PureLink™ HiPure Plasmid-Filter-Midiprep-Kit
PureLink™ HiPure Plasmid-Filter-Midiprep-Kit
Invitrogen™

PureLink™ HiPure Plasmid-Filter-Midiprep-Kit

Das PureLink™ HiPure Plasmid Filter Midiprep Kit dient zur Isolierung von hochreiner Plasmid-DNA aus 25 bis 100 ml einer Bakterienkultur,Weitere Informationen
Have Questions?
Ansicht ändernbuttonViewtableView
KatalognummerMenge
K21001550 Aufreinigungen
K21001425 Aufreinigungen
Katalognummer K210015
Preis (EUR)
527,65
Online Exclusive
668,00
Ersparnis 140,35 (21%)
Each
Zum Warenkorb hinzufügen
Menge:
50 Aufreinigungen
Preis (EUR)
527,65
Online Exclusive
668,00
Ersparnis 140,35 (21%)
Each
Zum Warenkorb hinzufügen
Das PureLink™ HiPure Plasmid Filter Midiprep Kit dient zur Isolierung von hochreiner Plasmid-DNA aus 25 bis 100 ml einer Bakterienkultur, die über Nacht gewonnen wurde. Die PureLink™ HiPure Plasmid Filter-Kits enthalten HiPure Filtersäulen, die Filtration für die Klärung der bakteriellen Lysate mit Anionenaustausch-Harz zur Aufreinigung von Plasmid-DNA in einem Gerät verbinden. Die resultierende Plasmid-DNA entspricht in der Qualität der DNA, die durch Aufreinigung mit zwei Läufen durch Cäsiumchlorid-Gradienten – der strengsten Methode zur DNA-Aufreinigung, erreicht wird. Reinigen Sie hochwertige DNA in weniger als zwei Stunden ohne Schritte zur Entfernung von Kontaminanten wie z. B. RNA, Proteinen und Endotoxinen für Transfektionen und andere Anwendungen auf. Zusätzlich minimiert der Verzicht auf Phenol, Chloroform, Ethidiumbromid und Cäsiumchlorid aus dem Protokoll eine Exponiertheit gegenüber gesundheitsschädlichen Substanzen und deren Entsorgung. Die PureLink™ HiPure Plasmid Filter-Kits bieten:

• Einfache Protokolle – Bakterielle Lysat-Klärung ohne Zentrifugation
• Schnelle Ergebnisse – Sparen Zeit durch die Aufreinigung von Plasmid-DNA in weniger als zwei Stunden
• Hohe Ausbeute – Bis zu 200 µg für Midipreps und bis zu 850 µg für Maxipreps (siehe Tabelle)
• Zuverlässige Leistung – Die hochwertige Plasmid-DNA, die mit diesen Kits aufgereinigt wird, eignet sich für eine Vielzahl von Anwendungen

Funktionsweise
Durch Hinzufügen einer HiPure Filter-Säule zu den PureLink™ HiPure Plasmid-Kits wird die schnelle Reinigung des bakteriellen Lysats ohne Zentrifugation ermöglicht (siehe Abbildung). Die Lysat-Filterpatrone ist in die DNA-bindende Säule integriert und ermöglicht den kombinierten Schritt der Lysat-Klärung und Plasmid-DNA-Bindung direkt an das Anionenaustausch-Harz. Eine einzelne Säulenwaschung entfernt Verunreinigungen wie RNA, Proteine, Metaboliten und andere niedermolekulare Moleküle. Die ultrareine Plasmid-DNA wird dann mit einem Puffer mit hoher Salzkonzentration eluiert. Die DNA wird anschließend entsalzt und in einem Schritt mit Isopropanol-Fällung konzentriert und anschließend durch Zentrifugation gesammelt. Das gesamte Protokoll kann in etwa zwei Stunden abgeschlossen werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications
SäulentypFiltersäule
Elutionsvolumen5 ml
EndprodukttypPlasmid-DNA
Zur Verwendung mit (Anwendung)Sequenzierung der nächsten Generation, Transfektion, Klonen, Sequenzierung, Transformation, Nukleinsäurebeschriftung, PCR, In-vitro-Transkription
Hochdurchsatz-KompatibilitätNicht mit hohen Durchsatz kompatibel (manuell)
Anzahl Reaktionen50 Aufreinigungen
Plasmid< 40 kb, Low-Copy-Plasmid, High-Copy-Plasmid, BAC
Prep-Maßstab100–200 µg (mittelgroß) Plasmid-DNA
ProduktliniePureLink
ProdukttypPlasmid-Filter-MaxiPrep-Kit
ReinheitTransfektionsgrad
Menge50 Aufreinigungen
ProbentypBakterienkultur
VersandbedingungRaumtemperatur
SystemtypPureLink™
ZielPlasmid-DNA
Prüfzeit90 min
Ertrag350µ g
FormatSäule
Isolation TechnologyAnionenaustauschharz
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Die PureLink™ HiPure Plasmid-Filterkits enthalten Äquilibrierpuffer (EQ1), Resuspensionspuffer (R3), Lysepuffer (L7), Fällungspuffer (N3), RNase A, Waschpuffer (W8), Elutionspuffer (E4), TE-Puffer (TE) und HiPure Filtersäulen. Alle Komponenten sind nach Erhalt bei Raumtemperatur zu lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I'm getting low/no plasmid DNA after purification using a PureLink HiPure kit, even though there was measurable absorbance. Do you have any suggestions for what I can do?

A common problem encountered with absorbance measurements is turbidity of samples. (This could be caused by residual resin from the column.) If there is insoluble material in the cuvette (not often detected by the naked eye), much of the UV light is not absorbed but scattered, leading to an artificially high UV absorbance reading (at 260 or 280 nm, for example.) If your A260 is high, we recommend that you check the A320 to determine if there is resin in the sample. You can also try to centrifuge or filter (0.2 µm filter) your sample to remove any resin and then recheck the concentration.

I've run out of buffer when using the PureLink HiPure Plasmid Purification Kit (Cat. No. K210018). Can I purchase the buffers separately?

Yes, we would recommend purchasing the PureLink HiPure BAC Buffer Kit (Cat. No. K210018). This kit includes Resuspension Buffer (R3) (250 ml), Lysis Buffer (L7) (250 ml), Precipitation Buffer (N3) (250 ml), and RNase A (20 µg/ml) (5 ml).
You will need to add less RNase A than stated on the bottle label of the R3 buffer in this kit. It says to add 5.6 mL of RNase A. This is the correct amount for the BAC protocol; however, if you are performing standard plasmid isolation, 1.4 mL RNase A should be added.

Plasmid DNA isolated using a PureLink column-based purification kit from an endA+ strain is degraded after a restriction digest. Do you have a suggestion for this?

The HiPure kits should remove all protein from the DNA including endonucleases. For the silica-based PureLink Quick Plasmid Miniprep Kit, we recommend an extra wash with the optional Wash Buffer W10 to remove endonucleases. This solution is not compatible with the HiPure system and should not be used with those kits. Alternatively, heat the eluted DNA in TE for 10 min at 70 degrees C. This should heat-inactivate any contaminating nucleases.

I'm seeing extra bands present after plasmid purification using your PureLink column-based system. What could cause this to happen?

Extra bands can occur when plasmid DNA is nicked and/or permanently denatured. Plasmid DNA that has been nicked (covalently opened) will run slower than supercoiled DNA during electrophoresis. A small amount of this species of DNA is common and is suitable for downstream applications. Permanently denatured DNA will migrate ahead of the supercoiled DNA and may not be suitable for downstream applications. Do not allow the lysis reaction to proceed longer than 5 minutes.

My purified DNA has particles in it after column-based plasmid purification. Any suggestions?

We have seen this on occasion. The particles do not affect quality of the DNA. Remove the particles by performimg a 1 minute centrifugation at 12,000 x g.

View all PureLink™ HiPure Plasmid-Filter-Midiprep-Kit FAQs