Das Qubit microRNA Assay Kit ermöglicht eine einfache und genaue Quantifizierung von microRNA (miRNA) mit dem Qubit Fluorometer, selbst wenn gängige Kontaminanten wie Salze, freie Nukleotide, Lösungsmittel, Detergenzien und Proteine vorhanden sind. Der Assay ist für miRNA über rRNA oder große mRNA (> 1.000 bp) sehr selektiv. Obwohl das Reagenz nicht ausschließlich für miRNA selektiv ist, konnten wir miRNA in reinen Proben reproduzierbar in Konzentrationen quantifizieren, die im Assay-Röhrchen so niedrig wie 0,5 ng sind. Folgen Sie dem unten angegebenen Protokoll, selbst wenn mRNA vorhanden ist.
Merkmale des Qubit microRNA-Assays:
• Präziser Nachweis von geringen Mengen wie 0,5 ng miRNA im Assay-Röhrchen
• Dynamischer Kernbereich von 5–500 ng/ml
• Genaue Ergebnisse für Probenkonzentrationen von 50 ng/ml bis 100 µg/ml
Das Qubit microRNA Assay Kit enthält ein konzentriertes Assay-Reagenz, einen Verdünnungspuffer und vorverdünnte miRNA-Standards. Einfach das Reagenz mit dem im Lieferumfang enthaltenen Puffer verdünnen, die Probe hinzufügen (ein beliebiges Volumen zwischen 1 µl und 20 µl reicht aus), und die Konzentration mit dem Qubit Fluorometer auslesen. Da der Assay 1–20 µl Probe in einem Assay-Volumen von 200 µl toleriert, können genaue Ergebnisse für anfängliche Probenkonzentrationen von 50 ng/ml–100 µg/ml erzielt werden.
Welches Produkt muss für die microRNA-Quantifizierung ausgewählt werden?• Für 1–20 Proben: Verwenden Sie dieses Qubit microRNA Assay Kit mit dem
Qubit Fluorometer• Für 20–2.000 Proben: Verwenden Sie das
Quant-iT microRNA Assay Kit mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät
• Für >2.000 Proben: Verwenden Sie
Quant-iT microRNA Reagent mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät
Hinweise:
1. Die Qubit microRNA-Assay-Datei ist auf allen Qubit 3 und Qubit 4 Fluorometern enthalten, muss jedoch möglicherweise auf dem Qubit 2.0 Fluorometer installiert werden. Für das Hochladen neuer Assays auf das Qubit 2.0 Fluorometer ist die Version 3.10 oder höher der Qubit Firmware erforderlich.
2.
Dünnwandige 500 µl-PCR-Röhrchen werden benötigt, sind aber nicht im Lieferumfang enthalten.