Das Thermo Scientific GeneJET Plasmid Miniprep Kit nutzt eine exklusive Membrantechnologie auf Silikabasis in Form einer praktischen Spinsäule. Mit dem Kit können pro Isolationsverfahren bis zu 20 µg High-Copy-Plasmid-DNA gewonnen werden..
Vorteile•
Effizient – Hohe Ausbeute von bis zu 20 µg hochwertiger Plasmid-DNA
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Schnell – Verfahren dauert weniger als 14 Minuten
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Anwenderfreundlich – Phenol/Chloroform-Extraktion oder Alkoholfällung ist nicht erforderlich
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Rein – Aufgereinigte DNA ist sofort einsatzbereit
Anwendungen• Schnelle Isolierung von hochreiner Plasmid-DNA, die für molekularbiologischen Verfahren geeignet ist, wie z. B.:
• FastDigest oder herkömmlicher Restriktionsverdau
• Automatisierte Fluoreszenz- und radioaktive Sequenzierung
• PCR
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In-vitro-Transkription
• Transformation
PrinzipEine Bakterienkultur wird geerntet und einer Lyse unterzogen. Das Lysat wird dann durch Zentrifugieren geklärt und auf eine Kieselgelsäule appliziert, um selektiv DNA-Moleküle bei hoher Salzkonzentration zu binden. Aus der adsorbierten DNA werden die Kontaminanten durch Waschen entfernt, und das reine Plasmid-DNA wird in einem kleinen Volumen Elutionspuffer oder Wasser eluiert. Die aufgereinigte DNA kann nun sofort für alle molekularbiologischen Verfahren verwendet werden, darunter schneller und konventioneller Verdau mit Restriktionsenzymen, PCR,
In-vitro-Transkription, Transformation und automatisierte Sequenzierung. Komponenten Resuspensionslösung Lyselösung Neutralisierungslösung Waschlösung (konzentriert) RNase-A-Lösung Elutionspuffer Spin-Säulen Probenröhrchen Detailliertes Protocol
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