Pierce™ Glutathione Chromatography Cartridges

Los cartuchos de cromatografía de glutatión Thermo Scientific Pierce son dispositivos preempaquetados cómodos, de fácil uso para la purificación de proteínas de fusión GST de lisados celulares.

Características de glutatión agarosa:

• Gran capacidad: une al menos 40 mg de proteína GST recombinante purificada por milímetro de resina
• Gran producción y pureza: purifica de forma consistente al menos 10 mg de proteínas con etiquetas GST por milímetro de resina con una pureza superior al 90 %
• Rentable: la resina tiene un precio económico y puede reutilizarse al menos cinco veces sin que se reduzca su capacidad de unión y el rendimiento de la purificación
• Versátil: funciona bien para la purificación de proteínas de fusión de GST de lisados bacterianos o para su uso con proteínas marcadas con GST prepurificadas para el «pull-down» de interacciones de proteínas
• Compatible: validado y eficaz para el uso con los reactivos de lisis celular Thermo Scientific a fin de extraer y purificar a partir de cultivos de células bacterianas o de mamíferos

El glutatión está inmovilizado a través de su sulfhidrilo central en la resina de agarosa entrecruzada al 6 %. La purificación de las proteínas de fusión con GST utilizando gránulos de agarosa con glutatión (GSH) está bien documentada y proporciona una purificación de afinidad de un solo paso y de alta pureza. Tanto si el propósito es purificar grandes cantidades de proteína recombinante procedente de lisados de E. coli sobreexpresados o investigar interacciones de proteínas en las que participen proteínas de cebo marcadas con GST, el glutatión agarosa Pierce es adecuado para la tarea.

El glutatión agarosa Thermo Scientific Pierce también se ofrece en tres volúmenes de pulpa de resina, kits completos de purificación de GST, dos tamaños de cartuchos de cromatografía listos para FPLC y placas filtrantes de 96 pocillos para necesidades de alto rendimiento.

El glutatión agarosa Pierce purifica eficazmente altos niveles de proteínas de fusión marcadas con GST sobreexpresadas procedentes de lisados bacterianos, tales como las obtenidas con los reactivos de extracción de proteínas bacterianas Thermo Scientific B-PER.

El glutatión agarosa Pierce realiza procedimientos de unión, ya sea en lotes o en columnas de centrifugado, y en una amplia variedad de escalas. El rendimiento iguala o supera el de las resinas de GSH populares de otros proveedores.

El glutatión agarosa Pierce es un soporte de afinidad de alta calidad, estable y distensible. Las pruebas confirman la ausencia de reducciones en el rendimiento después de cinco ciclos de uso repetidos. Estos datos indican que la resina es altamente resistente a la degradación estructural y a la lixiviación de ligandos durante el uso normal.

La expresión y purificación de proteínas recombinantes es un factor central para estudiar la regulación, estructura y funciones de las proteínas. La mayoría de las proteínas recombinantes se expresan como fusiones con proteínas pequeñas o etiquetas de afinidad cortas, tales como la glutatión S-transferasa (GST). Esta proteína se une específicamente a glutatión reducido (GSH) en condiciones casi neutras no desnaturalizadoras (p. ej., tampón de Tris). La proteína unida se disocia (eluye) fácilmente mediante desplazamiento competitivo con tampón que contiene GSH reducido libre (glutatión oxidado, el GSSH no es eficaz para este propósito). Cuando las proteínas de interés se expresan como fusiones con GST y el glutatión es inmovilizado en un soporte sólido, este sistema proteína-sustrato permite la purificación por afinidad de proteínas recombinantes, así como otros varios experimentos con esas proteínas.

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