Das PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit vereint die hochentwickelten chemischen Eigenschaften der Kieselgelplatten-Extraktion mit einer optimierten 96-Well Platte für die manuelle oder automatisierte Verarbeitung von Plasmid-DNA aus E. coli in nur 45 Minuten (Tabelle 1). Möglichkeiten mit dem PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit:

• Erzielen Sie konstant hohe Ausbeuten hochreiner Plasmid-DNA
• Erleben Sie Anwenderfreundlichkeit und höhere Leistungsfähigkeit durch verbessertes Plattendesign und verbesserte Protokolle
• Erhöhen Sie die Verarbeitungsflexibilität mit Protokollen für Zentrifugen, Vakuumkammern oder automatisierte Plattformen

Funktionsweise
Das PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit verwendet zwei 96-Well-Platten, eine Filtrationsplatte (klarer O-Ring) und eine Bindungsplatte (roter O-Ring) und eine Bindungsplatte (roter O-Ring). Bakterienzellen werden alkalischer Lyse unterzogen und durch Zentrifugation pelletiert. Das bakterielle Lysat wird dann auf die Quick96-Filtrationsplatte zur Reinigung und Sammlung in der Quick96-Bindungsplatte aufgetragen, wo die Plasmid-DNA an die Kieselgelmembran bindet. Nach dem Waschen wird die gereinigte DNA eluiert und kann in Downstream-Prozessen verwendet werden. Das gesamte Verfahren kann in 45 Minuten abgeschlossen werden (Abbildung 1).

Verbessertes Plattendesign
Das PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit bietet optimierte, halbhohe 96-Well-Platten für höheres Leistungsverhalten und bessere Ergebnisse (Abbildung 2). Die Quick96-Filtrationsplatte ist für die schnelle und effiziente Reinigung der bakteriellen Lysate ausgelegt. Die Quick96-Bindungsplatte bietet eine erhöhte Bindungskapazität von bis zu 20 µg Plasmid-DNA. Darüber hinaus verhindern die Plattendüsen mit Ringkragen Kreuzkontaminationen von Proben und verbessern die Trocknung der Silikamembran, um Äthanolverschleppung zu verhindern. Darüber hinaus kann die Probenverarbeitung manuell über eine Labortisch-Vakuumkammer, durch Zentrifugation oder mit einer automatisierten Liquid-Handling-Plattform durchgeführt werden. Das Design der Platte mit halbhohem Rand ist mit den meisten Vakuumkammern an Roboterarbeitsplätzen kompatibel.

Höhere Ausbeute und Reinheit
Das PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit ermöglicht eine schnelle und reproduzierbare Aufreinigung von bis zu 20 µg Plasmid-DNA aus E. coli-Stämmen, die in bis zu 5 ml LB, 3 ml 2XYT oder 3 ml TB kultiviert wurden. In einer automatisierten Plattform mit 1,5 ml E. coli-Kultur, die über Nacht in einem quadratischen Well-Block kultiviert wird, liegen die typischen Ausbeuten bei 5–15 µg Plasmid-DNA mit durchschnittlich 9,4 µg (Abbildung 3). Die resultierende Plasmid-DNA ist mit keiner nachweisbaren genomischen DNA oder RNA superhelikal (Abbildung 4). Das PureLink™ Pro Quick96 Plasmid-Kit bietet eine höhere Ausbeute an hochwertiger Plasmid-DNA für die Verwendung in gängigen Downstream-Prozessen wie automatisierter Sequenzierung, PCR, Restriktionsenzymverdau und Klonierung.