Pierce™ Avidin Agarose

L’agarose à l’avidine Thermo Scientific Pierce peut être utilisée dans diverses applications pour la purification par affinité des macromolécules biotinylées.

Caractéristiques de l’Avidin Agarose :

• Interaction biotine : avidine forte, presque irréversible
• Liaison de l’anti-transferrine biotinylée à partir du sérum (1)
• liaison de peptides biotinylés et élution avec une solution SDS/urée (2)
• Hybridation de l’ARN biotinylé à son ADN complémentaire et liaison à l’avidine immobilisée, avec élution ultérieure de l’ADN simple brin (3)
• Purification de l’ADN double brin (4)
• Capacité de liaison approximative >20 µg de biotine/ml de résine

Dans une variation, un anticorps ayant une affinité pour un antigène particulier est marqué avec la biotine. Les cellules contenant l’antigène sont lysées, puis incubées avec l’anticorps biotinylé pour former un complexe antigène/anticorps typique. Pour isoler l’antigène, le mélange brut passe par une colonne d’avidine ou de streptavidine immobilisée, qui lira le complexe. Après des lavages appropriés, l’antigène peut alors être élué à partir de la colonne avec un tampon d’élution de pH 2,8. L’anticorps biotinylé est retenu par la colonne.

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