Las columnas de centrifugación de glutatión Thermo Scientific Pierce proporcionan un formato rápido y fácil de usar para purificar proteínas de fusión de GST a partir de lisados celulares.

Características del glutatión agarosa:

• Gran capacidad: une al menos 40 mg de proteína GST recombinante purificada por milímetro de resina
• Gran producción y pureza: purifica de forma consistente al menos 10 mg de proteínas con etiquetas GST por mililitro de resina con una pureza superior al 90 %
• Rentable: la resina tiene un precio económico y se puede volver a usar al menos cinco veces sin reducción de la capacidad de unión y del rendimiento de purificación
• Versátil: funciona bien para la purificación de proteínas de fusión de GST de lisados bacterianos o para su uso con proteínas marcadas con GST prepurificadas para la extracción de interacciones de proteínas
• Compatible: validado y efectivo para su uso con los reactivos de lisis celular Thermo Scientific para la extracción y purificación de cultivos celulares de mamíferos o bacterianos

El glutatión está inmovilizado a través de su sulfhidrilo central en la resina de agarosa entrecruzada al 6 %. La purificación de las proteínas de fusión con GST utilizando gránulos de agarosa con glutatión (GSH) está bien documentada y proporciona una purificación de afinidad de un solo paso y de alta pureza. Tanto si el propósito es purificar grandes cantidades de proteína recombinante procedente de lisados de E. coli sobreexpresados o investigar interacciones de proteínas en las que participen proteínas de cebo marcadas con GST, el glutatión-agarosa Pierce es adecuado para la tarea.

El glutatión-agarosa Thermo Scientific Pierce también se ofrece en tres volúmenes de mezcla de resina, kits completos de purificación de GST, dos tamaños de cartuchos de cromatografía listos para FPLC y placas de filtro de 96 pocillos para grandes volúmenes de muestras.

El glutatión-agarosa Pierce purifica eficazmente altos niveles de proteínas de fusión marcadas con GST sobreexpresadas procedentes de lisados bacterianos, tales como las obtenidas con los reactivos de extracción de proteínas bacterianas Thermo Scientific BPER.

El glutatión-agarosa Pierce realiza procedimientos de unión, ya sea en lotes o en columnas de centrifugado, y en amplia variedad de escalas. El rendimiento iguala o supera el de las conocidas resinas de GSH de otros proveedores.

El glutatión-agarosa Pierce es un soporte de afinidad de alta calidad, estable y distensible. Las pruebas confirman la ausencia de reducciones en el rendimiento después de cinco ciclos de uso repetidos. Estos datos indican que la resina es altamente resistente a la degradación estructural y a la lixiviación de ligandos durante el uso normal.

La expresión y purificación de proteínas recombinantes es esencial para los estudios de regulación, estructura y función de proteínas. La mayoría de las proteínas recombinantes se expresan como fusiones con proteínas pequeñas o etiquetas de afinidad cortas, tales como la glutatión S-transferasa (GST). Esta proteína se une específicamente a glutatión reducido (GSH) en condiciones casi neutras no desnaturalizadoras (p. ej., tampón Tris). La proteína unida se disocia (eluye) fácilmente mediante desplazamiento competitivo con tampón que contiene GSH reducido libre (glutatión oxidado, el GSSH no es eficaz para este propósito). Cuando las proteínas de interés se expresan como fusiones con GST y el glutatión es inmovilizado en un soporte sólido, este sistema proteína-sustrato permite la purificación por afinidad de proteínas recombinantes, así como otra serie de experimentos con esas proteínas.

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