Phusion U Multiplex PCR Master Mixes

Der Thermo Scientific Phusion U Green Multiplex-PCR-Mastermix ist ein gebrauchsfertiger 2x Endpunkt-PCR-Mastermix, der für die gleichzeitige Amplifikation mehrerer Ziele in einem einzigen Röhrchen entwickelt wurde. Über 20 Primerpaare können in einer einzigen Reaktion kombiniert werden, um ein hochspezifisches und effizientes Multiplexing über sehr viele unterschiedliche Primer- und Template-Konzentrationen zu ermöglichen.

Der Phusion U Green Multiplex-PCR Master Mix enthält einen proprietären Puffer mit einer ausgewogenen Konzentration aller PCR-Komponenten, wodurch keine mühsamen Optimierungsschritte mehr notwendig sind. Das Green-Format vereinfacht den Arbeitsablauf noch weiter dank Dichtereagenz und zwei Elektrophorese-Tracking-Farbstoffen für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele.

Besondere Merkmale

• Spezifische und effiziente Multiplex-PCR von mehr als 20 Zielen bis 2,5 kb
• Hervorragende Ergebnisse mit Templates von suboptimaler Reinheit aufgrund der Inhibitor-Toleranz
• Schnelle Zyklen und direkte Beladung der PCR-Produkte auf die Gele

Anwendungen

• Genotypisierung
• Pathogennachweis
• Lebensmittelanalytik
• Analyse genetisch veränderter Organismen
• Amplifikation von Mikrosatelliten

Der Master Mix basiert auf Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase, einem Hochleistungsenzym, das mit Fusionstechnologie entwickelt wurde. Ähnlich wie andere Enzyme aus der Phusion-Produktfamilie enthält Phusion U DNA-Polymerase mehr Nukleotide pro Bindungsereignis als jede andere DNA-Polymerase. Dies ermöglicht eine hohe Ausbeute von PCR-Produkten mit kürzeren Erweiterungszeiten und folglich reduzierten Gesamtprotokollzeiten. Die deutlich verbesserte Prozessivität ermöglicht auch eine erfolgreiche Multiplex-PCR bei schwierigen Zielen wie GC-reichen Templates oder Templates mit suboptimaler Reinheit. Aufgrund der hohen Toleranz gegenüber vielen PCR-Inhibitoren kann der Phusion U Multiplex-PCR Master Mix sogar mit nicht gereinigten Proben wie Blut oder Serum verwendet werden.

Die Spezifität der Multiplex-PCR wird durch den Affibody-vermittelten Hot-Start-Mechanismus erhöht. Der reversibel gebundene Affibody-Ligand hemmt die Polymerase bei Umgebungstemperatur und verhindert so die Amplifikation unspezifischer Produkte und die Bildung von Primer-Dimers.

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Die Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (wie Taq-DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.