LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem tiefrotem Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm
LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem tiefrotem Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm
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LIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem tiefrotem Totzellen-Farbstoff zur Anregung mit 633 oder 635 nm

Das LIVE/DEAD™ Fixable Far-Red Dead Cell Stain Kit dient zur Bestimmung der Viabilität von Zellen vor der Fixierung und Permeabilisierung,Weitere Informationen
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KatalognummerMenge
L3497380 Assays
L34974400 Assays
L10120200 Assays
Katalognummer L34973
Preis (EUR)
210,00
Each
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Menge:
80 Assays
Preis (EUR)
210,00
Each
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Das LIVE/DEAD™ Fixable Far-Red Dead Cell Stain Kit dient zur Bestimmung der Viabilität von Zellen vor der Fixierung und Permeabilisierung, die für die Färbung intrazellulärer Antikörper oder vor der Beseitigung biogefährlicher Materialien mittels Formaldehyd-Fixierung erforderlich ist. Dieses Kit wurde für die Verwendung mit einem Durchflusszytometer mit rotem Laser optimiert und validiert.

• Stabil — Farbstoffe werden in separaten Fläschchen gefriergetrocknet, um Stabilität zu erhalten

• Robust — Färbemuster ist vor und nach der Fixierung gleich

• Helles Signal — Ermöglicht eine einfache Unterscheidung zwischen lebenden/toten Zellen in einem Kanal

Sehen Sie sich eine Auswahlanleitung für alle fixierbaren Viabilitätfarbstoffe für die Durchflusszytometrie an.

Stabil
Im Gegensatz zu Produkten, die als Lösung verkauft werden, wurden die LIVE/DEAD™ Fixable Far-Red Stain praktisch in 40 Testfläschchen verpackt, um eine langanhaltende Stabilität und Leistung des Farbstoffs zu gewährleisten. Amin-reaktive Farbstoffe in Lösung verlieren ihre Wirksamkeit nach kurzer Zeit. Es ist daher empfehlenswert, das Röhrchen nach der Rehydrierung komplett aufzubrauchen. Falls dies nicht möglich ist, aliquotieren Sie die Röhrchen in kleinere Volumen, und bewahren Sie diese bei -80 °C unter Vermeidung von wiederholtem Einfrieren und Auftauen auf.

Robust
Farbstoffe, die zur Kenntlichmachung toter Zellen eingesetzt werden, können nach bestimmten Behandlungsverfahren an Empfindlichkeit verlieren. Dazu gehören die Behandlung mit Fixiermitteln wie Formaldehyd oder Fixiermethoden, die auf Ethanol basieren und die für intrazelluläre Phosphorylierungsstudien benötigt werden. Der LIVE/DEAD™ Fixable Far-Red Stain ist ein Amin-reaktiver Farbstoff, der kovalent an intrazelluläre und extrazelluläre Amine bindet. Das Färbungsmuster bleibt nach der Formaldehyd-Fixierung erhalten.

Optimale Helligkeit
Der LIVE/DEAD™ Fixable Far-Red Stain wurde wegen seiner fluoreszierenden Eigenschaften ausgewählt und erzeugt nach Anregung durch einen rot-Laser ein helles Signal. Der fernrot fluoreszierende reaktive Farbstoff hat ein Erregungsmaximum von ∼633 nm und eignet sich ideal für den Einsatz mit dem roten oder HeNe-Laser mit einer Emission von ∼655 nm. Da lebende und tote Zellen mit einem einzigen Farbstoff und einem einzigen Kanal eines Durchflusszytometers diskriminiert werden können, ist er ideal für mehrfarbige Experimente.

Funktionsweise
In Zellen mit beeinträchtigten Membranen reagiert der Farbstoff mit freien Aminen sowohl im Zellinneren als auch auf der Zelloberfläche, was zu einer intensiven fluoreszierenden Färbung führt. Bei lebensfähigen Zellen ist die Reaktivität des Farbstoffs auf die Amine der Zelloberfläche beschränkt und die Fluoreszenz weniger intensiv. Der Unterschied zwischen den Intensitäten beträgt in der Regel mehr als das 50-Fache zwischen lebenden und toten Zellen, sodass eine Unterscheidung problemlos möglich ist.

Erhältliche Farben
LIVE/DEAD™ Fixable Dead Cell Stains sind in unterschiedlichen Farben erhältlich, um eine flexible Kombination mit anderen Farbstoffen zu ermöglichen.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
ZellpermeabilitätNicht zellgängig
ZelltypEukaryotische Zellen
BeschreibungLIVE/DEAD™ Kit mit fixierbarem Fern-Rot Totzellen-Färbemittel zur Anregung mit 633 oder 635 nm
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypLIVE/DEAD™ fixierbarer tiefroter Totzellen-Farbstoff
FormFest
FormatRöhrchen
Menge80 Assays
VersandbedingungRaumtemperatur
LöslichkeitDMSO (Dimethylsulfoxid)
FarbeFern-Rot
Emission655 nm
Excitation Wavelength Range633 nm
Zur Verwendung mit (Anwendung)Viabilitätsassay
Zur Verwendung mit (Geräte)Durchflusszytometer
ProduktlinieLIVE/DEAD
ProdukttypFärben
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Enthält 2 Fläschchen LIVE/DEAD™ Fixierbares Totzellenfärbemittel und 500 μl DMSO.

Bei -20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How do I prepare dead cell controls for LIVE/DEAD cell viability assays?

There are two easy options. One is to heat-inactivate the cells by placing at 60 degrees C for 20 minutes. The second is to subject the cells to 70% ethanol. Alcohol-fixed cells can be stored indefinitely in the freezer until use, potentially up to several years.

Centrifuge cells, pellet, and remove supernatant.
Fix cells: Add 10 mL ice cold 70% ETOH to a 15 mL tube containing the cell pellet, adding dropwise at first while vortexing, mix well.
Store in freezer until use.
When ready to use, wash twice and resuspend in buffer of choice.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Which cell viability kits are compatible with fixation?

The LIVE/DEAD Fixable kits for flow cytometry analysis are compatible with fixation. These kits use amine-reactive cell-impermeant dyes that stain the cell surface of live cells and also the cytosol of dead cells-live cells are dim and dead cells are bright. Since the dye is covalently bound to the cells, it will be retained after fixation. Unfortunately, this method does not work well for imaging-based assays, as all cells are stained and it is difficult to distinguish bright dead cells from dim live cells with a microscope. Ethidium monoazide (EMA; Cat No. E1374) is a cell impermeant nucleic acid stain that can be applied to live cultures and stains only dead cells. After incubation and washing away unbound dye, the cells can be exposed to light to photoactivate EMA to crosslink to dead cell DNA. After crosslinking to dead cell DNA, the samples may be fixed and permeabilized. Image-IT DEAD Green Viability Stain (Cat. No. I10291) for imaging and high-content screening (HCS) analysis is a live-cell impermeant DNA binding dye that is compatible with fixation and permeabilization with good retention up to 48 hours. We also have a LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability Kit (Cat. No. L7013) for imaging and flow analysis that contains two DNA binding dyes, SYTO 10 and Dead Red, that are sufficiently retained to be analyzed soon after 4% glutaraldehyde fixation.
Note: In general, DNA-binding dyes and calcein AM are not compatible with fixation, as these dyes are not covalently bound to components of the cell and will thus slowly diffuse out of cells after fixation, gradually staining all cells as dead.

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Zitierungen und Referenzen (5)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Levels of circulating endothelial cells are low in idiopathic pulmonary fibrosis and are further reduced by anti-fibrotic treatments.
Authors:De Biasi S, Cerri S, Bianchini E, Gibellini L, Persiani E, Montanari G, Luppi F, Carbonelli CM, Zucchi L, Bocchino M, Zamparelli AS, Vancheri C, Sgalla G, Richeldi L, Cossarizza A,
Journal:
PubMed ID:26552487
'It has been suggested that circulating fibrocytes and endothelial cells actively participate in the intense remodelling of the pulmonary vasculature in patients with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). Indeed, fibrotic areas exist that have fewer blood vessels, whereas adjacent non-fibrotic tissue is highly vascularized. The number of circulating endothelial cells (CEC) ... More
The oxysterol-CXCR2 axis plays a key role in the recruitment of tumor-promoting neutrophils.
Authors:Raccosta L, Fontana R, Maggioni D, Lanterna C, Villablanca EJ, Paniccia A, Musumeci A, Chiricozzi E, Trincavelli ML, Daniele S, Martini C, Gustafsson JA, Doglioni C, Feo SG, Leiva A, Ciampa MG, Mauri L, Sensi C, Prinetti A, Eberini I, Mora JR, Bordignon C, Steffensen KR, Sonnino S, Sozzani S, Traversari C, Russo V,
Journal:
PubMed ID:23897983
'Tumor-infiltrating immune cells can be conditioned by molecules released within the microenvironment to thwart antitumor immune responses, thereby facilitating tumor growth. Among immune cells, neutrophils play an important protumorigenic role by favoring neoangiogenesis and/or by suppressing antitumor immune responses. Tumor-derived oxysterols have recently been shown to favor tumor growth by ... More
CD8+ T cell responses to lytic EBV infection: late antigen specificities as subdominant components of the total response.
Authors:Abbott RJ, Quinn LL, Leese AM, Scholes HM, Pachnio A, Rickinson AB,
Journal:
PubMed ID:24146041
EBV elicits primary CD8(+) T cell responses that, by T cell cloning from infectious mononucleosis (IM) patients, appear skewed toward immediate early (IE) and some early (E) lytic cycle proteins, with late (L) proteins rarely targeted. However, L Ag-specific responses have been detected regularly in polyclonal T cell cultures from ... More
Deficiency of terminal ADP-ribose protein glycohydrolase TARG1/C6orf130 in neurodegenerative disease.
Authors:Sharifi R, Morra R, Appel CD, Tallis M, Chioza B, Jankevicius G, Simpson MA, Matic I, Ozkan E, Golia B, Schellenberg MJ, Weston R, Williams JG, Rossi MN, Galehdari H, Krahn J, Wan A, Trembath RC, Crosby AH, Ahel D, Hay R, Ladurner AG, Timinszky G, Williams RS, Ahel I,
Journal:EMBO J
PubMed ID:23481255
Adenosine diphosphate (ADP)-ribosylation is a post-translational protein modification implicated in the regulation of a range of cellular processes. A family of proteins that catalyse ADP-ribosylation reactions are the poly(ADP-ribose) (PAR) polymerases (PARPs). PARPs covalently attach an ADP-ribose nucleotide to target proteins and some PARP family members can subsequently add additional ... More
G-CSF activation of AKT is not sufficient to prolong neutrophil survival.
Authors:Souza LR, Silva E, Calloway E, Cabrera C, McLemore ML,
Journal:J Leukoc Biol
PubMed ID:23559492
Neutrophils play an important role in the innate immune response against bacterial and fungal infections. They have a short lifespan in circulation, and their survival can be modulated by several cytokines, including G-CSF. Previous studies have implicated AKT as a critical signaling intermediary in the regulation of neutrophil survival. Our ... More