90 Minuten verwendet werden können (ca. 15 Minuten Arbeitsaufwand)
• Schnelle Reinigung von Proteinen durch schnelles Entfernen ungebundener Farbstoffe mit vorgepackten Spin-Säulen für eine über 85%ige Rückgewinnung
• Enthält detaillierte Anweisungen zur Bestimmung des Grads der Markierung (DOL)

Jedes Kit zur Proteinmarkierung enthält alles, was Sie für 3-5 separate Markierungsreaktionen und zur Reinigung der resultierenden Konjugate benötigen. Der reaktive Farbstoff hat entweder einen Succinimidyll-Ester (SE) oder einen Tetrafluorophenyl-Ester-Anteil (TFP), der effizient mit primären Aminen von Proteinen reagiert und effizient mit primären Aminen von Proteinen reagiert und stabile Farbstoff-Protein-Konjugate bildet. Jedes der im Kit enthaltenen Fläschchen mit Reaktivfarbstoff reicht für die Markierung von 1 mg verschiedener gereinigter Proteine aus, darunter Wachstumsfaktoren, Zytokine, Nanokörper, Enzyme, Zelladhäsionsmoleküle und Antikörper.

Die direkte Markierung mit Fluorophoren ermöglicht die Verwendung mehrerer primärer Antikörper desselben Isotyps (die von derselben Spezies stammen) im selben Experiment. Stabilisierende Proteine wie BSA müssen vor der Markierung aus der Probe entfernt werden

Die verschiedenen Proteinmarkierungskits
• Blau fluoreszierendes Alexa Fluor 350 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 346/442 nm
• Grün fluoreszierendes Alexa Fluor 488 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 494/519 nm; angeregt mit einer 488 nm Argonlaserlinie und nachgewiesen unter FITC/Cy2-Standardfiltern
• Gelb fluoreszierendes Alexa Fluor 532 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 530/554 nm; angeregt mit einer 532 nm Nd:YAG-Laserlinie und nachgewiesen unter Rhodamin 6G-Standardfiltern
• Orange fluoreszierendes Alexa Fluor 546 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 554/570 nm; angeregt mit einer 543 nm He-Ne-Laserlinie und nachgewiesen unter TRITC/Cy3-Standardfiltern
• Orange fluoreszierendes Alexa Fluor 555 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 555/565 nm; angeregt mit einer 543 nm He-Ne-Laserlinie und nachgeweisen unter TRITC/Cy3-Standardfiltern
• Orange-rot-fluoreszierendes AlexFluor 568 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 577/603 nm; angeregt mit einer 568 nm Kr-Laserlinie und nachgewiesen unter Rhodamin Red/Cy3.5-Standardfiltern
• Rot fluoreszierendes Alexa Fluor 594 – Anregungs- und Emissionmaxima von 590/617 nm; angeregt mit einer 594 nm Kr- oder He-Ne-Laserlinie und nachgewiesen unter Texas Red Standardfiltern
• Tiefrot fluoreszierendes Alexa Fluor 633 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 632/647 nm
• Tiefrot fluoreszierendes Alexa Fluor 647 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 650/668 nm; amgeregt mit einer 633 oder 635 nm Kr- oder He-Ne-Laserlinie und nachgewiesen unter APC/Cy5-Standardfiltern erkannt.
• Tiefrot fluoreszierendes Alexa Fluor 660 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 663/690 nm
• Nah-IR fluoreszierendes Alexa Fluor 680 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 680/700 nm
• Grün fluoreszierendes Fluoreszein-EX - Anregungs- und Emissionsmaxima von 494/518 nm
• Oregon Green 488 – Anregungs- und Emissionsmaxima von 496/524 nm
• Pacific Blue – ein durch violettes Licht anregbarer Farbstoff mit einem Anregungs- und einem Emissionsmaxima von 410/455 nm
• Texas Red-X – Anregungs- und Emissionsmaxima von 595/615 nm
• DSB-X Biotin – Konjugate werden reversibel an biotinbindende Proteine wie Streptavidin oder Avidin gebunden. Die Konzentration (mg/ml) der DSB-X-Biotin-markierten Antikörper-Vorbereitung kann durch Messung der Absorption der Dialysatprobe bei 280 nm bestimmt werden. Dieser Wert wird durch 1,3 oder 1,4 geteilt, wenn er in einer Lösung in einer Küvette mit einer 1 cm Weglänge gemessen wird. DSB-X Biotin absorbiert bei 280 nm nicht signifikant.

Für die Markierung kleinerer Mengen von Antikörpern (∼100 μg) empfehlen wir unsere Antikörpermarkierungskits. Nähere Informationen, Protokolle, Molekulargewichte und Grad der Markierung für jeden Farbstoff sind in der Gebrauchsanweisung des Proteinmarkierungskits zu finden.