Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie
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Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie

Beurteilen Sie die Zellviabilität mit Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V und konjugierten Fluoreszenzfarbstoffen wie Alexa Fluor 488, FITC, PI, PE, APC und SYTOX Green.
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KatalognummerMengeMarker oder Farbstoff
V132421 KitFITC, Propidiumiodid
V1324150 AssaysAlexa Fluor 488, Propidiumiodid
V351121 KitSYTOX Green, R-PE
V351131 KitSYTOX Green, APC
V13245250 AssaysAlexa Fluor 488, Propidiumiodid
Katalognummer V13242
Preis (EUR)
498,00
1 kit
Menge:
1 Kit
Marker oder Farbstoff:
FITC, Propidiumiodid
Preis (EUR)
498,00
1 kit
Unterscheiden Sie ganz einfach zwischen lebenden, toten und apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mit unseren Totzell-Apoptose-Kits mit Annexin V-Konjugaten, einschließlich Alexa Fluor 488, FITC, Propidium-Iodid, PE, APC und SYTOX Green. Diese Konjugate unterscheiden lebende, tote oder apoptotische Zellen durch verschiedene Färbemittel, was für die Bestätigung der Zellviabilität und Apoptose durch multiparametrische Studien unerlässlich ist.
Die Verwendung von Totzellen-Apoptose-Kits mit Annexin V für die Durchflusszytometrie bietet mehrere Vorteile bei Tests für Zellviabilität:

Hervorragende Helligkeit
Im Gegensatz zu anderen Annexin V-Kits mit niedrigeren Protein-Konzentrationen oder Reinheitsgraden ist das Alexa Fluor 488 Annexin V-Konjugat für die Durchflusszytometrie optimiert und bietet die stärkste Trennung zwischen apoptotischen und lebenden Zellen. Der Alexa Fluor 488 Farbstoff ist ein überragender, grün fluoreszierender Farbstoff mit einem Spektrum, das dem von Fluorescein (FITC) ähnelt.

Hohe Bindungseffizienz
Annexin V-Konjugate werden aus hochreinem Cys-Annexin hergestellt, was zu einer höheren Bindungseffizienz führt und so wiederum zu einer sehr genauen Charakterisierung des Apoptose-Vorgangs.

Multiparametrisch
Viele Publikationen verlangen mindestens zwei verschiedene Verfahren, um Zellen als apoptotisch zu identifizieren. Dieses Multiparameter-Kit erkennt Phosphatidylserin (PS) an der zytoplasmatischen Oberfläche der Zellmembran und die Membranintegrität mittels Propidiumiodid.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V Alexa Fluor 488 &PI
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V Alexa Fluor 488 & Propidiumiodid (PI) (V13241, V13245) wird in der Durchfluss-Zytometrie zur Messung der frühen Apoptose verwendet, indem die Expression von Phosphatidylserin (PS) und die Membrandurchlässigkeit erkannt wird. Wenn Zellen mit Annexin V und Propidiumiodid angefärbt werden, fluoreszieren apoptotische Zellen mit PS-Expression grün (was im FITC-Kanal erkannt werden kann) und hellrot. Tote oder nekrotische Zellen fluoreszieren leuchtend rot und nicht grün, während lebende Zellen weder grün noch rot fluoreszieren.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V PE und SYTOX Green
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V PE und SYTOX Green erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mittels rekombinantem Annexin V, das mit dem orangefarbenen fluoreszierenden Phycobiliprotein R-PE konjugiert ist, während abgestorbene Zellen mit dem Nukleinsäure-Farbstoff SYTOX Green nachgewiesen werden. Nach der Behandlung mit beiden Sonden fluoreszieren apoptotische Zellen orange, tote Zellen grün und lebende Zellen wenig oder gar nicht. Diese Populationen lassen sich mit einem 488 nm-Laser-Durchflusszytometer leicht in den 530/30 nm und 585/42 nm Bandpassfiltern unterscheiden.

Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V APC und SYTOX Green
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V APC und SYTOX Green erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen während der Durchfluss-Zytometrie mittels rekombinantem Annexin V, das mit durch roten Laserstrahl angeregtes Allophycocyanin konjugiert ist, während abgestorbene Zellen mit dem Nukleinsäure-Farbstoff SYTOX Green behandelt werden. Apoptotische Zellen werden durch Annexin V-Bindung an externalisierte PS nachgewiesen. Lebende Zellen zeigen wenig oder keine Fluoreszenz, apoptotische Zellen zeigen rote Fluoreszenz und sehr wenig grüne Fluoreszenz, und späte apoptotische Zellen zeigen eine höhere Fluoreszenz von Rot und Orange. Diese Populationen lassen sich problemlos mit Hilfe eines Durchflusszytometers unterscheiden, das sowohl über eine Anregungsquelle von 488 nm als auch über eine Anregungsquelle von 633 nm verfügt (ein Argon-Ionen-Laser und ein HeNe-Laser).

Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V FITC und PI
Das Totzell-Apoptose-Kit mit Annexin V FITC und PI erkennt die PS-Externalisierung in apoptotischen Zellen mittels rekombinantem Annexin V, das mit mit grün-fluoreszierendem FITC-Färbemittel und toten Zellen mit PI konjugiert ist. Nekrotische Zellen, die sich mit PI färben, zeigen eine rote Fluoreszenz. Nach der Behandlung mit beiden Sonden fluoreszieren apoptotische Zellen grün, tote Zellen rot und grün sowie lebende Zellen wenig oder gar nicht.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
BeschreibungTotzell-Apoptose-Kit mit Annexin V FITC und PI für die Durchflusszytometrie
Anregung/Emission494, 535/518, 617
Durchflusszytometer-Laserlinien488
Zur Verwendung mit (Geräte)Durchflusszytometer
KitinhaltEnthält 1 Fläschchen Annexin V, FITC-Konjugat (250 µl), 1 Fläschchen Propidiumiodid (PI, 100 µl) und 1 Flasche Annexin-Bindungspuffer (5x Lösung, 15 ml).
Marker oder FarbstoffFITC, Propidiumiodid
Anzahl Reaktionen50
ProdukttypApoptose-Nachweiskit
Menge1 Kit
VersandbedingungNasseis
Unit Size1 kit
Inhalt und Lagerung
Im Kühlschrank (2  bis 8 °C) aufbewahren und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I want to study apoptosis using an Annexin V conjugate, but with adherent cells via microscopy instead of flow cytometry. Can this be done?

It has been done, but we don‘t recommend it. Both healthy cells and apoptotic cells possess phosphatidylserine on the cell surface, which can be detected with Annexin V, but apoptotic cells have significantly more of it. You can easily tell the difference between these two populations with flow cytometry, because flow cytometers are more sensitive and have a higher throughput. But with a microscope, you cannot always tell the difference, especially for adherent cells. Instead, for microscopy, we recommend a different technique, such as detecting caspases with CellEvent Caspase Detection Reagents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When using Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry, what does a PI+ only population (hence Annexin V negative) correspond to?

These products are cells that died without undergoing apoptosis. A PI+ only population could be either a result of experimental condition or sample preparation.

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I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Zitierungen und Referenzen (34)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Phenotypic and functional effects of heat shock protein 90 inhibition on dendritic cell.
Authors:Bae J,Mitsiades C,Tai YT,Bertheau R,Shammas M,Batchu RB,Li C,Catley L,Prabhala R,Anderson KC,Munshi NC
Journal:Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)
PubMed ID:17548610
Chitin is a size-dependent regulator of macrophage TNF and IL-10 production.
Authors:Da Silva CA, Chalouni C, Williams A, Hartl D, Lee CG, Elias JA,
Journal:J Immunol
PubMed ID:19265136
'Chitin is a ubiquitous polysaccharide in fungi, insects, and parasites. We hypothesized that chitin is a size-dependent regulator of innate immunity. To test this hypothesis, we characterized the effects of chitins of different sizes on murine bronchoalveolar or peritoneal macrophages. In these studies, large chitin fragments were inert, while both ... More
The ubiquitin-like protein FAT10 forms covalent conjugates and induces apoptosis.
Authors:Raasi S, Schmidtke G, Groettrup M
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11445583
'FAT10 is a ubiquitin-like protein that is encoded in the major histocompatibility complex class I locus and is synergistically inducible with interferon-gamma and tumor necrosis factor alpha. The molecule consists of two ubiquitin-like domains in tandem arrangement and bears a conserved diglycine motif at its carboxyl terminus commonly used in ... More
Apoptosis in tumour cells photosensitized with Rose Bengal acetate is induced by multiple organelle photodamage.
Authors:Soldani C, Croce AC, Bottone MG, Fraschini A, Biggiogera M, Bottiroli G, Pellicciari C,
Journal:Histochem Cell Biol
PubMed ID:17849139
'Rose Bengal (RB) is a very efficient photosensitizer which undergoes inactivation of its photophysical and photochemical properties upon addition of a quencher group-i.e. acetate-to the xanthene rings. The resulting RB acetate (RB-Ac) derivative behaves as a fluorogenic substrate: it easily enters the cells where the native photoactive molecule is restored ... More
Thiol/disulfide exchange is required for membrane fusion directed by the Newcastle disease virus fusion protein.
Authors:Jain S, McGinnes LW, Morrison TG
Journal:J Virol
PubMed ID:17151113
'Newcastle disease virus (NDV), an avian paramyxovirus, initiates infection with attachment of the viral hemagglutinin-neuraminidase (HN) protein to sialic acid-containing receptors, followed by fusion of viral and cell membranes, which is mediated by the fusion (F) protein. Like all class 1 viral fusion proteins, the paramyxovirus F protein is thought ... More