Phusion High-Fidelity PCR Master Mix mit GC-Puffer
Phusion High-Fidelity PCR Master Mix mit GC-Puffer
Thermo Scientific™

Phusion High-Fidelity PCR Master Mix mit GC-Puffer

Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als TaqWeitere Informationen
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KatalognummerEnthältAnzahl Reaktionen
F532SGC Buffer100 Reaktionen
F532LGC Buffer500 Reaktionen
F531LHF Buffer500 Reaktionen
F531SHF Buffer100 Reaktionen
Katalognummer F532S
Preis (EUR)
202,65
Online Exclusive
224,00
Ersparnis 21,35 (10%)
Each
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Enthält:
GC Buffer
Anzahl Reaktionen:
100 Reaktionen
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Preis (EUR)
202,65
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Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als Taq und einer 6 Mal niedrigeren Fehlerrate als Pfu ist Phusion High-Fidelity DNA-Polymerase eine ausgezeichnete Wahl für Klonierungen und andere Anwendungen, bei denen eine hohe Genauigkeit ausschlaggebend ist. Die Phusion DNA-Polymerasen bieten eine zuverlässige Leistung mit kurzen Protokollzeiten, auch in Gegenwart von PCR-Inhibitoren, und erzeugen höhere Ausbeuten mit geringeren Enzymmengen als andere DNA-Polymerasen.

Phusion High-Fidelity PCR Master Mix ist ein praktisches 2X-Gemisch aus Phusion DNA-Polymerase, Nukleotiden und optimiertem Reaktionspuffer einschließlich MgCl2. Zwei Master-Mix-Rezepturen sind verfügbar: mit HF-Puffer (F-531S und F-531L) oder mit GC-Puffer (F-532S und F-532L). Die Fehlerrate der Phusion DNA-Polymerase in HF-Puffer (4,4 × 10-7) ist geringer als in GC-Puffer (9,5 × 10-7). Master Mix mit HF-Puffer sollte deshalb standardmäßig als Master-Mix für High-Fidelity-Amplifikationen eingesetzt werden. An schwierigen oder langen Templates, wie GC-angereicherten, bzw. Templates mit komplexen sekundären Strukturen, kann der GC-Puffer die Leistungsfähigkeit von Phusion DNA-Polymerase verbessern.

Besondere Merkmale

• Hohe Wiedergabetreue (25X Taq)
• Schnelle PCR dank kurzer Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Robuste Leistung, minimale Optimierung erforderlich

Anwendungen

• Amplifikation schwieriger (GC-reicher) Templates
• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
• Mutagenese
• PCR mit hohem Durchsatz

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.

Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den in der Produkteinlage angegebenen Patenten für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produkts für eigene interne Forschungsanwendungen≈ des Käufers. Darüber hinaus werden keinerlei weitere Patentrechte übertragen, weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Specifications
Wiedergabetreue (vs. Taq)25X
Hot-StartNein
EnthältGC Buffer
Anzahl Reaktionen100 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePhusion High-Fidelity DNA-Polymerase
ProdukttypHigh-Fidelity PCR Master Mix
Menge100 reactions
ReaktionsformatSuperMix oder Master Mix
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Konzentration2X
Zur Verwendung mit (Anwendung)Standard-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 2 x 1,25 ml Phusion Master Mix mit GC-Puffer (2X) (liefert 1,5 mM MgCl2 in Endreaktion)
• 1 x 500 μl 100 % DMSO

Bei -20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.