Phusion™ Hot Start II DNA Polymerases (2 U/μL)
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Phusion™ Hot Start II DNA Polymerases (2 U/μL)

Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als TaqWeitere Informationen
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KatalognummerFarbeAnzahl Reaktionen
F537SGreen100 Reaktionen
F537LGreen500 Reaktionen
F549SColorless100 Reaktionen
F549LColorless500 Reaktionen
F549XLColorless2000 Reaktionen
Katalognummer F537S
Preis (EUR)
124,65
Exklusiv online
166,00
Ersparnis 41,35 (25%)
Each
Farbe:
Green
Anzahl Reaktionen:
100 Reaktionen
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Preis (EUR)
124,65
Exklusiv online
166,00
Ersparnis 41,35 (25%)
Each
Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als Taq und einer 6 Mal niedrigeren Fehlerrate als Pfu ist Phusion High-Fidelity DNA-Polymerase eine ausgezeichnete Wahl für Klonierungen und andere Anwendungen, bei denen eine hohe Genauigkeit ausschlaggebend ist. Die Phusion DNA-Polymerasen bieten eine zuverlässige Leistung mit kurzen Protokollzeiten, auch in Gegenwart von PCR-Inhibitoren, und erzeugen höhere Ausbeuten mit geringeren Enzymmengen als andere DNA-Polymerasen.

Mit Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA-Polymerase läuft die Amplifikation ohne Herstellung von unspezifischen Produkten, und zwar aufgrund der Kombination von Phusion DNA-Polymerase und einem reversibel gebundenen, spezifischen Affibody-Liganden, der die DNA-Polymerase-Aktivität bei Raumtemperatur hemmt. Der Affibody-Ligand hemmt auch die 3´→5´-Exonuklease-Aktivität der Polymerase und verhindert so den Abbau von Primern und der Template-DNA beim Ansetzen der Reaktion. Bei Temperaturen, die Polymerase-Aktivität fördern, wird der Ligand freigesetzt, was zur vollständigen Aktivierung der Polymerase führt. Phusion Hot Start II DNA-Polymerase wird bei hohen Temperaturen sofort reaktiviert, sodass kein separater Aktivierungsschritt in PCR-Protokollen erforderlich ist.
Die Phusion Grüne Hot Start II DNA-Polymerase ist eine Kombination aus Phusion Hot Start II DNA-Polymerase und 5x Phusion Grün Puffern. Die Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe, die die robuste Leistung der Phusion Hot-Start II DNA-Polymerase nicht beeinträchtigen. Forscher können PCR-Produkte direkt auf ein Gel laden, was dies zu einer vielseitigen Option für den Einsatz in nachgeschalteten Anwendungen wie DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau macht.Besonderheiten

• Reaktionsvorbereitung bei Raumtemperatur
• Keine unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau bei der Reaktionsvorbereitung
• Nullzeit-Reaktivierung durch einzigartige Heißstart-Technologie
• Hohe Wiedergabetreue (52x Taq)
• Schnelle PCR durch kurze Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Robuste Reaktionen, minimale Optimierung erforderlich
• Erhöhte Produktausbeute mit minimalen Enzymmengen
• Direktes Auftragen auf Gele

Anwendungen

• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Hoher Durchsatz
• Amplifikation schwieriger (GC-reicher) Templates
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Multiplex-PCR
• Long-Range-PCR
• Klonierung
• Mutagenese
• Microarray

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq-DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
FarbeGreen
Wiedergabetreue (vs. Taq)52X
Hot-StartIntegrierter Heißstart
Anzahl Reaktionen100 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePhusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase
ProdukttypHot-Start DNA-Polymerase
Menge100 E (2 E/μl)
ReaktionsformatEigenständig
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Konzentration2 U/μl
Zur Verwendung mit (Anwendung)Heißstart-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Enthält:
• Phusion Hot-Start II High-Fidelity DNA-Polymerase (2 E/µl)
• 5X Phusion Green HF-Puffer
• 5X Phusion Green GC-Puffer
• DMSO
• 50 mM MgCl2-Lösung

Sowohl der Phusion Green HF-Puffer als auch der Phusion Green GC-Puffer ergeben 1,5 mM MgCl2 in der 1X Endkonzentration. Lagerung bei -20 °C.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

Can protocols optimized for Phusion DNA Polymerase be directly applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase?

Yes, protocols optimized for Phusion DNA Polymerase can be applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase reactions.

Do Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases need a separate activation step in the PCR protocol?

No separate activation step is required since Phire and Phusion Hot Start II DNA Polymerases are inactivated by a reversibly bound, specific Affibody ligand that dissociates during initial denaturation.

What nucleotide analogues can I use with DyNAzyme and Phusion DNA Polymerases?

DyNAzyme II DNA Polymerase can use dUTP, biotinylated dNTPs, 7-deaza-dGTP, digoxigenin-dUTP, bromo-dUTP, radiolabeled dNTPs and ITP. DyNAzyme EXT DNA Polymerase and Phusion DNA Polymerase cannot read dUTP-derivatives or dITP in the template strand so the use of these analogues is not recommended. Use Phusion U Hot Start DNA Polymerase for amplification of dUTP and dITP containing templates.