Système de RT-PCR en une étape SuperScript™ IV
Invitrogen™

Système de RT-PCR en une étape SuperScript™ IV

Le système de RT-PCR en une étape Invitrogen SuperScript IV associe la haute processivité de la transcriptase inverse (RT) SuperScriptAfficher plus
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RéférenceComprendNbre de réactions
12595100Kit with ezDNase100 réactions
12594100Kit only100 réactions
Référence 12595100
Prix (EUR)
1 392,00
Each
Comprend:
Kit with ezDNase
Nbre de réactions:
100 réactions
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
1 392,00
Each
Le système de RT-PCR en une étape Invitrogen SuperScript IV associe la haute processivité de la transcriptase inverse (RT) SuperScript IV et la haute fidélité de l’ADN polymérase Platinum SuperFi pour offrir une RT-PCR en une étape inégalée. Grâce à cette formulation simple et à des amorces spécifiques aux gènes, vous pouvez réaliser la synthèse d’ADNc à partir de l’ARN total ou de l’ARNm et de l’amplification PCR dans un seul tube.

Caractéristiques du système de RT-PCR SuperScript IV en une étape :
• Des performances supérieures avec une sensibilité jusqu’à 0,01 pg d’ARN, une longueur cible jusqu’à 13,8 kb et le protocole RT-PCR en une étape le plus rapide
• Détection fiable de cibles même avec des échantillons d’ARN de pureté sous-optimale
• Mécanisme d’activation de démarrage à chaud en deux phases pour une sensibilité élevée, une spécificité et la configuration à température ambiante

La RT SuperScript IV est un mutant MMLV RT exclusif avec une augmentation de la processivité, de la thermostabilité et de la résistance aux inhibiteurs, ainsi qu’une réduction de l’activité RNase H, pour une synthèse d’ADNc pleine longueur sensible et efficace. L’ADN polymérase Platinum SuperFi est une ADN polymérase à activité corrective qui associe une fidélité supérieure à la technologie de démarrage à chaud Platinum fiable pour des résultats optimaux de la PCR. La combinaison de ces deux enzymes développées produit des rendements et une fidélité de RT-PCR améliorés, ainsi que l’amplification de modèles plus longs par rapport à d’autres kits de RT-PCR en une étape.

Pour de meilleures performances, nous proposons le système de RT-PCR SuperScript IV en une étape avec ezDNase. L’ezDNase améliore en outre le flux de travail en une étape de RT-PCR grâce à une étape extrêmement simplifiée d’élimination de l’ADN génomique qui garantit la plus grande précision et la plus grande confiance dans les résultats en une étape de RT-PCR.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produit finalADNc amplifié par PCR
FormatKit
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
ComprendKit with ezDNase
Nbre de réactions100 réactions
Température de réaction optimale45 à 60°C
PolymérasePlatinum SuperFi
Quantité1 Ea.
Format de réactionMaster Mix
Type de réactifTranscription inverse
Transcriptase inverseSuperScript IV
Activité de la ribonucléase HRéduction
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)Jusqu’à 14 kb
Matériau de départARN
TechniqueRT-PCR en 1 étape
Méthode de détectionGel Electrophoresis
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Méthode PCRRT-qPCR en 1 étapes
Vitesse de réaction10 min
Unit SizeEach
Contenu et stockage

• Mélange RT SuperScript IV (50 μl)
• Master Mix de RT-PCR Platinum SuperFi 2X (2 x 1,25 ml)
• Enzyme ezDNase (100 μl)
• Tampon ezDNase 10X (100 μl)
• Eau sans nucléase (2 x 1,25 ml)

Conserver à –20°C.

Foire aux questions (FAQ)

In your SuperScript IV RT protocols, there is no ezDNase inactivation step. Will ezDNase be active to affect RNA or the RT reaction?

The Invitrogen ezDNase Enzyme is a novel DNase that is highly specific for double-stranded DNA. It has no activity on single-stranded DNA in RT reactions (primers or probes), or on RNA. The enzyme is also thermolabile—it is inactivated quickly at temperatures typical for the SuperScript IV RT reaction (e.g., 50 degrees C). The additional inactivation step is therefore not required for most RT-qPCR applications. If the RNA sample is to be used for RT-PCR of fragments ≥3 kb, incubate the sample for 5 minutes at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT to inactivate the enzyme.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

Which SuperScript IV RT format do you recommend for real-time PCR applications?

For RT-qPCR applications we recommend using the Invitrogen SuperScript IV VILO Master Mix. The cDNA synthesis reaction setup with this master mix requires fewer pipetting steps and therefore reduces variation in the data. SuperScript IV RT, as a component of the master mix, offers the highest efficiency of cDNA synthesis step compared to competitors’ products.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

Are there any significant changes in the SuperScript IV RT protocol compared to the SuperScript III RT protocol?

The only difference is that the incubation time for the reverse transcription reaction has been reduced to 10 minutes and inactivation time has been reduced to 5 minutes at 85 degrees C.

Can I get comparable cDNA yield and length using the SuperScript IV RT 10-minute protocol as when using the 50-minute protocol for SuperScript III RT?

When compared with SuperScript III RT (and other manufacturers’ RTs) in a synthesis reaction for a 9 kb cDNA, SuperScript IV RT performed successful synthesis in just 10 minutes and did so with comparable (or improved) yield (as shown by gel band density).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

Do you offer a one-step RT-qPCR kit containing SuperScript IV RT?

SuperScript IV RT is not recommended for one-step RT-qPCR applications. However, it is included in end-point one-step RT-PCR kits: https://thermofisher.com/ssiv-onestep

For one-step RT-qPCR, we recommend SuperScript III Flash Reverse Transcriptase or TaqPath RT-qPCR Master Mix products.