AminoLink™ Coupling Resin

La résine de couplage Thermo Scientific AminoLink est une agarose à microbilles réticulée à 4 % qui a été activée avec des groupes aldéhyde pour permettre l’immobilisation covalente d’anticorps et d’autres protéines par le biais d’amines primaires.

Caractéristiques de la résine de couplage AminoLink :

• Résine de couplage AminoLink —agarose en microbilles 4 % réticulée activée à l’aldéhyde
• Idéal pour les anticorps et les autres protéines — immobilise les molécules via des amines primaires (-NH2)
• Conditions de couplage flexible —efficace (>85 %) couplage sur une large gamme de pH (4 à 10) et de conditions de tampon (PBS ou autre tampon non amine avec ou sans solvant organique)
• Immobilisation stable et permanente —La réaction de couplage résulte en une liaison d’amine secondaire stable et résistante aux fuites entre la résine et le ligand
• Mieux que l’immobilisation à l’agarose activée par CNBr —la liaison est plus stable et non chargée, résultant en une liaison inférieure non spécifique dans les procédures de purification par affinité
• Polyvalent et réutilisable —La résine d’affinité préparée est adaptable aux techniques d’affinité de colonnes et de lots et la résine est réutilisable pour les applications typiques basées sur les interactions de liaison protéique

Les protéines et autres molécules avec des amines primaires peuvent être associées de manière covalente (immobilisées) à la résine pour produire des colonnes de chromatographie à utiliser dans la purification par affinité. Les groupes d’aldéhyde forment des liaisons d’amines secondaires stables avec des amines primaires telles qu’elles existent dans la chaîne latérale des résidus de lysine (K), qui sont généralement abondantes et facilement accessibles dans les protéines. Une fois qu’une protéine est immobilisée, la résine d’affinité préparée peut être utilisée pour une variété de méthodes de purification par affinité de lots et de colonnes impliquant des interactions de liaison avec la protéine immobilisée. La résine et la liaison sont stables dans la plupart des conditions de liaison et d’élution généralement utilisées dans la chromatographie d’affinité, ce qui permet à la résine préparée d’être utilisée pour de nombreux cycles de purification par affinité.

La réaction d’immobilisation de la résine AminoLink implique la formation spontanée de liaisons de base Schiff entre les aldéhydes et les amines et leur stabilisation subséquente par incubation avec un réducteur léger. Toute la réaction de couplage, appelée amination réductrice, se produit entre 4 à 6 heures dans des tampons simples non amines tels que le PBS. L’efficacité du couplage avec les anticorps et les protéines typiques est généralement supérieure à 85 %, ce qui donne 1 à 20 mg de protéines immobilisées par millilitre de résine.

Produits associés
AminoLink™ Kit d’immobilisation
AminoLink™ réducteur