Le mini kit d’ARN PureLink est à base de colonnes utilisées pour l’isolement de l’ARN total de haute qualité à partir d’une grande variété de types d’échantillons, en 20 minutes, à l’aide d’un équipement de laboratoire standard. Le kit inclut des solutions de lyse et de nettoyage sans ARNase qui protègent l’ARN des ARNases, tout en libérant l’ARN de l’ADN, des protéines et d’autres débris cellulaires. Le flux de travail rapide des colonnes de centrifugation convient parfaitement au traitement de lots avec un débit réduit à intermédiaire. La conception avancée de la mini colonne de centrifugation pour ARN PureLink permet de procéder à maximum d’entrée d’échantillon (200 mg de tissu) et de récupération de l’ARN (jusqu’à 1 000 µg). Cela signifie qu’un utilisateur peut traiter des échantillons de petites et de grandes tailles avec le même kit d’isolement d’ARN.

• Traitement des entrées d’échantillons de 5 à 200 mg de tissu animal / végétal ou de 0,5 x 10⁶ à 10⁸ cellules de culture tissulaire avec une colonne de centrifugation en 20 minutes
• Isolement de l’ARN supérieur à celui des mini colonnes de centrifugation disponibles ailleurs : jusqu’à 1 000 µg d’ARN total à partir d’une colonne
• Utilisez de l’ARN isolé dans la plupart de vos applications sans avoir besoin d’un traitement par DNase supplémentaire (report minimal d’ADN résiduel)
• Flexible : traitement optionnel à base de DNase sur colonne ou post-isolement disponible avec l’ensemble DNase PureLink pour faciliter l’élimination de l’ADN résiduel

Capacité de liaison extralarge permettant de rapidement purifier l’ARN avec un équipement de laboratoire standard
Le mini kit d’ARN PureLink permet de rapidement purifier l’ARN total à partir d’une large gamme de types cellulaires et tissulaires pour un rendement pouvant atteindre 1 000 µg d’ARN purifié à partir d’une seule extraction (voir figure 1). L’ARN total de haute qualité peut s’obtenir à partir de quantités de préparation mini à midi de matériau de départ, avec seulement des traces de contamination résiduelle de l’ADN génomique. La capacité de liaison extralarge d’un kit lui permet de gérer la plupart des besoins d’isolement d’ARN, dans un protocole rapide de 20 minutes, sans avoir besoin d’instruments de traitement d’échantillons spéciaux.

Traitement optionnel à base de DNase sur colonne, facile à utiliser, pour les applications sensibles
Les colonnes du mini kit pour ARN PureLink sont très efficaces pour isoler l’ARN total de haute qualité tout en éliminant la majorité de l’ADN génomique. En général, la plupart des applications nécessitant de l’ARN provenant de tissus animaux ou de lignées cellulaires de mammifères ne nécessitent pas de traitement supplémentaire à base de DNase. Cependant, certaines applications telles que l’analyse de l’expression génétique par RT-qPCR sans amorces couvrant l’intron ou les tâches avec des échantillons tirés d’organismes avec de très petits introns ou sans introns peuvent nécessiter une élimination plus complète de l’ADN contaminant résiduel. L’ensemble DNase PureLink permet de réaliser une digestion pratique de l’ADN sur colonne pendant le protocole d’isolement de l’ARN. Il est plus facile de procéder au traitement à base de DNase alors que l’on est “sur colonne”. Cela permet de récupérer davantage d’ARN qu’avec le traitement par DNase après l’isolement de l’ARN. L’ensemble DNase PureLink peut également être utilisé pour éliminer l’ADN résiduel de l’ARN qui a été purifié auparavant. Les flux de travaux “sur colonne” et après la purification de l’ARN sont des options disponibles avec l’ensemble DNase PureLink.

Purification simplifiée et non toxique de l’ARN
Le mini kit pour ARN PureLink utilise un tampon de lyse non toxique à base de guanidine-isothiocyanate pour protéger l’ARN pendant les étapes d’isolement. La combinaison de réactifs spéciaux sans ARNase avec des membranes de silice exemptes d’ARNase certifiées dans une colonne individuelle permet de réaliser une procédure sûre et facile, pouvant généralement être effectuée en moins de 20 minutes, sans nécessiter d’extraction dangereuse de phénol/chloroforme, de centrifugation de CsCl ou de précipitation de LiCl ou d’alcool.

Il est recommandé d’utiliser le mini kit pour ARN PureLink avec l’homogénéiseur (n° cat. 12183026), conçu pour homogénéiser les lysats cellulaires ou tissulaires par centrifugation, avant la purification des acides nucléiques. L’homogénéiseur est particulièrement efficace pour clarifier les particules des tissus végétaux.

Nous recommandons, pour les tissus végétaux riches en polyphénoliques ou en amidon (par exemple, aiguilles de pin, tubercules de pomme de terre) d’utiliser le réactif d’ARN végétal PureLink (Réf. 12322012) avec le mini kit d’ARN PureLink.