Lambda DNA (dam–, dcm–)

Thermo Scientific Lambda sind temperente Escherichia coli-Bakteriophagen. Die Virion-DNA ist linear und doppelsträngig (48502 bp) mit 12 bp einzelsträngigen komplementären 5’-Enden. Nachdem das Phagenpartikel sein Chromosom in die Zelle injiziert hat, wird das Chromosom durch Verbinden der Enden zum Ringchromosom. Im lytischen Weg werden Phagengene, die Replikations-, Lyse- und Virionproteine codieren, exprimiert. Das Chromosom repliziert sich und die Kopien werden gespalten und in Nachwuchs-Phagenpartikel gebündelt. Im lysogenen Weg wird die Phagen-Genexpression unterdrückt und das Ringchromosom wird durch Rekombination in das Bakterienchromosom eingefügt.

Eigenschaften
Lambda-Phagen-DNA ist ein gängiges Substrat für Restriktionsendonukleasen und für die Erzeugung von DNA-Größenmarkerfragmenten. Für die großräumige Isolierung von Phagen-DNA wird häufig cI857Sam7, eine Mutante mit vier bekannten Mutationen, verwendet. Die zur Erstellung einer Alpha-Phagen-Restriktionskarte herangezogene DNA-Sequenz enthält diese Mutationen.

Lambda-DNA (dam-, dcm-) wird aus einem wärmeinduzierbaren lysogenen E. coli-GM2163-Stamm isoliert.

Anwendungen

• Aktivitäts- und Spezifitätsassays für Restriktionsenzyme, die empfindlich auf dam- oder dcm-Methylierung reagieren
• Vorbereitung von DNA-Molekulargewichtsstandards
• Klonierung

GenBank/EMBL-Zugangsnummern
J02459, M17233, M24325, V00636, X00906