Product Image
Applied Biosystems™

Arcturus™ RiboAmp™ PLUS Kit

Das Arcturus™ RiboAmp™ PLUS RNA-Amplifikationskit ermöglicht dem Forscher, molekulare Analysen an RNA-Proben durchzuführen, die zuvor als zu klein für dieWeitere Informationen
Have Questions?
KatalognummerMenge
KIT050124 Proben
Katalognummer KIT0501
Preis (EUR)
3.920,00
Each
Menge:
24 Proben
Preis (EUR)
3.920,00
Each
Das Arcturus™ RiboAmp™ PLUS RNA-Amplifikationskit ermöglicht dem Forscher, molekulare Analysen an RNA-Proben durchzuführen, die zuvor als zu klein für die Mikroarray-Analyse angesehen wurden. Das RiboAmp™ PLUS Kit bietet eine einzigartige lineare Amplifikation ab nur 1 ng der Gesamt-RNA. Mit einem firmeneigenen Prozess für hocheffiziente, lineare High-Fidelity-Amplifikation wird die Messenger-RNA in einer Syntheserunde bis zum 1000-fachen und in zwei Runden bis zum 1.000.000-fachen verstärkt. Das RiboAmp™ PLUS Kit produziert amplifizierte Antisense-RNA (aRNA), die für die Markierung und Mikroarray-Hybridisierung oder Echtzeit-PCR geeignet ist. Das RiboAmp Plus Kit kann zur Erzeugung biologisch relevanter Ergebnisse mit cDNA- und Oligonukleotid-Array-Plattformen verwendet werden. Wir bieten auch RiboAmp™ HS PLUS Kits für kleinere RNA-Mengen an.

Wichtige Produktmerkmale:
• Hohe Wiedergabetreue – Erhaltung nativer Expressionswerte
• Höhere Empfindlichkeit – Detektion von mRNA mit geringer Abundanz
• Hohe Zuverlässigkeit – Bereitstellung reproduzierbarer amplifizierter RNA für Microarray-Experimente
• Schnelle Anwendung – schnellere Prozessproben
• Verbesserte Spezifität – Aufzeigen der Unterschiede in der Genexpression zwischen Zelltypen

Beibehaltung nativer Expressionsstufen
Das RiboAmp™ PLUS RNA-Amplifikationskit bietet eine beispiellose High-Fidelity RNA-Amplifikation auch aus mikroskopischen Proben. Der Vergleich von Microarray-Ergebnissen aus der Gesamt-zellulären RNA und von aRNA, die mit dem RiboAmp™ PLUS Kit amplifiziert wurde, zeigt eine sehr hohe Konkordanz zwischen differentiell exprimierten Genen. Dies zeigt die Fähigkeit des RiboAmp™ PLUS Kits, die für die zuverlässige Datenanalyse kleiner Proben erforderliche Verstärkergenauigkeit bereitzustellen.

Nachweis von mRNA mit geringer Abundanz
Das RiboAmp™ PLUS RNA-Amplifikationskit ermöglicht die Amplifikation von mRNA in allen Abundanzklassen. Mit RT-PCR werden Gene mit niedriger, mittlerer und hoher Abundanz innerhalb der amplifizierten RNA-Population leicht nachgewiesen. Die Amplifikation von mRNA in allen Abundanzklassen stellt sicher, dass differenzielle Genexpressionsmuster identifiziert werden.

Bereitstellung reproduzierbarer amplifizierter RNA für Microarray-Experimente
Das RiboAmp™ PLUS RNA-Amplifikationskit liefert konsistent aRNA, die bereit ist für die Markierung und Hybridisierung in Expressionsmikroarrays mit minimaler Variabilität von Amplifikation zu Amplifikation. Die Mikroarray-Analyse unabhängiger Amplifikationen aus derselben Quell-RNA zeigt eine hervorragende Korrelation.

Schnellere Prozessproben
Das RiboAmp™ PLUS Kit enthält komplette Reagenzien und Geräte für die Probensynthese, Transkription und Nukleinsäure-Reinigung. Mühsame Vakuumkonzentrationen werden durch die Integration optimierter Chemikalien und durch die Verwendung der neuartigen MiraCol™ Aufreinigungssäulen mit hoher Rückgewinnung vollständig eliminiert. Es gibt deutlich weniger Pipettierschritte, da die Probe direkt in Reaktionsröhrchen eluiert wird und die Reagenzien bequem vordispensiert und vorgemischt werden. In einem achtstündigen Arbeitstag ermöglicht das RiboAmp™ PLUS Kit die Einrichtung von Amplifikation, Markierung und Mikroarray-Hybridisierung. Mit einer praktischen In-vitro-Transkription über Nacht kann eine zweite Amplifikationsrunde bis zum nächsten Morgen abgeschlossen werden.

Aufzeigen der Unterschiede in der Genexpression zwischen Zelltypen
Eine präzise Genexpressionsanalyse erfordert die Analyse spezifischer Zelltypen ohne Interferenzen von umgebenden Zellen. Ausgehend von diesen reinen Zellpopulationen bedeutet das oft, mit kleinen Proben zu arbeiten. Um die Herausforderungen bei der Handhabung dieser wertvollen Proben zu meistern, sind spezielle Technologien erforderlich. Die Kombination aus LCM, RNA-Amplifikation und Microarray-Analyse zeigt die differenzielle Genexpression zwischen den Zelltypen.

Integrierte Systeme für die Mikrogenomik
Das Arcturus™ Komplettsystem für die Mikrogenomik™ bietet eine integrierte Lösung für die Vorbereitung kleiner RNA-Mengen für die Genexpressionsanalyse. Das System verfügt über das ArcturusXT™ Laser Capture Microdisection (LCM) Instrument zur Beschaffung reiner Zellpopulationen, das PicoPure™ RNA-Isolationskit zur Extraktion und Reinigung von RNA sowie das RiboAmp™ PLUS Kit zur linearen Amplifikation von RNA. Die Systeme von Arcturus für die Mikrogenomik ermöglichen präzise und empfindliche Microarray-Assays, die molekulare, sonst in Ganzgewebeproben oder Zellgemischen verdunkelt dargestellte Proben offenbaren.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
Zur Verwendung mit (Anwendung)Microarray-Analyse, quantitative Echtzeit-PCR (qPCR)
Zur Verwendung mit (Geräte)ArcturusXT™ LCM-Gerät
EnthältAmplification Purification Kit (Purification Reagents and Columns), cDNA Synthesis Kit, In vitro Transcription (IVT) Kit
Marker oder FarbstoffUnmarkiert
ProduktlinieARCTURUS, RiboAmp
Menge24 Proben
Reverse TranskriptaseNot Included
ProbentypAny Tissue Type, Cell Cultures, LCM Samples
TypPLUS Kit
ArbeitsablaufschrittReverse Transcription, In Vitro Transcription, RNA Amplification
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
cDNA synthesis kit, in vitro transcription (IVT) kit, amplification purification kit (purification reagents and columns). Variable storage conditions

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What is the typical size range of amplified RNA?

A single round of amplification yields product sizes ranging from 200 bases to 6 kb. The majority of these products are approximately 1.5 kb in length. A second round of amplification will result in shorter products. We recommend using an Agilent 2100 bioanalyzer to visualize these products. Amplification products can be visualized by agarose gel electrophoresis; they will migrate as a smear. Although this data is still useful, it is less informative than bioanalyzer analysis.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Epigenetics Support Center.

Why is RNA amplification necessary?

Glass microarray analysis experiments typically require 5-20 µg of total RNA per slide for sample labeling and hybridization. Thus, microarray-based gene expression analysis of very small samples [laser capture microdissection (LCM), tissue biopsies, or other clinical samples] is difficult due to the very low amounts of total RNA recovered from the samples. Linear amplification of RNA from small samples produces sufficient quantities of RNA for sample labeling and hybridization. Since the amplification technique is highly reproducible and maintains representation of the gene expression in the original sample, it is recommended for probe synthesis by most manufacturers of commercially available microarrays.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Epigenetics Support Center.

How is fold amplification calculated?

RNA amplification using the Van Gelder and Eberwine technique (Van Gelder 1990) utilizes an oligo(dT) primer containing the T7 RNA polymerase promoter for synthesis of first strand cDNA. The poly(A) tail at the end of mRNA sequences serves as the substrate for the binding of these primers. Since mRNA typically constitutes only 1-5% of the total RNA in the cell, only this fraction of the total RNA is amplified. The tissue type, its developmental state, and its health all influence the actual proportion of mRNA in a total RNA sample. Total RNA from brain, testes, and embryonic tissues may contain up to 4% mRNA, while RNA from many other tissues will have only 1% or less mRNA. The RNA isolation method can also influence mRNA content. The generally accepted average value for mRNA content is about 2% of a total RNA sample. When 1 µg of total RNA, 2% or 20 ng of which is mRNA, is amplified 1000-fold, yields of 20 µg aRNA (or cRNA) should be expected. You may observe higher fold amplification when starting with lower amounts of total RNA. This is because, in an in vitro transcription (IVT) reaction, a finite amount of RNA can be synthesized with the fixed amount of NTPs. When starting with less RNA, NTPs do not become limiting until the RNA is amplified beyond the typical 1000-2000 fold amplification levels seen with higher amounts of input RNA.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Epigenetics Support Center.

How do I locate the overview image on the Arcturus XT LCM Instrument?

First, optimize the visualization of the image in the live video at 2X by increasing or decreasing the brightness setting, then right-click on the overview image and select "remember settings". This resets your optimized image settings, and when you select "re-acquire overview image" you will now generate a perfectly exposed overview image.

With the ArcturusXT LCM Instrument, which laser should I use to isolate my region of interest? UV cutting laser or IR capture laser?

For a few cells: The gentle IR-only approach is the best recommendation for preserving nucleic acids and verifying that the desired material is collected on the cap. For groups of cells or large tumor regions: Mount your tissue on a membrane slide and take advantage of the power of the IR, or IR + UV cutting laser to cut around your region of interest quickly and cleanly.