Bei der LanthaScreen® c-Jun (1-79) HeLa-Zelllinie ist ein Fusionsprotein aus GFP und einem Fragment, das für die Aminosäuren 1 bis 79 von c-Jun kodiert, unter der Kontrolle eines CMV-Promotors stabil in HeLa-Zellen transfiziert. HeLa ist eine Gebärmutterhalskrebs-Zelllinie, die eine induzierbare Aktivierung von JNK durch eine Reihe verschiedener Liganden wie TNF-a und EGF aufweist, was zur transienten Phosphorylierung von GFP-c-Jun (1-79) führt. Diese LanthaScreen® Zelllinie ermöglicht daher eine Analyse der JNK-Aktivität mittels GFP-c-Jun-Phosphorylierung als Auslesung. Das GFP-c-Jun (1-79)-Konstrukt wurde mittels Lipofectamine™2000 in HeLa-Zellen transfiziert und anschließend mit Blasticidin selektiert. Diese Zelllinie ist eine klonale Population, die mittels Durchflusszytometrie mithilfe der GFP-Fluoreszenz als Sortiermarker isoliert wurde. Diese Zelllinie wurde unter optimierten Bedingungen mit TNF-a als Ligand für die JNK-vermittelte GFP-c-Jun (1-79)-Phosphorylierung für EC50 und Z'-Faktor validiert. Darüber hinaus wurde diese Zelllinie unter variablen Testbedingungen wie Zellplattierungsdichte, Stimulationszeit, DMSO-Toleranz und Assay-Entwicklungszeit auf Assayleistung getestet. Weitere Informationen mit alternativen Stimuli sind ebenfalls verfügbar. Kunden aus dem akademischen und gemeinnützigen Bereich fragen bitte nach Sonderpreisen.
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