Thermo Scientific™

FastDigest AjuI

5' ↓N7G A A N7T T G G N11↓ 3'3' ↑N12C T T N7A A C C N6↑ 5'Das ThermoWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
FD1954	20μ L (20 Reaktionen)

Katalognummer FD1954

Preis (EUR)

165,65

Online Exclusive

173,00

Ersparnis 7,35 (4%)

Menge:

20μ L (20 Reaktionen)

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Preis (EUR)

165,65

Online Exclusive

173,00

Ersparnis 7,35 (4%)

5' ↓ N₇ G A A N₇ T T G G N₁₁ ↓ 3'
3' ↑ N₁₂ C T T N₇ A A C C N₆ ↑ 5'

Das Thermo Scientific FastDigest AjuI Restriktionsenzym erkennt die ^(7/12)GAA(N)7TTGG(11/6)^-Stelle und schneidet am besten bei 37°C in 5 bis 15 Minuten mit dem FastDigest Universalpuffer.

Thermo Scientific FastDigest AjuI gehört zu einer modernen Produktlinie schneller Restriktionsenzyme, die alle zu 100 % im FastDigest Universalpuffer und FastDigest Green Reaktionspuffer aktiv sind.

Der Universalpuffer ermöglicht einen schnellen Einzel-, Doppel- oder Mehrfachverdau von DNA innerhalb von 5 bis 15 Minuten ohne erforderlichen Pufferwechsel oder anschließende DNA-Reinigungsschritte. Unter Reaktionsbedingungen für FastDigest-Enzyme finden Sie eine Tabelle mit Angaben zu Enzymaktivität, Hitzeinaktivierung und Inkubationszeiten für diese und andere FastDigest-Restriktionsenzyme. DNA-modifizierende Enzyme wie das Klenow-Fragment, T4 DNA-Ligase, alkalische Phosphatasen und T4 DNA-Polymerase besitzen alle im FastDigest-Puffer eine uneingeschränkte Aktivität. Aus diesem Grund können Enzyme für nachfolgende Anwendungen direkt dem FastDigest-Reaktionsgemisch hinzugefügt werden.

Als zusätzliche Erleichterung enthält FastDigest Green Buffer ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen der verdauten Reaktionsprodukte auf ein Gel.

Kurze Inkubationszeiten und eine optimale Zusammensetzung des FastDigest-Universalpuffers verhindern das Auftreten von Star-Aktivitäts-Effekten.

Eigenschaften

• 100 % Aktivität aller FastDigest-Enzyme im Universalpuffer
• 100 % Pufferkompatibilität mit nachfolgenden Anwendungen
• vollständiger Verdau in 5 bis 15 Minuten
• direktes Auftragen auf Gele möglich
• keine Star-Aktivität
• 176 FastDigest-Enzyme erhältlich

Anwendungen

• molekulare Klonierung
• Kartierung von Restriktionsstellen
• Genotypisierung
• Southern Blot
• Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus (RFLP)
• SNP-Analyse

Hinweis: FastDigest AjuI benötigt SAM für Aktivität. Die vollständige Spaltung einiger Substrate mit FastDigest AjuI ist schwer zu erreichen. FastDigest AjuI erzeugt Doppelstrangschnitte auf beiden Seiten der unterbrochenen Erkennungsstelle. Die genaue Spaltposition hängt von den die Erkennungsstelle flankierenden Sequenzen ab und kann sich um ein Basenpaar verschieben. Für eine Einzelsequenz gibt es eine Mischung der 2 Spaltpositionen, wobei der Großteil des Verdaus an einer der Positionen stattfindet.

FastDigest Green Buffer bietet dieselbe hohe Leistung beim DNA-Verdau und im Downstream-Prozess wie der farblose FastDigest-Puffer. Für Anwendungen, die eine Produktanalyse durch Fluoreszenzanregung erfordern (z. B. Konzentrationsmessungen in UV-Licht), wird der farblose FastDigest-Puffer empfohlen.

Angaben zur Methylierungssensitivität finden Sie in den Produktspezifikationen.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

Kompatibler Puffer10x FastDigest Puffer/FastDigest Green Puffer

Inactivation Temperature65°C

Überhang3' protruding ends

ProdukttypRestriktionsenzym

Menge20μ L (20 Reaktionen)

EnzymAju I

MethylierungsempfindlichkeitNicht empfindlich für Dam-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive

Optimale Reaktionstemperatur37°C

ProduktlinieFastDigest

ForschungskategorieHerkömmliches Klonen

Empfindlich gegen HitzeinaktivierungJa

Typ IIS REJa

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

• FastDigest AjuI (20 μL)
• 10X FastDigest Buffer (1.0 mL)
• 10X FastDigest Green Buffer (1.0 mL)

Store at –20°C.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I store the FastDigest Buffers at 4 degrees C?

The FastDigest Buffers can be stored at 4 degrees C for at least 6 months. For long-term storage until their expiration, we recommend storing the FastDigest and FastDigest Green Buffers at -20 degrees C.

How can I perform large scale digestion with the FastDigest restriction enzymes?

Our general recommendation is to use 5-10 µL of FastDigest enzymes with 100 µg DNA in 500 µL and 10-20 µL of the FastDigest enzymes with 200 µg DNA in 1 mL. Incubate the reaction for 16 h (or the longest recommended incubation time if the particular enzyme is prone to star activity) at the recommended temperature. Optimal conditions may vary as complete digestion of DNA depends on the nature of the particular FastDigest restriction enzymes and the DNA substrates.

How I can transform or calculate reaction numbers in the unit of FastDigest enzymes?

The concentration of FastDigest enzymes is proprietary information. The FastDigest enzyme activity is measured by FastDigest unit (FDU): 1 µL of enzyme (1 FDU) cleaves 1 µg of DNA substrate in 5-15 min at 37 degrees C in 20 µL of 1X FastDigest buffer.

Are the FastDigest and FastDigest Green Buffer available separately?

Yes, the FastDigest Buffer (Cat. No. B64) and the FastDigest Green Buffer (Cat. No. B71) can be purchased separately.

What is the difference between FastDigest Buffer and FastDigest Green Buffer?

The FastDigest Green Buffer offers the same performance as the colorless FastDigest Buffer but enables direct loading of the reaction mixture on gels. The 10X FastDigest Green Buffer includes a density reagent and two tracking dyes for direct loading. The blue dye migrates with 3-5 kb DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 424 nm. The yellow dye migrates faster than 10 bp DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 615 nm.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Restriction Enzyme Cloning Support Center.

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