Phusion High-Fidelity PCR-Kit
Thermo Scientific™

Phusion High-Fidelity PCR-Kit

Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als TaqWeitere Informationen
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KatalognummerAnzahl Reaktionen
F553S50 Reaktionen
F553L200 Reaktionen
Katalognummer F553S
Preis (EUR)
80,65
Online Exclusive
94,25
Ersparnis 13,60 (14%)
Each
Anzahl Reaktionen:
50 Reaktionen
Großbestellung oder individuelle Größe anfordern
Preis (EUR)
80,65
Online Exclusive
94,25
Ersparnis 13,60 (14%)
Each
Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen setzen einen neuen Gold-Standard für die Hochleistungs-PCR. Mit einer 50 Mal niedrigeren Fehlerrate als Taq und einer 6 Mal niedrigeren Fehlerrate als Pfu ist Phusion High-Fidelity DNA-Polymerase eine ausgezeichnete Wahl für Klonierungen und andere Anwendungen, bei denen eine hohe Genauigkeit ausschlaggebend ist. Die Phusion DNA-Polymerasen bieten eine zuverlässige Leistung mit kurzen Protokollzeiten, auch in Gegenwart von PCR-Inhibitoren, und erzeugen höhere Ausbeuten mit geringeren Enzymmengen als andere DNA-Polymerasen.

Besondere Merkmale

• Hohe Genauigkeit (52X Taq)
• Schnelle PCR durch kurze Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Robuste Leistung, minimale Optimierung erforderlich
• Hohe Ausbeuten an PCR-Produkten mit minimalen Enzymmengen
• Erhältlich als Green-Pufferformat für das direkte Auftragen von PCR-Produkten auf Gele (F-534S oder F-534L)

Anwendungen

• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Amplifikation schwieriger (GC-reicher) Templates
• Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
• Mutagenese
• PCR mit hohem Durchsatz
• Microarray
Das Thermo Scientific Phusion PCR-Kit mit hoher Wiedergabetreue enthält alle erforderlichen Reagenzien für die PCR, einschließlich Lambda-DNA-Kontrolltemplate und Primer für 1,3 kb- und 10 kb-Amplikons. Die Menge der DNA-Templates ist ausreichend für 20 Kontrollreaktionen in 50 µl Volumen oder 50 Kontrollreaktionen in 20 µl Volumen.

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Die Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq-DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.

Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den in der Produkteinlage angegebenen Patenten für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produkts für eigene interne Forschungsanwendungen≈ des Käufers. Darüber hinaus werden keinerlei weitere Patentrechte übertragen, weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Specifications
Wiedergabetreue (vs. Taq)52X
Hot-StartNein
Anzahl Reaktionen50 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePhusion High-Fidelity DNA-Polymerase
ProdukttypPCR-Kit mit hoher Wiedergabetreue
Menge50 reactions
ReaktionsformatSeparate Komponenten
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Zur Verwendung mit (Anwendung)Standard-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Enthält:
• Phusion DNA-Polymerase (2 E/µl)
• 5X Phusion GC-Puffer
• 5X Phusion HF-Puffer
• dNTP-Gemisch (je 10 mM)
• MgCl2-Lösung (50 mM)
• Kontrolltemplate (λ-DNA)
• 1,3 kb-Primer (je 4 µM)
• 10 kb-Primer (je 4 µM)
• DNA-Größenstandard
• DMSO

Bei -20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

Can protocols optimized for Phusion DNA Polymerase be directly applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase?

Yes, protocols optimized for Phusion DNA Polymerase can be applied to Phusion Hot Start II DNA Polymerase reactions.