Thermo Scientific™

RevertAid RT Kit für Umkehrtranskription

Beim Thermo Scientific RevertAid RT Kit handelt es sich um ein Komplettsystem für die effiziente Synthese von Erststrang-cDNA aus mRNA-TemplatesWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
K1691	500 reactions

Katalognummer K1691

Preis (EUR)

1.046,00

Menge:

500 reactions

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Preis (EUR)

1.046,00

Beim Thermo Scientific RevertAid RT Kit handelt es sich um ein Komplettsystem für die effiziente Synthese von Erststrang-cDNA aus mRNA-Templates oder Gesamt-RNA-Templates. Das Kit umfasst RevertAid Reverse Transkriptase (RT), die im Vergleich zur reversen AMV-Transkriptase eine niedrigere RNase-H-Aktivität aufweist. Das Enzym bleibt aktiv bei 42 bis 50 °C und ist für die Synthese von cDNA bis zu 13 kb geeignet. Der rekombinante Thermo Scientific RiboLock RNase Inhibitor, der im Lieferumfang des Kits enthalten ist, schützt vor RNA-Abbau bei Temperaturen bis zu 55 °C. Mit diesem System synthetisierte Erststrang-cDNA kann direkt als Template in PCR- oder Real-Time PCR verwendet werden. Zusätzlich ist sie als erster Schritt für die Zweitstrang-cDNA-Synthese oder lineare RNA-Amplifikation bestens geeignet. Radioaktiv und nicht radioaktiv markierte Nukleotide können in die Erststrang-cDNA zur Verwendung als Sonde in Hybridisierungsexperimenten, einschließlich Mikroarrays, integriert werden.

Besondere Merkmale

• Erststrang-cDNA über die volle Länge bis zu 13 kb
• Optimale Reaktionstemperatur 42 °C
• Komplettkit – alle Komponenten für die RT-Reaktion sind im Kit enthalten

Anwendungen

• Erststrang-cDNA-Synthese für RT-PCR und RT-qPCR
• Erstellung von Bibliotheken mit Volllängen-cDNA
• Synthese von Antisense-RNA

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

EndprodukttypErststrang-cDNA

FormatKit

Anzahl Reaktionen500 Reaktionen

Optimale Reaktionstemperatur42 °C

Menge500 reactions

ReaktionsformatSeparate Komponenten

ReagenztypReverse Transkription

Reverse TranskriptaseRevertAid

Ribonuklease-H-AktivitätJa

VersandbedingungTrockeneis

Größe (Endprodukt)Bis 13 kb

AusgangsmaterialRNA

VerfahrenReverse Transkription

Zur Verwendung mit (Anwendung)Real-Time PCR (qPCR)

Reaktionsgeschwindigkeit60 min

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Das RevertAid RT Kit enthält:

Bei -20°C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

For reverse transcription, how important is the quality of RNA template?

RNA purity and integrity are essential for synthesis and quantification of cDNA. Always assess the integrity of RNA prior to cDNA synthesis. Use freshly prepared RNA. Multiple freeze/thaw cycles of the RNA sample and synthesized cDNA is not recommended. Avoid RNase contamination and discard low quality RNA.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H Minus RT or Maxima H Minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H Minus RTs for template-independent addition of C nucleotides. In contrast, reverse transcriptases with intrinsic RNase H activity are often favored in 1-step RT-qPCR applications.

What is the fidelity of RevertAid and Maxima reverse transcriptases?

The fidelity of RevertAid and Maxima reverse transcriptases is the same as that of wild-type M-MuLV RT, which is in the range of 1 error per 15,000-27,000 nucleotides synthesized.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H Minus RT, Maxima RT, and Maxima H Minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H Minus RT, Maxima RT, and Maxima H Minus RT) possess intrinsic TdT activity, although at varying degrees depending upon the reaction conditions. We recommend specialized SuperScript IV Template Switching RT Master Mix for high efficiency in applications requiring template switching RT.