Die chemische Markierung von herkömmlichem Amin oder Thiol kann zur Markierung der Antigenbindungsdomäne führen oder die Struktur eines Antikörpers beeinträchtigen. Bei der SiteClick Markierungstechnologie erfolgt die Markierung jedoch unter milden Bedingungen an den schweren Ketten eines IgG-Antikörpers, wodurch sichergestellt wird, dass die Antigenbindungsdomänen für die Bindung an Ihr Antigenziel verfügbar bleiben. Da SiteClick Markierungskits eine einfache und schonende, stellenselektive Anbindung von Detektionsmolekülen an schwere N-verknüpfte Glykane ermöglichen – die weit von der Antigenbindungsdomäne entfernt sind – wird eine hervorragende Reproduzierbarkeit bei sequenziellen Markierungen sowie von Antikörper zu Antikörper erzielt. Es sind keine harten Reduktionsschritte erforderlich, und die Antikörpermarkierung ist bei jeder Durchführung konsistent und reproduzierbar.

Der Beschriftungsablauf von SiteClick R-PE, Qdot oder Biotin Antikörpern besteht aus drei Schritten:

1. Modifikation der Kohlenhydratdomäne des Antikörpers,
2. Azidanbindung des Antikörpers und
3. Konjugation mit der DIBO-modifizierten Markierung.

Bei diesem Arbeitsablauf wird die Markierung, die den DIBO-Anteil enthält, mit dem azidmodifizierten Antikörper kovalent durch kupferfreie Click-Chemie verknüpft. Die Markierung von Antikörpern mit dem SiteClick Antikörpermarkierungssystem gibt Ihnen die Gewissheit, dass der Antikörper bei jedem Einsatz auf dieselbe Weise markiert wird, ohne dass eine Optimierung der Reaktion erforderlich ist. Dies bedeutet, dass jedem Molekül die gleiche Anzahl von Farbstoffen zugeordnet ist, die Antigenbindungsstelle erhalten bleibt und jedes Mal dieselben Ergebnisse erzielt werden.

Wichtige Merkmale der SiteClick Qdot Antikörpermarkierungskits:

• Enthalten alles, was für die Markierung von 100 µg IgG-Antikörpern erforderlich ist (100 bis 250 µg IgG-Antikörper mit dem SiteClick Biotin-Antikörpermarkierungskit)
• Einfach zu befolgendes Schritt-für-Schritt-Protokoll, das nur wenige Stunden Arbeitszeit für die Umsetzung erfordert.
• Hocheffiziente, stellenspezifische, reproduzierbare Markierungschemikalien führen zu einem hochwertigen Antikörperkonjugat.